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FISH技术在93例自然流产绒毛及胎儿组织中的应用
染色体异常包括胚胎染色异常和夫妇染色体异常,是自然流产最常见的原因,其中胚胎染色异常是导致自然流产发生的主要原因[1].采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对自然流产的绒毛及胎儿组织中的13、16、18、21、22、XY染色体数目异常进行检测,FISH具有成功率高、准确、省时,对检测标本限制低等优点[2].而如何确保FISH的制片质量尤为重要,本文着重介绍FISH技术操作在3种类型流产组织中的应用体会.1材料与方法1.1标本来源收集广州医科大学附属第三医院病理科诊刘少颜,杨嶽鑫,谭学贤,罗秋萍 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
原位杂交检测HPV与EBER中常见问题与对策
原位杂交检测与免疫组化相比,有自己独特的优势,其可提供分子水平的诊断结果,具有高度的特异性,成为病理辅助诊断的重要依据之一.在病毒感染、肿瘤异常基因等鉴别,特别在诊断某些人类疾病,无法得到可靠抗体时,不失为一种较好的检测方法,现已被有效地应用到现代病理学研究及诊断中.原位杂交操作步骤多,存在不稳定因素和人为差异,可出现不同类型的假阳性与假阴性.如何提高制片质量,正确发挥原位杂交优势,笔者现将目前病理科常用的石蜡原位杂交(HPV、EBER试剂盒购自福建泰普生物公司)检林蓁 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
广西口腔颌面颈部原发性淋巴瘤 EBV感染及其临床病理特征分析
目的:探讨广西地区EBV感染与恶性淋巴瘤病理类型及发病的相关性。方法采用原位杂交技术检测81例口腔颌面颈部淋巴瘤的肿瘤组织中EBV编码的RNA(EBER),并分析其临床病理特征。结果(1)EBER总阳性率为44.4%,霍奇金淋巴瘤占检出率的40%,非霍奇金淋巴瘤占检出率的45.1%,不同细胞来源的非霍奇金淋巴瘤依次占检出率的75%( T细胞淋巴瘤)、87.5%( NK/T细胞淋巴瘤)、2.9%( B细胞淋巴瘤),T细胞、NK/T细胞非霍奇金淋巴瘤EBER阳性率比B细胞非霍奇金淋巴瘤高,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)淋巴结内、外淋巴瘤EBER阳性率分别为17.9%、58.5%,二者比较差异有显著性(P<0.05)。(3)50岁以上淋巴瘤患者EBER检出率(36.2%)低于50岁以下患者检出率(55.9%),差异无显著性(P>0.05)。结论广西地区口腔颌面颈部淋巴瘤与EBV感染相关,其中以发生在淋巴结外弥散淋巴组织的NK/T细胞淋巴瘤最为显著。罗春英,卢运龙,凌惠媛,黄炳臣,黄琴,韦花媚,陆海善,韦仕喜 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
荧光原位杂交诊断胸水直接涂片EML4/ALK融合基因1例
患者女性,76岁,左侧肺癌病灶靶向放疗后,出现大量胸水.将送检胸水用一次性病变细胞采集器(B型)(北京金木信诚公司)富集细胞后,将膜片细胞富集面置于防脱载玻片上,来回拖动几次,使膜上细胞转移至载玻片上(图1、2),固定,HE染色,镜下观察.一次性病变细胞采集器(B型)采用医用高分子材料PET滤膜,孔径8~12μm,可有效滤过淋巴细胞,大量采集体液中的肿瘤细胞或预检细胞,可避免淋巴细胞的干扰,降低漏诊率,提高诊断阳性率.病理检查镜检:癌细胞呈腺样、栅栏状排列.癌细胞纪晓坤,王珩,张艳,赵银环,吴家宁,王蕊,吴娟,杜芸 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
实时控制FISH预处理中酶消化的操作
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是通过荧光素标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交,在荧光显微镜下观察探针的杂交信号.在产前诊断、肿瘤遗传学等领域研究得到广泛应用.然而在FISH检测过程中,有多种因素(如组织标本的固定、切片厚度、酶的消化、杂交后洗涤)影响检测结果.其中影响最多的是蛋白酶的预处理,即蛋白酶的种类及消化时间[1-8].作者在实验中发现,控制消化时间固然重要,但掌握组织或细胞消化的程度徐明堂,赵焕芬,何春年,康林,张秀智,陈琛 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
神经母细胞瘤中间变性淋巴瘤激酶基因改变
目的:观察国内儿童散发性神经母细胞瘤( neuroblastoma, NB)中间变性淋巴瘤激酶( anaplastic lymphoma kinase, ALK)的表达,探讨其在NB发生、发展中的作用。方法应用荧光原位杂交法( fluorescence in situ hybridization, FISH)检测56例ALK蛋白异常表达的NB中ALK基因的表达。结果 FISH检测显示56例NB中ALK基因46例为正常,10例为异常,其中9例为ALK增多(16%),1例为扩增(1.8%)。结论 ALK基因是NB一个主要的易感基因,国内儿童ALK基因异常的发生率与国外文献报道相近,其有可能成为治疗NB的主要靶点之一。殷敏智,陈洁枫,沈萍,马靖,张忠德 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
结直肠腺癌、腺瘤、正常黏膜中RUNX3的表达及意义
目的 观察RUNX3在结直肠正常组织、结直肠腺瘤及结直肠腺癌组织中的表达,探讨RUNX3在结直肠正常黏膜→腺瘤→腺癌过程中的表达变化及临床意义.方法 采用免疫组化法、荧光原位杂交技术检测RUNX3在30例癌旁正常组织、60例结直肠腺瘤(37例伴中低度异型增生,23例伴重度异型增生)及60例结直肠癌组织中的表达,结合临床资料分析其表达与临床病理参数的关系.结果 RUNX3在结直肠正常组织、腺瘤伴中低度异型增生、腺瘤伴重度异型增生及结直肠癌组织中的阳性率分别为86.67%、72.97%、43.48%、38.33%,差异具有统计学意义(P〈0.008 3).RUNX3 mRNA在结直肠正常组织、腺瘤伴中低度异型增生、腺瘤伴重度异型增生及结直肠癌组织中的阳性率分别为90.00%、78.38%、43.48%和40.00%,差异具有统计学意义(P〈0.008 3).RUNX3表达与结直肠癌TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、肝转移、腹腔微转移具有相关性(P〈0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤大小、部位、分化程度和组织学类型无关(P〉0.05)).结论 RUNX3表达与结直肠黏膜癌变的发生、发展密切相关,有望成为结直肠癌诊断及监测的特异性生物学指标,并为结直肠癌的治疗起指导作用.薛军,武雪亮,王立坤,屈明,贾光辉,赵秀芳 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
FISH技术检测TERC基因在子宫颈上皮内瘤变1级与2级鉴别诊断中的实用价值
目的:采用FISH技术检测TERC基因在子宫颈上皮内瘤变( cervical intraepithelial neoplasia, CIN)不能明确1级或2级(CIN1/2)病变组织中的扩增,探讨其在CIN分级中的临床病理实用意义。方法选取子宫颈组织标本42例,其中正常子宫颈鳞状上皮20例,CIN1/2级22例(其中初步诊断1级8例,2级14例)。采用FISH技术检测石蜡包埋组织中TERC基因的扩增情况。结果正常子宫颈鳞状上皮中TERC基因无扩增,CIN1/2级组织中TERC基因的扩增率为22.7%(5/22),77.3%(17/22)的TERC基因无扩增;其中初步诊断1级8例,1例TERC基因扩增;初步诊断2级14例,4例TERC基因扩增,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在石蜡包埋组织切片难以确定CIN1/2级时,应用FISH技术进行TERC基因检测,TERC基因扩增者可考虑为CIN2级,建议临床积极处理;无扩增者,考虑为CIN1级,可保守处理;FISH技术具有临床病理实用价值。何春年,荀文娟,徐名堂,徐翠清,赵焕芬,张秀智,陈琛 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
EB病毒与乳腺癌的相关性
目的探讨EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)与乳腺癌发生、发展的相关性.方法随机选取不同发展阶段的乳腺病变组织246例,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)、原位杂交(in situ hybridization,ISH)、激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)、免疫组化染色En Vision法检测EBV DNA、RNA、蛋白质水平,分析EBV与乳腺癌发生、发展的关系.结果免疫组化标记246例乳腺病变均未检测到EBV潜伏膜蛋白LMP1的表达.PCR法在乳腺癌(12/23)、原位癌(0/10)以及乳腺良性病变(0/15)中检测到EBV DNA,但用地高辛标记的EBV DNA探针对48例乳腺良、恶性病变组织(包括PCR扩增阳性的12例乳腺癌标本)进行ISH检测,在癌细胞、乳腺上皮细胞和间质淋巴细胞内均未检测到阳性杂交信号.采用LCM PCR检测12例PCR扩增阳性和12例阴性乳腺标本的乳腺上皮细胞和间质淋巴细胞,在12例PCR阳性标本的间质细胞中扩增出EBV DNA,癌组织中未检出EBV DNA.用EBV RNA探针和ISH方法在75例乳腺良恶性病变组织中均未检测到EBER表达.结论在该文选择的标本中,乳腺癌发生、发展与EBV感染无关.潘鑫艳,王靖彦,黎贵芸,徐文漭,王丽,宋蜀伶,杨举伦 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
进展期乳腺癌原发灶与转移灶中HER-2/neu基因状态稳定性的对比分析
目的 探讨进展期乳腺癌原发灶与转移灶中HER-2/neu基因状态的稳定性,指导临床检测标本的选择.方法 筛选52例同期腋窝淋巴结转移数≥5个的女性浸润性乳腺癌病例,取存档蜡块原发灶5个位点及全部淋巴结转移位点制备组织芯片.采用双探针荧光原位杂交技术检测HER-2/neu基因状态,分析各位点间HER-2/neu基因状态的异同.结果 HER-2/neu基因扩增病例占所检病例的44.2%.HER-2/neu基因状态在原发灶与转移灶间高度一致(κ=0.840,P<0.001).92.3%(48/52)病例的乳腺癌位点HER-2/neu基因状态均一致,呈高度均质稳定状态.7.7%(4/52)病例存在位点间HER-2/neu基因状态不同,显示异质性.结论 大部分进展期乳腺癌原发灶或同期淋巴结转移灶均可作为HER-2/neu基因检测材料,部分乳腺癌需在原发灶和转移灶多点取样才能全面反映HER-2/neu基因状态.沈增丽,侯传玲,蒋雄玲,孙丽萍,张振华,孙爱静 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据
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