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常压低氧耐力训练对肥胖大鼠Visfatin水平的影响

目的:通过建立肥胖大鼠低氧训练模型,观察血清Visfatin含量和脂肪组织Visfatin基因表达水平,探讨低氧训练对肥胖大鼠Visfatin的影响.方法:单纯性肥胖大鼠建模成功后,筛选130只随机分为13组:对照0周组,低氧安静1、2、3、4周组,常氧训练1、2、3、4周组,低氧训练1、2、3、4周组.低氧环境模拟海拔3 500 m(氧浓度13.6%);常氧和低氧训练组分别以25 m/min、20 m/min进行跑台训练,各训练组持续运动1 h/d、6 d/w、1~4周.采用ELISA法测试血清Visfatin含量,荧光定量PCR法测试附睾脂肪Visfain mRNA相对表达量.结果:1)肥胖大鼠0周时血清Visfatin含量(50.095±9.092 μg/L)显著高于其他各周(P<0.01),常氧训练第1、2、3、4周时分别为17.856±3.596 μg/L、27.002±10.475 μg/L、26.866±7.107μg/L、36.385±5.455 μg/L,低氧安静组第1、2、3、4周时分别为22.382±6.356μg/L、24.662±6.654μg/L、25.764士9.382 μg/L、34.504±6.946 μg/L,低氧训练组第1、2、3、4周时分别为17.227士5.106 μg/L、18.360士5.181 μg/L、15.065±4.466μg/L、16.689±7.728μg/L;常氧训练和低氧安静组,其变化趋势一致,第1周显著性下降(P<0.01),随后回升;而低氧训练组一直保持在低水平,后3周均显著低于其他两组(P<0.01).2)肥胖大鼠0周时脂肪组织Visfatin mRNA相对表达量为0.0658±0.0263,常氧训练组第1、2、3、4周时分别为0.0569±0.0237、0.0499±0.0130、0.0653±0.0288、0.1071±0.0437,第4周时显著高于第1、2、3周时水平(P<0.01);低氧安静组第1、2、3、4周时分别为0.0883±0.0442、0.0990±0.0570、0.0507±0.0178、0.0883±0.0312;低氧训练组第1、2、3、4周时则表现出下降的趋势,分别为0.1102±0.0368、0.0845±0.0238、0.0679±0.0245、0.0668±0.0298,低氧训练第4周时其相对表达量低于常氧训练和低氧安静组,与常氧训练组比较差异显著(P<0.05).结论:1)低氧训练控制肥胖大鼠血清Visfatin水平较常氧训练和低氧安静曼为有效;2)与常氧训练和低氧安静比较,低氧训练下调脂肪组织Visfatin基因表达作用更明显.

徐建方,冯连世,张漓,路瑛丽,王雪冰 - 体育科学

文章来源：万方数据

运动心脏重塑过程中miRNA-350/JNK信号通路的动态变化

目的:通过递增负荷跑台运动建立运动性心肌肥大模型,观察miRNA-350及其靶基因在8周递增负荷运动诱导的心脏重塑中的动态变化,以探讨运动心脏重塑的可能机制.方法:96只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(C组)和递增负荷运动组(ILT组).正式训练的第7周末,用超声心动图检测各组小鼠心脏结构和功能参数;用qRT-PCR检测运动心脏重塑过程中不同时相(0d、3d、7d、15 d、29 d和57 d)miRNA-350的动态变化;分别用qRT-PCR和Western Blotting技术检测JNK mRNA和JNK蛋白的动态变化.结果:ILT组小鼠PWTS、PWTD、LVEDD、IVSTD和IVSTS等指标显著高于C组,EF无显著性差异;在运动心脏重塑过程中,ILT组小鼠心脏中miRNA-350的表达水平先快速增高再急剧下降,然后缓慢下降到与C组相当的水平;在递增负荷运动的0d、3d和7d,miRNA-350的靶基因JNK mRNA的表达水平没有显著变化,此后,JNK mRNA的表达水平呈上升趋势;在运动心脏重塑的初期,JNK蛋白的表达水平先显著下降再缓慢上升.结论:持续8周递增负荷跑台运动成功的诱导了小鼠心肌肥大;运动心脏重塑过程中miRNA-350、JNK mRNA和JNK蛋白呈动态变化,提示miRNA-350/JNK信号通路可能参与运动心脏重塑的调节.

翟帅,陈佩林 - 体育科学

文章来源：万方数据

不同训练方案对大鼠股直肌线粒体呼吸链复合体酶活性的影响

目的:研究不同训练方案运动后大鼠静息状态线粒体的呼吸链复合酶活性的特异性、适应性变化,对不同训练方案的训练效果及其机理进行探索;为尝试寻找更有效的专项训练方法提供一些科学依据和参考.方法:将86只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组(S)、耐力组(E)、间歇组(Ⅰ)、耐力十间歇组(EI)及间歇十耐力组(IE),于4周、6周、8周运动结束48 h后取样,提取左侧股直肌线粒体,测定线粒体呼吸链复合体酶Ⅰ、Ⅳ活性.结果:4周和6周运动后,唯有E6组大鼠线粒体呼吸链复合体酶Ⅳ活性显著高于S6组;8周运动后,复合体酶Ⅰ活性I8组和IE8组显著高于S8组;复合体酶Ⅳ活性EI8组和I8组均显著高于S8组,IE8组极显著高于S8组.结论:4种训练方案均能使大鼠两种线粒体呼吸链复合酶活性提高,其中,耐力训练能最快使线粒体呼吸链产生适应性变化;间歇训练显著提高无氧代谢水平,但线粒体呼吸链的适应较慢;间歇十耐力训练可能最有利于快速提高机体有氧代谢水平.

张前锋,徐晓阳,李捷,方方,马涛 - 体育科学

文章来源：万方数据

白细胞介素-17、白细胞介素-4及γ干扰素在实验性自身免疫性葡萄膜炎中的表达

目的观察白细胞介素(IL)-17、白细胞介素(IL)-4及γ干扰素(IFN-γ)在实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)中的表达.方法采用健康雌性C57BL/6小鼠建立EAU模型.建模前及建模后7、14、21、28 d,取小鼠眼球作石蜡病理切片,光学显微镜观察小鼠视网膜结构变化;采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中IL-17、IL-4、IFN-γ含量;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测小鼠视网膜组织中IL-17、IL-4、IFN-γ的mRNA表达;采用蛋白质免疫印迹法检测小鼠视网膜组织中IL-17、IL-4、IFN-γ的蛋白表达.结果建模后14d,光学显微镜观察发现,葡萄膜组织结构破坏,大量炎症细胞浸润.小鼠血清中IFN-γ含量,脾及视网膜组织中IFN-γ mRNA和蛋白表达均于建模后7d达到高峰;小鼠血清中IL-4、IL-17含量,脾及视网膜组织中IL-4、IL-17 mRNA和蛋白表达均于建模后14 d达到高峰.小鼠血清中IL-17含量,脾及视网膜组织中IL-17 mRNA和蛋白表达升高程度均较IFN-γ、IL-4更为显著.建模前与建模后7、14、21 d小鼠血清中IL-17、IL-4、IFN-γ含量比较,差异均有统计学意义(F=1 817.346、268.600、164.621,P<0.05);建模前与建模后28d小鼠血清中IL-17、IL-4、IFN-γ含量比较,差异无统计学意义(P>0.05).建模前与建模后7、14、21d小鼠脾(F=312.67、114.250、216.220)及视网膜(F=271.504、85.370、80.722)组织中IL-17、IL-4、IFN-γ蛋白表达比较,差异有统计学意义(P<0.05);建模前与建模后28 d小鼠脾及视网膜组织中IL-17、IL-4、IFN-γ蛋白表达比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 IL-17、IL-4、IFN-γ在EAU中均明显表达,共同参与了EAU疾病的过程.

侯彬,沈琳,王红,陈海婷,赵萌 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

上海学会实验动物兽医护理、伦理福利两个专业委员会成立

2012年7月23日下午,上海市实验动物学会实验动物兽医护理专业委员会、实验动物伦理福利专业委员会假座中科院上海药物研究所承嘏厅联合召开了本届专业委员会的成立会,来自本市实验动物生产、使用单位的专业委员会的委员及学会主要领导共40余人参加了成立会.

- 实验动物与比较医学

文章来源：万方数据

运动训练抑制了TGFβ通路并缓解了D-半乳糖诱导衰老大鼠的肌肉流失

目的:研究TGFβ(经典和非经典)通路在运动缓解衰老性肌肉流失(少肌症)中的作用.方法:24只雄性Wistar大鼠分为3组,C组(青年安静组)、S组(40dD-半乳糖注射致衰老组)、E组(40d D-半乳糖注射+6 wk跑台运动的衰老运动组).检测各组大鼠体重、腓肠肌重量、TGFβ(经典与非经典)通路因子——TGFβ1、MSTN、Phospho-smad2/3、Phospho-MAPKs(p38、JNK1/2、ERK1/2)及通路效应因子——p21、Pax7(WB法)、MyoDmRNA、MyoG mRNA(RT-PCR法).结果:与C组相比,S组腓肠肌比重(腓肠肌重量/体重)降低,[TGFβ1、MSTN、Phospho-smad2/3、Phospho-MAPKs(Phospho-p38、Phospho-JNK1/2、Phospho-ERK1/2)、p21、MyoD mRNA、MyoGmRNA升高,Pax7降低;与S组相比,E组腓肠肌比重升高,TGFβ1、MSTN、Phospho-smad2/3、Phospho-MAPKs(Phospho-JNK1/2、Phospho-ERK1/2)降低,p21、Pax7、MyoD mRNA、MyoG mRNA升高.结论:运动训练抑制了TGFβ经典及非经典通路并缓解了衰老肌肉的流失,Pax7、p21、MyoD、MyoG可能作为TGFβ通路的效应器介导了该过程.

王今越,王小虹,冯维斗 - 体育科学

文章来源：万方数据

高糖诱导的牛视网膜血管内皮细胞中共济失调毛细血管扩张突变基因激酶活性变化及其对细胞氧化应激状态的影响

目的观察高糖诱导的牛视网膜血管内皮细胞(BRECs)中共济失调毛细血管扩张突变基因(ATM)激酶的活性变化及其对细胞氧化应激状态的影响.方法体外培养BRECs,取4~8代细胞用于实验.采用含5 mmol/L葡萄糖(正常糖组)、30 mmol/L葡萄糖(高糖组)、30 mmol/L葡萄糖和10 μmol/LATM激酶特异性抑制剂KU55933(干预组)的细胞培养液培养BRECs.细胞培养48 h后,采用蛋白免疫印迹法检测细胞中磷酸化ATM(P-ATM)、磷酸化细胞分裂素活化蛋白激酶(P-P38)及磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK) 1/2的蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的含量;细胞内活性氧(ROS)水平检测试剂盒检测细胞内ROS水平;碘化丙啶和赫斯特染料双染色法检测细胞凋亡情况;异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖检测内皮细胞屏障的通透性.结果与正常糖组比较,高糖组P-ATM、P-P38、P-ERK1/2蛋白表达均增高;与高糖组比较,干预组P-ATM蛋白表达降低,p-p38、p-ERK1/2蛋白表达明显增加.3组间P-ATM、P-P38、P-ERK1/2蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=436.00、14 010.00、985.10,P<0.05).与正常糖组比较,高糖组、干预组细胞上清液中VEGF含量均升高,干预组升高幅度更明显;3组间细胞上清液中VEGF含量比较,差异有统计学意义(F=278.00,P<0.05).高糖组ROS含量(t=2.98、10.91)、BRECs细胞凋亡率(t=4.31、11.14)均较正常糖组升高,而又明显低于干预组,差异均有统计学意义(P<0.05).与正常糖组比较,高糖组、干预组细胞旁通透率均升高,干预组升高更明显;3组间细胞旁通透率比较,差异有统计学意义(F=2 223.00,P<0.05).结论高糖诱导的BRECs中P-ATM表达、ROS水平、细胞凋亡率及细胞旁通透率均增高,其机制可能与P38、ERK、VEGF有关.

鲁理,郑志,李静文,肖文玮,李春霞 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

衰老过程中的运动干预对大鼠学习记忆能力及海马神经粘附分子表达的影响

目的:探讨大鼠衰老过程中进行有氧运动干预对其空间学习记忆能力和海马神经黏附分子(NCAM)基因表达水平的影响.方法:雄性SD大鼠48只,随机分为3组,每组16只:生理盐水对照组(C组)、D-半乳糖衰老模型组(D组)、D-半乳糖致衰老十有氧运动干预组(DS组),进行6周的衰老造模,之后每组随机分为2个小组:一组自然喂养7天(N),另一组进行7天的Morris水迷宫实验(M),分别记录为CN、DN、DSN、CM、DM和DSM,每组8只.取材之后,测定各组大鼠大脑皮质SOD、GSH-PX活性及MDA含量;分别应用Real-timePCR、Western blotting检测各组大鼠海马NCAM基因的表达情况.结果:1)D组大鼠与C组大鼠相比,出现了嗜睡、毛发严重脱落等明显的衰老症状,大鼠脑SOD、GSH-PX酶活性显著性下降(P<0.01),MDA含量显著性升高(P<0.01),且DN组SOD、GSH-PX酶活性显著性低于DSN组(P<0.01),MDA含量高于DSN组(P<0.05).2)Morris水迷宫训练期间各组大鼠第1~6天的潜伏期均呈现下降趋势,空间探索实验中DSM组大鼠穿越平台次数显著性多于DM组(P<0.05).3)与C组相比,D组大鼠海马NCAM基因表达水平显著性下调(P<0.05),而DS组大鼠NCAM表达水平较D组显著性上调(P<0.01).结论:1)衰老过程中的有氧运动干预可以提高大鼠脑SOD、GSH-PX的活性,抑制MDA的生成,并且改善大鼠的空间学习记忆能力;2)运动可能是通过上调NCAM基因的表达影响衰老大鼠的学习记忆能力.

袁琼嘉,张金梅,邓文骞,王富鸿,李雪,王璐 - 体育科学

文章来源：万方数据

色素上皮衍生因子对氧诱导视网膜新生血管的抑制作用

目的观察色素上皮衍生因子(PEDF)对氧诱导视网膜新生血管(OIR)的抑制作用,初步探讨PEDF抑制新生血管形成的可能机制.方法 7日龄C57BL/6J新生小鼠140只,随机数字表法分为正常对照组、OIR模型组、PEDF治疗组、磷酸盐缓冲液(PBS)干预对照组.除正常对照组外,其余各组小鼠与哺乳母鼠共同置于氧浓度为(75±2)%的氧箱内饲养5d后转移至正常环境中饲养5d,建立OIR模型;正常对照组小鼠始终置于正常氧环境饲养;OIR模型组小鼠出氧箱后不作任何处理.12、14日龄时,PEDF治疗组小鼠玻璃体注射分别注射2 μg/A的PEDF 1 μl;PBS干预对照组小鼠玻璃体腔注射等量PBS.视网膜铺片、冰冻切片荧光染色观察视网膜新生血管生长情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)观察小鼠视网膜白细胞介素(IL)-1β蛋白表达量;实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCT)检测小鼠视网膜IL-1β mRNA相对表达量.结果视网膜铺片检查结果显示,OIR模型组视网膜新生血管面积较正常对照组明显增大,差异有统计学意义(t=15.02,P<0.01);PEDF治疗组视网膜新生血管面积较PBS干预对照组明显减小,差异有统计学意义(t=5.96,P<0.01).荧光显微镜观察结果显示,OIR模型组视网膜可见外丛状层(OPL)与神经节细胞层(GCL)之间的新生血管簇较正常对照组明显增多;PEDF治疗组视网膜OPL与GCL之间的新生血管簇较PBS干预对照组明显减少.Western blot检测结果显示,OIR模型组视网膜IL-1β蛋白表达水平较正常对照组显著提高,差异均有统计学意义(t=3.35,P<0.05).PEDF治疗组与PBS干预对照组比较,IL-1β蛋白表达水平下降,差异有统计学意义(P<0.05).正常对照组与PEDF治疗组比较,IL-1β蛋白表达水平无显著差异(F=11.764,P>0.05).实时RT-PCR检测结果显示,OIR模型组视网膜IL-1βmRNA相对表达量较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(t=4.43,P<0.01).PEDF治疗组与PBS干预对照组比较,前者IL-1β mRNA相对表达量显著减少,差异有统计学意义;正常对照组与PEDF治疗组比较,IL-1β mRNA相对表达量无显著差异(F=11.151,P>0.05).结论 PEDF可抑制OIR视网膜新生血管的形成.下调IL-1β在视网膜的表达可能是其机制之一.

王亚娜,高莎,沈玺 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

慢病毒介导环腺苷酸反应成分结合蛋白1特异性小干扰RNA对小鼠视网膜新生血管的抑制作用

目的观察玻璃体腔注射慢病毒介导环腺苷酸反应成分结合蛋白1(CREB1)特异性小干扰RNA(siRNA)对小鼠视网膜新生血管的抑制作用.方法构建针对小鼠靶基因CREB1 siRNA载体,筛选并进行慢病毒包装.将140只C57BL/6J小鼠均分为正常对照组、氧诱导视网膜病变(OIR)模型组、空载体组和CREB1干扰组.正常对照组小鼠在正常空气中饲养.OIR模型组、空载体组和CREB1干扰组小鼠均于出生后7d建立OIR模型.空载体组及CREB1干扰组小鼠于出生后5d分别行玻璃体腔注射慢病毒-绿色荧光蛋白(GFP)空载体和CREB1-RNA干扰慢病毒载体1.0μl.利用突破内界膜的新生血管内皮细胞核数和荧光血管造影视网膜铺片评价视网膜新生血管情况;计算小鼠视网膜新生血管和无灌注区面积;逆转录聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法检测小鼠视网膜CREB1 mRNA和磷酸化CREB1 (P-REB1)蛋白表达,以及血管内皮生长因子(VEGF)-A、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)的mRNA和蛋白表达情况.结果 OIR模型组、空载体组突破内界膜的血管内皮细胞核计数较正常对照组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);CREB1干扰组突破内界膜的血管内皮细胞核计数较OIR模型组、空载体组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).OIR模型组、空载体组小鼠视网膜新生血管面积和无灌注区面积均较正常对照组明显增大,CREB1干扰组小鼠视网膜新生血管面积和无灌注区面积均较OIR模型组和空载体组明显缩小.4组小鼠视网膜新生血管面积和无灌注区面积比较,差异均有统计学意义(F=67.220、110.090,P<0.05).OIR模型组、空载体组小鼠视网膜CREB1 mRNA和P-CREB蛋白表达以及VEGF-A、Akt、PI3K mRNA和蛋白表达均较正常对照组明显增加;CREB1干扰组小鼠视网膜CREB1 mRNA和P-CREB蛋白表达以及VEGF-A、Akt、PI3K mRNA和蛋白表达较OIR模型组、空载体组明显下降.4组小鼠视网膜CREB1、VEGF-A、Akt、PI3K mRNA表达比较,差异均有统计学意义(F-6.087、5.464、6.191、8.627,P<0.05).4组小鼠视网膜P-CREB1、VEGF-A、Akt、PI3K蛋白表达比较,差异也有统计学意义(F=162.944、13.861、19.710、22.827,P<0.05).结论玻璃体腔注射慢病毒介导的CREB1 siRNA转染视网膜可有效抑制氧诱导小鼠视网膜新生血管的形成.

温臣婷,贺涛,邢怡桥,焦康为,蔡维 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据