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恙虫病东方体合肥分离株截短56 kDa蛋白抗原表达及活性分析
本文获得恙虫病东方体合肥分离株截短56 kDa外膜蛋白基因工程纯化抗原,并鉴定其免疫学活性,为进一步研制广谱诊断试剂、疫苗以及分析其在东方体致病的分子机制奠定基础.我们通过DNAStar和Mega等软件对含有440个氨基酸的合肥株56 kDa蛋白序列进行抗原性分析;将合肥株56 kDa截短蛋白基因克隆至原核表达载体pET28a获重组质粒,转入大肠杆菌E.coli BL21感受态中,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳分析检测蛋白表达;采用亲和层析法纯化目的蛋白,Western-blot及ELISA法鉴定其免疫学活性.序列分析发现合肥分离株56 kDa蛋白可分为4个保守区和3个可变区,抗原性分析结果显示,其保守区的亲水性和抗原性均有很高峰值.SDS-PAGE电泳显示约56 kDa的目的重组蛋白表达条带,Western-blot分析显示该重组蛋白可与恙虫病病人血清反应,阴性血清则未出现相应印迹,ELISA分析结果显示该蛋白最低浓度为80 ng/μL时仍可检出阳性血清;5μg/mL蛋白可检测阳性血清滴度高达1∶12 800,证实其具有较强反应原性.本实验获得恙虫病东方体合肥株56 kDa截短外膜蛋白基因工程抗原具有良好的抗原活性,有望进一步应用于恙虫病的诊断、疫苗研制及致病机制分析.耿美玲,郑峰,吕恒,朱进,胡丹,郝丽娜,张凤玉,龚秀芳,李丙军 - 寄生虫与医学昆虫学报文章来源： 万方数据 -
超抗原葡萄球菌肠毒素A拮抗伊马替尼抑制细胞活化作用的研究
目的:探讨葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)对甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate,IM)抑制T淋巴细胞活化的影响.方法:2mg/LSEA和50nmol/LIM联合作用于Jurkat细胞24h后,用实时荧光定量PCR技术检测CD3ε和ζ链mRNA表达水平变化;Westernblotting技术检测CD3ε和ζ链蛋白水平变化.结果:单纯IM组CD3e和链mRNA及蛋白表达均表现下调;SEA与IM联合用药组可以逆转IM下调CD3ε和ζ链mRNA及蛋白表达水平作用.SEA拮抗IM抑制作用中,对CD3e链mRNA表达上调的作用明显大于CD3ζ链.结论:SEA能拮抗IM对T细胞CD3ε和ζ链表达的抑制作用.颜宇辉,陈小华,王冠明,林晨,李扬秋 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
不同的抗原修复方法在Ⅳ型胶原免疫组化染色中的应用
Ⅳ型胶原(collagenⅣ)是构成基膜致密层的主要成分,亦属于纤维型胶原.在基膜中呈三维的网状结构,与其他成分如层黏连蛋白、纤维连接蛋白等共同组成细胞外基质.在部分肿瘤中可出现明显的粗纤维反应或肿瘤细胞分泌产生大量的胶原纤维,这些胶原的识别在诊断与鉴别诊断中具有重要意义.在日常的工作中,Ⅳ型胶原免疫组化染色常会出陈余朋,张声,王行富,李国平,王鹏程,王密 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
免疫组化阴性片多次重复免疫组化染色的可行性
免疫组化在病理工作中已被广泛应用,是当前病理工作中不可或缺的重要手段,在疾病诊断、判断预后、指导临床治疗、了解发病机制和检测病原体等方面起重要作用[1].临床病理工作中,时常会碰到微小病变组织或会诊白片数量有限,而已做好的免疫组化不能确诊,又无有效组织或白片继续进一步标记的情况.本文旨在探讨免疫组化阴性片进行不同抗体的再标记的可行性,以期能反复利用有限资源尽可能做更多标记以利于诊断.陈余朋,张声,王鹏程,王允玉,王行富 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
胎膜早破的分子生物学研究进展
胎膜早破是产科一种常见的并发症,对母婴可造成很大伤害.明确病因有助于对胎膜早破的发生机制提供理论依据,对临床早期诊断、正确处理胎膜早破有实际指导意义.从病因出发,适时治疗可大大减少对母婴的危害,降低围生儿的发病率及病死率,有利于产妇的分娩.胎膜早破的病因复杂,至今仍未完全明确.现着重从分子水平对胎膜早破的病因予以综述.万丽娟,吴楠,尚立新 - 医学综述文章来源： 万方数据 -
胎盘组织HMGB1免疫组化染色条件的优化
研究显示,HMGB1作为晚期炎症介质,在感染性早产孕妇的血清、胎盘等中的表达明显升高[1].胎盘组织内细胞丰富,尤其是红细胞、炎细胞等,对HMGB1的免疫组化染色干扰较大.本文旨在从抗原修复、消除非特异性染色方面优化HMGB1的免疫组化染色.1材料与方法1.1材料与试剂选取江苏大学附属医院2012~2013年因慢性绒毛炎早产的胎盘10例;HMGB1(1︰1 000,宜百康公司);柠檬酸缓冲液(p H 6.0)、EDTA缓冲液(p H 9.0)、EnVision显色系统及2.5 L高压锅均购于福州迈新公司.李梅,孙亚军,赵小辉,吴建农 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
CD147对前列腺癌PC-3细胞自噬的影响
目的:研究白细胞分化抗原(CD)147在体外对前列腺癌PC-3细胞的自噬作用。方法:通过氨基酸饥饿法建立自噬模型,免疫印迹技术检测CD147的表达。利用RNA干扰CD147表达的细胞系,免疫印迹技术检测自噬蛋白LC3-I和LC3-II的表达;台盼蓝排斥实验检测细胞的死亡情况。结果:在PC-3细胞自噬模型中,随着饥饿诱导时间延长,CD147表达逐渐升高。用RNA干扰技术降低CD147表达后,与阴性对照组比较,在自噬模型中CD147干扰组自噬相关蛋白LC3-II表达增多;并且细胞死亡数量明显增加,阴性对照组细胞死亡率分别为(19.3±3.1)%和(22.3±3.5)%,而在CD147干涉组细胞死亡率为(38.4±3.1)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在前列腺癌PC-3细胞中CD147抑制饥饿诱导的自噬,减少自噬性细胞死亡的发生。方芳,冯淳,姚杨,马潇潇,王立国 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
鸡感染巨型艾美耳球虫后的体液、粘膜与细胞免疫应答
鸡的7种艾美耳球虫中,巨型艾美耳球虫免疫原性最强。为研究巨型艾美耳球虫激发宿主产生的免疫应答,我们检测了巨型艾美耳球虫3次感染后鸡只的抗体应答及细胞应答特征。 ELISA检测显示,感染鸡只产生了显著高于未感染鸡只的特异性IgY和sIgA (肠道及胆汁)抗体;而酶联免疫斑点法( ELISPOT)检测显示,被感染鸡只脾脏中分泌IFN-γ的球虫特异性淋巴细胞的数量显著高于对照组。粪便中卵囊的检测则显示,第3次感染后的鸡只几乎无卵囊排出,证实巨型艾美耳球虫产生的免疫应答可对同源感染提供完全的免疫保护。任超,赵世云,刘贤勇 - 寄生虫与医学昆虫学报文章来源： 万方数据 -
CD147、基质金属蛋白酶-2和血管内皮生长因子在氧诱导视网膜病变大鼠中的表达
目的 观察CD147、基质金属蛋白酶(MMP)-2和血管内皮生长因子(VEGF)在氧诱导视网膜病变大鼠中的表达.方法 84只新生Wistar大鼠纳入研究.将其随机分为高氧组和对照组.每组42只大鼠.高氧组建立氧诱导视网膜病变模型;对照组不做任何处理.大鼠7、14日龄时,取眼球行视网膜铺片,观察视网膜血管形态.大鼠14日龄时,取眼球行视网膜石蜡切片,计数突破内界膜的内皮细胞核数.大鼠12、14、16日龄时,取眼球行免疫组织化学染色,检测大鼠视网膜组织中CD147、MMP-2和VEGF的表达.采用双因素相关分析法分析CD147表达与MMP-2、VEGF表达的相关性.结果 大鼠7日龄时,对照组大鼠视网膜血管呈放射状分布,血管径较粗;高氧组大鼠视网膜血管收缩,大面积无血管区,仅见少量小面积的血管网.大鼠14日龄时,对照组大鼠视网膜血管发育较好,网格规整;高氧组大鼠视网膜血管增生、纡曲、扩张,并在灌注区与非灌注区交界处形成新生血管丛、渗出、出血.大鼠14日龄时,对照组、高氧组突破内界膜的内皮细胞核数分别为(1.30±1.26)、(19.70±3.56)个;两组比较,差异有统计学意义(t=21.813,P<0.01).免疫组织化学染色结果显示,对照组大鼠视网膜各层可见CD147、MMP-2、VEGF有少量表达;高氧组大鼠视网膜各层可见CD147、MMP-2、VEGF有大量表达.大鼠12、14、16日龄时,两组大鼠视网膜各层中CD147(f=5.612、11.390、6.355)、MMP-2(f=4.122、8.047、4.422)、VEGF(t=4.955、12.176、5.110)表达比较,差异均有统计学意义(P<0.01).相关性分析发现,CD147的表达与MMP-2、VEGF的表达均呈正相关(r=0.755、0.820,P<0.01).结论 CD147、VEGF、MMP-2在氧诱导视网膜病变大鼠中有大量表达.杨华伟,雷宁玉,王丽君,薛有余,张翠芳 - 中华眼底病杂志文章来源： 万方数据 -
替比夫定治疗e抗原阴性的慢性乙型肝炎疗效观察
目的 探讨替比夫定治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎(CHB)的临床疗效.方法 52例未经抗病毒治疗的HBeAg阴性CHB患者随机分为观察组和对照组各26例,观察组口服替比夫定,600 mg/d;对照组口服拉米夫定,100 mg/d,均连续用药48周.观察两组治疗12、24和48周HBV-DNA转阴率、ALT复常率及酪氨酸一蛋氨酸一天冬氨酸一天冬氨酸(YMDD)变异情况.结果 观察组治疗12、48周时HBV-DNA阴转率及ALT复常率均明显高于对照组,P均<0.05;观察组未检测到YMDD变异,对照组3例于治疗48周时检测到YMDD变异.结论 替比夫定治疗HBeAg阴性慢性乙型肝炎效果确切、耐药率低、安全性好,值得借鉴.黄胜,黄跃成,黄伟,余庆新,潘长焰,张江海 - 山东医药文章来源： 万方数据
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