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一种预染色凝胶电泳法的研究
凝胶电泳是常用的生化分离鉴定技术.生物分子大多在可见光区完全透明,因此在凝胶电泳之后,需要对凝胶进行染色处理才能观察到结果,而且常规的染色方法一般步骤比较繁琐耗时.本文开发了一种新型的预染色凝胶电泳方法(Pre-Staining Gel Electrophoresis,PSGE),可以直观地显示电泳结果,并简化凝胶电泳操作.利用PSGE成功分析了蛋白质与两性高分子聚合物的共价偶联和物理吸附的效率,展示了PSGE的巨大应用开发潜力.钟睿博,刘雨双,张萍,刘竟然,赵国芬,张峰 - 核技术文章来源： 万方数据 -
蛋白偶联受体56基因敲除抑制少突胶质前体细胞成熟
目的:探讨G蛋白偶联受体56(GPR56)基因敲除对小鼠脑胼胝体内轴突髓鞘化和少突胶质前体细胞(OPCs)成熟的影响.方法:筛选出GPR56基因杂合型(GPR56^+/-)和敲除型(GPR56^+/-)小鼠36只,分为GPR56^+/-和GPR56I^+/-组,每组18只.每组根据小鼠出生后时间分为出生后7d(F7)、14d(P14)、21d(P21)和28d(P28)4个亚组.应用FluoroMyelin染色观察P14、P21和P28GPR56^+/-和GPR56^+/-小鼠脑胼胝体内髓鞘形成.用电镜观察P28GPR56^+/-和GPR56^+/-小鼠胼胝体内轴突髓鞘化,比较髓鞘的厚度.用荧光免疫组化染色观察P7GPR56^+/-和GPR56I/-小鼠胼胝体内血小板源性生长因子α受体阳性(PDGF-αR+)细胞(即OPCs)的数量.用原位杂交监测P28GPR56+ -和GPR56I/-小鼠胼胝体内髓鞘蛋白脂质蛋白阳性(PLP+)细胞数.用出生后1d的GPR56^+/-和GPR56^+/-小鼠脑皮质做体外OPCs培养并诱导其分化成熟,观察pro-oligodendroblast、immatureoligo-dendrocyte和matureoligodendrocyte阶段04+细胞百分比.结果:与GPR56^+/-小鼠比较,在P14、P21和P28GPR56I^+/-小鼠脑胼胝体中髓鞘的形成明显减少.电镜见P28GPR56^+/-小鼠脑胼胝体内髓鞘化轴突的数量明显减少,髓鞘g-ratio值变大,髓鞘厚度变薄.荧光免疫组化和原位杂交结果显示P7GPR56^+/-和GPR56^+/-小鼠胼胝体内PDGF-aR+细胞数量无差异,但P28GPR56+/-小鼠胼胝体内PLP+细胞数明显多于P28GPR56^+/-小鼠.体外细胞培养结果显示在pro.oligodendroblast阶段GPR56^+/-04+细胞百分比明显多于GPR56^+/-04+细胞,在immatureoligodendroeyte和matureoligodendrocyte阶段GPR56^+/-04+细胞百分比明显少于GPR56^+/-04+细胞.结论:GPR56蛋白可能参与了脑白质轴突髓鞘化和OPCs的成熟.邓医宇,朱高峰,方明,曾文新,蒋文新,曾红科 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
晚期糖基化终产物改变心肌细胞自发钙火花形态学
目的:本研究旨在探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对心肌细胞雷诺丁受体(RyR)活性的影响及钙调控作用,从而阐明糖尿病心肌病心脏功能障碍的潜在机制.方法:通过激光共聚焦显微成像技术在培养的乳鼠心肌细胞观察自发钙火花发放频率以及钙火花的形态.结果:与对照组相比,AGEs大幅度增加钙火花的发放频率,其中10 mg/L AGEs组增加48%(P<0.01),50 mg/L组AGEs增加200%(P<0.01);而150 mg/L组AGEs组增加110%(P<0.01).AGEs改变自发钙火花的形态、降低钙火花的幅度、宽度和钙火花持续时间并增加心肌细胞静息期钙离子水平.结论:AGEs引起自发钙火花的发放频率,从而增强钙火花介导的肌浆网Ca2+漏流,增加心肌细胞静息期钙离子水平,这可能是引起糖尿病性心肌病收缩功能障碍的重要原因.邓建新,刘文娟,林泽勋,王永辉,阎德文 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
肾素释放机制及肾素抑制剂的研究进展
肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)已被发现多年,对其功能的传统认识是维持血压、保持体液特别是钠盐平衡,其对肾脏系统起重要作用[1].近年研究证实还有许多血流动力学以外的作用.肾素的产生部位相对局限,主要由肾小球球旁器(juxtaglomerular apparatus,JGA)中的颗粒细胞所合成[1].刺激肾素分泌的关键有4个方面:高燕红,蔡珂丹,罗群 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
GRK5对大鼠星形胶质细胞活化的作用及其机制研究
目的:探讨培养新生大鼠皮层星形胶质细胞G蛋白偶联受体激酶5( GRK5)基因沉默后核因子κB ( NF-κB)表达的变化及其与胶质细胞活化、炎症反应和氧化应激的关系。方法:采用分别或联合RNA干扰沉默GRK5基因表达与NF-κB抑制剂N-乙酰半胱氨酸干预进行实验分组。利用免疫荧光、实时定量PCR和Western blotting观察GFAP与活性caspase-3表达,细胞分泌TNF-α与NO的浓度, p65、TNF-α、IL-1β和iNOS的表达情况等。结果:GRK5 siRNA刺激星形胶质细胞活化,并检测到NF-κB表达增多(P<0.01),TNF-α、IL-1β和iNOS mR-NA表达水平增高(P<0.01),细胞分泌TNF-α和NO增多(P<0.01),活性caspase-3表达增多(P<0.01)。采用GRK5 siRNA+NF-κB抑制剂联合干预可部分逆转GRK5 siRNA引起的上述变化( P<0.05)。结论:GRK5基因沉默可能通过刺激NF-κB表达增多引起星形胶质细胞活化。GRK5的正常表达可能具有抑制星形胶质细胞活化相关炎症反应及氧化应激的作用。张运,王莉莉,赵茜,马士程,贺茂林 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
视紫红质类及卷曲蛋白受体在糖尿病视网膜病变发生发展中的作用
鸟苷酸结合蛋白偶联受体(GPCRs)是一类膜受体超家族,被视为最好的药物靶点.在糖尿病视网膜病变(DR)进程中有大量不同亚型GPCRs参与.其中,视紫红质类和卷曲蛋白(Frizzled)受体广受关注,研究方向主要为视网膜炎症反应、新生血管生成、神经元和神经胶质细胞损伤等.血管紧张素Ⅱ受体是最为熟知的视紫红质类受体亚家族.应用血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂可显著降低1型糖尿病患者发生DR的可能性,但无法减缓已并发DR患者的病变进展;可减缓并发轻中度DR的2型糖尿病患者的病变进展.其他的视紫红质类受体还有趋化因子受体、大麻素相关受体、GPR91、GPR109A、APJ受体等.Frizzled受体是Wnt信号通路重要的膜受体等.在DR动物模型中,使用Wnt通路阻断剂Dickkopfhomolog 1能改善视网膜炎症、血管渗出、新生血管生成等.但Wnt通路参与DR进展的具体机制有待研究.随着对GPCRs与DR关系了解的加深,未来将有更多以GPCRs为治疗靶点的药物应用于临床,为DR患者带来福音.傅平平,吴强 - 中华眼底病杂志文章来源： 万方数据 -
废旧聚乙烯/硫酸钙晶须复合材料
采用废旧聚乙烯(PE)与硫酸钙晶须为原料,通过熔融挤出共混制得废旧PE/硫酸钙晶须复合材料,比较了经硅烷偶联剂KH-590改性与未改性的硫酸钙晶须用量对废旧PE/硫酸钙晶须复合材料力学性能的影响,分析硫酸钙晶须增强度旧PE的机理和废旧PE/硫酸钙晶须复合材料的微观结构.结果表明:当硫酸钙晶须用量为15%时,未改性硫酸钙晶须使复合材料的拉伸强度、冲击强度提高了23.1%、9.1%;改性硫酸钙晶须使复合材料的拉伸强度、冲击强度、弯曲强度提高了26.7%、15.6%和5 3%,其在废旧PE中分布均匀,能起到明显的增强作用.刘彤 - 塑料文章来源： 万方数据 -
硅烷偶联剂及其水解物对环氧树脂拉伸剪切强度的影响
以双酚A和环氧氯丙烷为原料,通过缩聚反应制得环氧树脂;将硅烷偶联剂γ-甲基丙烯酰氧基丙基三甲氧基硅烷(KH- 570)在酸催化下水解,得到水解物.探讨了KH -570及其水解物用量对环氧树脂胶黏剂拉伸剪切强度的影响.结果表明,不加KH - 570及其水解物时,环氧树脂胶黏剂的拉伸剪切强度最大为2.47 MPa;只加KH - 570水解物时,环氧树脂胶黏剂的拉伸剪切强度最大为3.28 MPa;只加入KH - 570时,环氧树脂胶黏剂的拉伸剪切强度最大为5.23 MPa.在KH - 570水解物与环氧树脂的质量比相同条件下,随着KH - 570用量的增大,环氧树脂胶黏剂的剪切强度先增后减,在KH - 570的用量为环氧树脂质量的15%时达到最大;相同KH - 570用量下,随着KH - 570水解物用量的增大,环氧树脂胶黏剂的剪切强度先增后减,在KH - 570水解物和环氧树脂的质量比为5∶5时达到最大.当KH - 570的用量为环氧树脂质量的15%、KH - 570水解物与环氧树脂的质量比为5∶5时,环氧树脂胶黏剂的拉伸剪切强度达到9.36 MPa.吕澍,宋建华 - 有机硅材料文章来源： 万方数据 -
纳米碳化硅改性聚四氟乙烯复合材料的摩擦磨损性能
采用不同偶联剂对纳米碳化硅进行表面处理后,制备了聚四氟乙烯/纳米碳化硅复合材料,考察了偶联剂种类和含量随载荷变化对复合材料摩擦磨损性能的影响,并利用扫描电子显微镜观察和分析了复合材料磨损表面形貌及其磨损机理.结果表明,经表面处理的纳米碳化硅填充后的复合材料硬度和摩擦磨损性能均有提高,以钛酸酯偶联剂(NDZ101)处理效果最好;随着偶联剂含量的增大,钛酸酯偶联剂(NDZ101)处理的复合材料的磨损量和摩擦因数均增大,偶联剂最佳含量为填料质量的1%;偶联剂处理后的纳米碳化硅与基体之间形成了良好的界面,复合材料的磨损以黏着磨损和磨粒磨损为主.路琴,吕少卉,何春霞 - 中国塑料文章来源： 万方数据
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