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大豆苷元对人乳牙牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响
目的 探讨大豆苷元对人乳牙牙髓干细胞(SHED)增殖和分化的影响.方法 对体外培养的第3代SHED用浓度分别为0.1、1、10、100 μM的大豆苷元培养基进行培养,采用MTT法检测细胞生长曲线,通过碱性磷酸酶(ALP)试剂盒、放免法和TGF-β1 Elisa试剂盒检测大豆苷元对SHED碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素(OCN)以及TGF-β1表达的影响.结果 0.1 μM的大豆苷元能够显著促进SHED的增殖,而高浓度(100μM)的大豆苷元则对SHED的增殖具有明显的抑制作用.大豆苷元剂量依赖性地促进了SHED ALP、OCN和TGF-β1的表达.结论 大豆苷元对SHED的增殖和成骨分化具有促进作用,其促成骨分化机制可能与增加TGF-β1表达有关.武斌,孟秋菊,谢春,黄谦,魏波,陈敏莹 - 昆明医科大学学报文章来源: 万方数据 -
MicroRNA-378*通过抑制CTGF促进人骨髓间充质干细胞凋亡
目的:研究年龄相关microRNA-378*(miR-378*)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)存活和凋亡的调控作用。方法:通过microRNA芯片和qRT-PCR检测供体年龄对hMSCs中miR-378*表达的影响;通过H2 O2诱导hMSCs凋亡;通过转染miR-378*模拟物或抑制物,过表达或抑制miR-378*的表达;用MTT、LDH、caspase-3/7、TUNEL检测等方法研究其对hMSCs存活和凋亡的影响;通过siRNA研究结缔组织生长因子( CTGF)对hMSCs存活和凋亡的影响。结果:随供体年龄增加,hMSCs中miR-378*的表达增加。 H2 O2刺激可促进miR-378*表达,抑制CTGF表达。过表达miR-378*可减少hMSCs的存活,促进细胞凋亡。相反,抑制miR-378*的表达促进hMSCs的存活,减少细胞凋亡。同时抑制miR-378*和CTGF的表达,使miR-378*失去对hMSCs存活和凋亡的调控作用。直接抑制CTGF的表达可减少hMSCs的存活,促进细胞凋亡。结论:miR-378*通过抑制CTGF的表达减少hMSCs存活,促进hMSCs凋亡。董珺,曾波航,刘宁宁,莫沛,熊龙根,刘世明,黎佼 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
晚期糖基化终产物对人脂肪间充质干细胞功能影响的体外研究
目的:探讨晚期糖基化终产物(AGEs)对人脂肪来源的间充质干细胞(hADSCs)促进创伤修复功能的影响.方法:体外培养hADSCs,实验分为牛血清白蛋白(BSA)对照组、低浓度糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)效应组和高浓度AGE-BSA效应组.采用WST法和Transwell迁移实验检测各组细胞增殖和迁移情况.应用实时定量PCR和ELISA检测各组细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)、肝细胞生长因子(HGF)和胰岛素样生长因子1(IGF-1)的表达.结果:与对照组相比,AGE-BSA组增殖能力和迁移能力明显下降(P<0.05),VEGF、HGF和IGF-1 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05).结论:AGEs能损伤hADSCs的促进创伤修复功能,因而能够影响hADSCs治疗糖尿病皮肤溃疡病的治疗效果.王哲,刘晓玉,张殿宝,王秋实 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
连续传代培养对 hUC-MSCs 上NLR 家族 mRNA 表达的影响
目的:探讨连续传代培养对人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)表达NOD样受体(NLR)家族所有23个成员mRNA的影响,为改进hUC-MSCs传代培养质量与增加hUC-MSCs在实验和临床应用中的数量及安全性寻找切入途径。方法:取剖宫产无菌新生儿脐带,经胶原酶II消化结合贴壁选择分离纯化hUC-MSCs,并连续传代培养;采用流式细胞术、诱导分化和RT-qPCR对连续培养传代前后的hUC-MSCs(第3和28代)进行鉴定并对23个NLR家族成员mRNA的表达进行定量分析。结果:连续传代培养前后hUC-MSCs的细胞表型均为CD29+/CD44+/CD105+/CD31-/CD34-/CD40-/CD45-/CD106-/HLA-DR-,能被诱导为成骨和脂肪细胞,符合国际细胞治疗协会建议的MSCs基本特征。全部NLR家族成员的mRNA在培养第3代hUC-MSCs上均有表达,且NOD1、NLRC4、NL-RC5、NLRP1、NLRP3、NLRP10、NAIP、NLRX1和APAF1高表达,其余成员低表达。培养传代至第28代除NLRP10的mRNA表达上升、NLRC5和NLRX1 mRNA表达基本不变外,其余成员的mRNA表达均有所下降,其中NLRP1 mR-NA表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体外连续传代培养对hUC-MSCs表达NLR家族成员的影响是多向性的。这些影响与MSCs的增殖、分化及其免疫调节功能的联系有待进一步实验探讨。- 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
热休克蛋白70对大鼠牙髓细胞高温损伤的影响
目的:研究预热处理诱导的热休克蛋白70(HSP70)对受高温损伤的大鼠牙髓细胞的影响.方法:将体外培养的大鼠牙髓细胞随机分为4组,分别为正常对照组(C组):37℃常规培养18 h;预热处理组(pH组):37℃常规培养9h后42℃培养1h,再复温培养8h;高温损伤组(SH组):37℃常规培养9h后46℃培养1h,再复温培养8h;预热处理+高温损伤组(pH+SH组):42 ℃培养1h后恢复常规培养8h,再置于46℃培养1h后恢复常规培养8h.以Western Blot检测细胞内HSP70的表达变化;以四唑盐(MTT)比色法、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染法、细胞形态学观察评价细胞存活能力.结果:Western Blot显示,与C组相比较PH组HSP70表达上调;MTT比色法、AO/EB双染法、细胞形态学观察均显示pH+SH组较SH组的细胞存活能力强.结论:预热处理可诱导大鼠牙髓细胞中的HSP70表达上调,减轻高温对牙髓细胞的损伤.裴页石,刘英群,吕晶,金星爱,王锐 - 口腔医学研究文章来源: 万方数据 -
MicroRNA-196a通过HOXB7调控人骨髓间充质干细胞的增殖功能
目的:研究年龄相关microRNA-196a(miR-196a)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖功能的调控作用.方法:通过MTT研究年龄对hMSCs增殖能力的影响.通过microRNA芯片和qRT-PCR检测年龄对miR-196a表达的影响.通过转染miR-196a模拟物或抑制物,研究其对hMSCs增殖能力的影响.通过萤光素酶报告基因系统证实HOXB7为miR-196a的靶基因.通过siRNA研究HOXB7对碱性成纤维细胞生f长因子(bFGF)表达及hMSCs增殖功能的影响和研究bFGF对hMSCs增殖功能的影响.结果:随年龄增加,hMSCs的增殖能力下降,miR-196a的表达增加.miR-196a可抑制hMSCs的增殖.抑制miR-196a的表达可促进hMSCs的增殖.同时抑制miR-196a和HOXB7的表达,使miR-196a失去对hMSCs增殖能力的调控作用.抑制HOXB7的表达可使bFGF的表达下调.直接抑制HOXB7或bFGF的表达可抑制hMSCs的增殖.结论:miR-196a通过抑制HOXB7及bFGF的表达导致hMSCs增殖能力下降.黎佼,董珺,张振辉,田朝伟,成传访,吴功雄,刘世明 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
活性氧在多能干细胞中的作用
多能干细胞是具有自我更新能力和能向体内多种细胞分化的一类细胞群体.活性氧(reactive oxy gen species,ROS)是反应活性极强的代谢分子.虽然过多的ROS会对干细胞产生毒性,引起干细胞的衰老和凋亡,但是ROS的调节在维持干细胞的干性和分化中起重要作用.ROS在不同的干细胞中发挥的作用也不尽相同.深入了解ROS如何调控干细胞的功能将有助于加强干细胞在转化医学方面的应用.本文将以胚胎干细胞和诱导性多能干细胞为主,对近年来ROS调节多能干细胞功能的研究进行简要综述.徐洁,刘俊许,康雪玲,蒋丽,周忠伟,陈思锋,孟丹 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
人骨髓间充质干细胞体外不同分离与培养方法的比较
目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)理想的分离、培养方法.方法 采用密度梯度离心法和全骨髓贴壁法分离培养人骨髓干细胞,并将其分别置于普通培养瓶、60Co培养瓶中培养,应用倒置显微镜和免疫组化法观察和鉴定骨髓间充质干细胞;流式细胞术检测细胞表面标志.结果 人骨髓干细胞呈均一梭形、成纤维细胞样,形成集落样生长.60Co培养瓶细胞贴壁情况明显好于普通培养瓶,且费用低;免疫组化及流式细胞术显示CD34、CD45表达为阴性,CD29、CD44表达为阳性.60Co照射处理的培养瓶结合采用全骨髓贴壁法分离培养法获得的骨髓干细胞活性高,增殖力强,克隆形成早,传代时间短.结论 全骨髓贴壁法和密度梯度离心法均可获得高纯度贴壁生长的骨髓干细胞,其中60Co照射处理的培养瓶结合采用全骨髓贴壁法分离培养简单易行,骨髓干细胞增殖快,活性好,传代力持久.可以收获大量、高纯度的MSCs;本实验为MSCs进一步的研究与临床应用提供了实验方法及依据.刘贤华,仝青英,白晓东 - 武警医学文章来源: 万方数据 -
原发性肝细胞癌中干细胞标志物的表达与上皮细胞-间质转化的关系
目的 探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中肝干细胞标志物的表达及其与上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系.方法 采用免疫组化法检测72例HCC中肝干细胞标志物CK19、EpCAM、CD133、CD90的表达及其与EMT相关蛋白E-cadherin、vimentin和Snail的关系.结果 HCC组织中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率分别为31.9%(23/72)、40.3% (29/72)、51.4% (37/72)、41.7%(30/72),有镜下癌栓和门静脉癌栓组中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率均高于无镜下癌栓和无门静脉癌栓组,Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤数目多发的HCC中EpCAM、CD133、CD90阳性率高于Ⅰ+Ⅱ期和单发的HCC;<46岁、组织学Ⅲ+Ⅳ级、血清AFP≥350 ng/ml的HCC中CK19阳性率高于其相应对照组.E-cadherin与其余两种EMT标志物均呈负相关(vimentin:r=-0.572,P=0.004;Snail:r=-0.597,P=0.003),CK19、Ep-CAM、CD90阳性HCC组中vimentin阳性强度均高于阴性组,CD133阳性HCC组中E-cadherin阳性强度低于CD133阴性组,vimentin、Snail阳性强度均高于CD133阴性组.结论 与CK19、EpCAM、CD90相比,CD133阳性的肝癌干细胞与EMT的关系更加密切,CD133可作为同时针对HCC肝干细胞和EMT的治疗靶点.徐军,胡勇,王健,王星星,程兰兰,余宏宇 - 临床与实验病理学杂志文章来源: 万方数据 -
骨组织工程种子细胞研究进展
近年来,随着创伤领域各种新的治疗方法的涌现和各种先进理念的不断完善,使创伤导致的骨折得到了更合理地治疗,也使骨缺损的发病率明显下降,但是骨缺损的治疗仍是国际骨科学领域的一个难题.随着骨组织工程的迅速发展,杨杜明,李福兵,唐辉,闻一新,刘华,徐永清 - 西南国防医药文章来源: 万方数据

