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恙虫病东方体合肥分离株截短56 kDa蛋白抗原表达及活性分析
本文获得恙虫病东方体合肥分离株截短56 kDa外膜蛋白基因工程纯化抗原,并鉴定其免疫学活性,为进一步研制广谱诊断试剂、疫苗以及分析其在东方体致病的分子机制奠定基础.我们通过DNAStar和Mega等软件对含有440个氨基酸的合肥株56 kDa蛋白序列进行抗原性分析;将合肥株56 kDa截短蛋白基因克隆至原核表达载体pET28a获重组质粒,转入大肠杆菌E.coli BL21感受态中,经IPTG诱导,SDS-PAGE电泳分析检测蛋白表达;采用亲和层析法纯化目的蛋白,Western-blot及ELISA法鉴定其免疫学活性.序列分析发现合肥分离株56 kDa蛋白可分为4个保守区和3个可变区,抗原性分析结果显示,其保守区的亲水性和抗原性均有很高峰值.SDS-PAGE电泳显示约56 kDa的目的重组蛋白表达条带,Western-blot分析显示该重组蛋白可与恙虫病病人血清反应,阴性血清则未出现相应印迹,ELISA分析结果显示该蛋白最低浓度为80 ng/μL时仍可检出阳性血清;5μg/mL蛋白可检测阳性血清滴度高达1∶12 800,证实其具有较强反应原性.本实验获得恙虫病东方体合肥株56 kDa截短外膜蛋白基因工程抗原具有良好的抗原活性,有望进一步应用于恙虫病的诊断、疫苗研制及致病机制分析.耿美玲,郑峰,吕恒,朱进,胡丹,郝丽娜,张凤玉,龚秀芳,李丙军 - 寄生虫与医学昆虫学报文章来源： 万方数据 -
土壤样品中微生物活性的荧光分析方法
以土壤为供试样品,基于荧光素二乙酸酯(FDA)水解反应产生的荧光素含量与土壤中微生物活性呈比例的现象,探讨了荧光光度法测定土样中微生物活性的可行性,提出采用荧光光度法测定环境样品中微生物活性的新方法.对测定所涉及的物理参数和化学参数进行了优化.在最佳实验条件下,方法的线性响应范围为荧光素含量2-2000#g.L-1,线性相关系数(r)=0.9971,方法的检出限(3σ)为3.1*10-2#g.L-1,方法的相对标准偏差(RSD)为2.8%(n=5),对4个土壤样品荧光素含量测定的回收率为90.6%-104%.所建立的方法具有简单快速、灵敏度高、线性范围宽、试样用量少等优点,可用于土壤、水等环境样品中微生物活性的测定.王佳佳,周桦,张进,范世华 - 环境化学文章来源： 万方数据 -
具杀螺活性的商陆根际真菌Aspergillus fumigatus SL-30发酵条件优化
以杀螺率为响应值,对商陆根际真菌菌株SL-30的发酵条件进行优化.在前期单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman设计法,对影响菌株发酵滤液杀螺活性的主要因素进行筛选,确定了三个主要因素依次为可溶性淀粉,蛋白胨和初始pH.采用响应面分析法确定了以上三个显著因子的最佳水平分别及交互影响,结果显示,三个显著因素的最佳水平为可溶性淀粉16.40 g/L,蛋白胨3.76 g/L,初始pH3,该条件下发酵滤液的杀螺活性预测值达98.949%.经六批次的发酵验证,预测值与试验平均值接近.郭丹钊,陈钧,杜向萍,张春晓,潘静 - 天然产物研究与开发文章来源： 万方数据 -
超抗原葡萄球菌肠毒素A拮抗伊马替尼抑制细胞活化作用的研究
目的:探讨葡萄球菌肠毒素A(staphylococcal enterotoxin A,SEA)对甲磺酸伊马替尼(imatinibmesylate,IM)抑制T淋巴细胞活化的影响.方法:2mg/LSEA和50nmol/LIM联合作用于Jurkat细胞24h后,用实时荧光定量PCR技术检测CD3ε和ζ链mRNA表达水平变化;Westernblotting技术检测CD3ε和ζ链蛋白水平变化.结果:单纯IM组CD3e和链mRNA及蛋白表达均表现下调;SEA与IM联合用药组可以逆转IM下调CD3ε和ζ链mRNA及蛋白表达水平作用.SEA拮抗IM抑制作用中,对CD3e链mRNA表达上调的作用明显大于CD3ζ链.结论:SEA能拮抗IM对T细胞CD3ε和ζ链表达的抑制作用.颜宇辉,陈小华,王冠明,林晨,李扬秋 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
维生素A与早产儿呼吸窘迫综合征相关性分析
新生儿呼吸窘迫综合征(Respiratory distress syndrome,RDS)是由于肺表面活性物质缺乏所致,大约有1%的新生儿可发生RDS,并且多见于早产儿,是导致早产儿高病死率、高致残率的重要因素.维生素A(Vitamin A,VA)具有维持上皮组织功能和结构完整性作用,并且在肺表面活性物质生成以及肺的发育中有重要作用.早产儿体内血清VA水平较低,因此,VA缺乏是否与早产儿RDS的发生有关值得探究.程晨,包蕾 - 儿科药学杂志文章来源： 万方数据 -
朱砂根抑制α-葡萄糖苷酶与抗氧化活性研究
对朱砂根抑制α-葡萄糖苷酶与抗氧化活性进行研究.利用96微孔板法筛选α-葡萄糖苷酶抑制活性;采用DPPH、ABTS和FRAP方法分析抗氧化活性.结果表明,乙酸乙酯部位抑制α-葡萄糖苷酶的活性最高(IC50=39.27 μg/mL),石油醚部位次之(IC50 =56.11 μg/mL),正丁醇部位活性最弱(IC50=62.05μg/mL),但均远大于阳性对照Acarbose(IC50=1081.27 μg/mL);乙酸乙酯部位抗氧化能力最强,正丁醇部位次之.乙酸乙酯部位清除DPPH自由基(IC50=38.55 mg/L)的能力比BHT( IC50=18.71 mg/L)低1/2,清除ABTS自由基的能力(IC50=3.60 mg/L)比BHT(IC50=7.44 mg/L)强,但比BHA(IC50=1.74 mg/L)弱,还原Fe3+的能力(FRAP=512.99 ±6.80 μmoTE/g)为BHT(FRAP=1581.68±97.41μmol TE/g)的1/3.结果显示朱砂根乙酸乙酯部位抑制α-葡萄糖苷酶和抗氧化活性最好.李园园,李锟,王俊霞,康文艺 - 天然产物研究与开发文章来源： 万方数据 -
不同的抗原修复方法在Ⅳ型胶原免疫组化染色中的应用
Ⅳ型胶原(collagenⅣ)是构成基膜致密层的主要成分,亦属于纤维型胶原.在基膜中呈三维的网状结构,与其他成分如层黏连蛋白、纤维连接蛋白等共同组成细胞外基质.在部分肿瘤中可出现明显的粗纤维反应或肿瘤细胞分泌产生大量的胶原纤维,这些胶原的识别在诊断与鉴别诊断中具有重要意义.在日常的工作中,Ⅳ型胶原免疫组化染色常会出陈余朋,张声,王行富,李国平,王鹏程,王密 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
免疫组化阴性片多次重复免疫组化染色的可行性
免疫组化在病理工作中已被广泛应用,是当前病理工作中不可或缺的重要手段,在疾病诊断、判断预后、指导临床治疗、了解发病机制和检测病原体等方面起重要作用[1].临床病理工作中,时常会碰到微小病变组织或会诊白片数量有限,而已做好的免疫组化不能确诊,又无有效组织或白片继续进一步标记的情况.本文旨在探讨免疫组化阴性片进行不同抗体的再标记的可行性,以期能反复利用有限资源尽可能做更多标记以利于诊断.陈余朋,张声,王鹏程,王允玉,王行富 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
胎膜早破的分子生物学研究进展
胎膜早破是产科一种常见的并发症,对母婴可造成很大伤害.明确病因有助于对胎膜早破的发生机制提供理论依据,对临床早期诊断、正确处理胎膜早破有实际指导意义.从病因出发,适时治疗可大大减少对母婴的危害,降低围生儿的发病率及病死率,有利于产妇的分娩.胎膜早破的病因复杂,至今仍未完全明确.现着重从分子水平对胎膜早破的病因予以综述.万丽娟,吴楠,尚立新 - 医学综述文章来源： 万方数据 -
高交感活性诱导的大鼠心肌损伤模型中氧化应激的受体调控机制
目的:研究高交感活性诱发大鼠心肌损伤的氧化应激受体调控机制。方法:Sprague-Dawley ( SD)大鼠随机分为对照组、模型组、普萘洛尔(Pro)组、哌唑嗪(Praz)组、普萘洛尔+哌唑嗪(Pro+Praz)组、维生素E (VE)组及普萘洛尔+哌唑嗪+维生素E (Pro+Praz+VE)组,除对照组外其余各组均腹腔注射去甲肾上腺素( NE)复制高交感活性引起的心肌损伤模型,同时灌胃给予相应药物,连续给药16 d,期间监测各组动物体重的变化。16 d后进行心室重构指标(心指数和羟脯氨酸含量)、病理组织学检查、氧化/抗氧化指标( MDA、SOD、CAT、GSH-Px和T-AOC)和能量代谢指标( Na+-K+ATPase和Ca2+-Mg2+ATPase)分析。结果:从第9天开始,模型组动物体重与对照组的比较差异有统计学意义(P<0.05),心指数和左心室肥厚明显增加,氧化/抗氧化和能量代谢障碍;Pro、Praz、Pro+Praz和VE各组均出现不同程度的动物体重、心指数、左心室肥厚和氧化/抗氧化失衡的改善;Pro、Praz和Pro+Praz能明显升高左心室Na+-K+ATPase和Ca2+-Mg2+ATPase的活性,Pro+Praz作用最明显( P<0.05)。结论:肾上腺素受体依赖是高交感活性诱导心肌氧化应激损伤的重要途径。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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