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树鼩慢性感染乙肝病毒过程中枯否细胞变化的意义
目的:探索枯否细胞在树鼩感染乙肝病毒( HBV)慢性化过程中的意义。方法:树鼩分为3组:A组6只,为前期实验已确定慢性感染HBV的树鼩;B组3只,为疑似慢性感染HBV的树鼩;C组4只,为未接种HBV的正常对照树鼩。全部动物定期抽血和进行肝活检手术;对手术切取的树鼩肝组织进行枯否细胞的分离、纯化和原代培养,采用流式细胞术、细胞免疫组化、溶酶体荧光探针及实时荧光定量RT-PCR等方法检测CD163+细胞数量、溶酶体数量、溶菌酶的表达及肿瘤坏死因子α( TNF-α) mRNA表达水平。结果:(1)慢性感染HBV的树鼩肝脏枯否细胞比例及肝组织内CD163+细胞数量显著高于其它2组(均P<0.05);(2)慢性感染HBV的树鼩肝脏枯否细胞的溶酶体荧光强度、肝组织内溶菌酶阳性细胞计数和TNF-αmRNA的表达水平均显著低于其它2组(均P<0.05)。结论:枯否细胞在宿主感染HBV的慢性化过程中可能起一定的调节作用。- 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
树鼩肝枯否细胞的分离及鉴定
目的 建立对树鼩枯否细胞(Kuffer cells,KCs)进行分离、原代培养和鉴定的方法.方法 经肝活检手术分别获取6只树鼩的肝组织,后采用胶原酶体外灌注结合机械法分离肝脏细胞,经差速离心法、Percoll梯度密度离心法及贴壁法分离、纯化KCs后进行原代培养,最后通过细胞免疫组化、墨汁吞噬实验及透射电镜对KCs进行鉴定.结果 树鼩肝组织分离获得的KCs数量为(1.2±0.2) ×106个/g肝组织,细胞活力为90%,细胞纯度达85%以上.结论 本组建立的胶原酶体外灌注结合机械分离树鼩KCs的方法稳定实用,为同一研究个体的KCs进行多次分离培养和动态观察奠定基础.阮萍,杨春,欧超,骆成漂,秦虹,孙雯,李瑗 - 临床与实验病理学杂志文章来源: 万方数据 -
急性百草枯中毒早期死亡相关因素分析
目的 寻找判断急性百草枯(PQ)中毒患者早期(72 h内)死亡的相关临床指标.方法 回顾性分析中国医科大学附属第一医院急诊重症监护病房(EICU)收治的93例急性PQ中毒死亡患者的临床资料,根据中毒后是否在72 h内死亡分为两组,记录两组患者的性别、年龄、服毒量、尿中PQ浓度、每次灌流后尿中PQ浓度的降低率;中毒后24 h内血白细胞计数(WBC)、淋巴细胞计数、动脉血气分析值,血K+、Na+、Cl-,以及血清淀粉酶、脂肪酶、总胆红素、肌钙蛋白Ⅰ、肌酸激酶(CK)、尿素氮、血肌酐的最差值;采用Spearman相关分析尿中PQ浓度与服毒量的相关性;用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析各指标对中毒早期死亡的预测价值.结果 93例急性PQ中毒患者72 h内死亡19例,早期病死率为20.4%.与非早期死亡组比较,早期死亡组服毒量(mL:133.4±108.8比58.6±40.0,t=3.145,P=0.002)、尿中PQ浓度[mg/L:16.34(11.87,96.76)比4.46(1.21,12.78),Z=-3.422,P=0.001]、WBC(×109/L:22.63±9.72比14.95±8.39,t=3.446,P=0.001)、动脉血乳酸[Lac(mmol/L):6.7(2.2,12.1)比1.9(1.1,3.4),Z=-3.294,P=0.001]均明显升高,第一次血液灌流后尿中PQ浓度降低率[(38.40±15.63)%比(67.59±27.87)%,t=2.945,P=0.004]、动脉血二氧化碳分压[PaCO2(mmHg,1 mmHg=0.133 kPa):28.7±9.3比34.8±6.7,t=-3.245,P=0.002]明显降低,其余指标差异均无统计学意义.服毒量与尿中PQ浓度呈显著正相关(r=0.450,P<0.001).ROC曲线显示,尿中PQ浓度、WBC、Lac预测PQ中毒早期死亡价值较大[尿中PQ浓度的曲线下面积(AUC)为0.806,95%可信区间(95%CI)为0.699~0.913,截断值为11.64 mg/L时,敏感度为84.6%,特异度为71.4%;WBC的AUC为0.734,95%CI为0.569 ~ 0.899,截断值为15.94×109/L时,敏感度为69.2%,特异度为76.8%;Lac的AUC为0.729,95%CI为0.568 ~ 0.891,截断值为1.95 mmol/L时,敏感度为84.6%,特异度为42.9%].结论 尿中PQ浓度、WBC、Lac、服毒量、PaCO2为PQ中毒患者早期死亡的危险因素;尿中PQ浓度、WBC、Lac对患者早期死亡有较高的预测价值.才权,刘志 - 中华危重病急救医学文章来源: 万方数据 -
百草枯中毒的临床护理
目的 总结百草枯中毒的临床护理体会.方法 对12例百草枯中毒患者采取综合措施,及时清除毒物,防止毒物吸收,尽早行血液灌流等治疗及护理.结果 本组12例患者治愈2例,死亡10例,死亡率为76%.结论 百草枯中毒患者死亡率极高,必须提高对本病的认识,在洗胃、吸附、导泻、药物等治疗的基础上,应尽早进行血液灌流,提高生存率.王文琴,张谦,周厚荣,卓惠敏,吉晓剑,李静,姚欢 - 护士进修杂志文章来源: 万方数据 -
内蒙古马铃薯黑痣病菌融合群的测定与分析
为明确内蒙古马铃薯黑痣病菌融合群的组成及其致病力,从内蒙古13个县(旗)分离得到109株黑痣病菌,采用载玻片配对法和土壤接种法分别测定其融合群及致病力.结果表明,109株黑痣病菌中共存在8个融合群及亚群,分别为AG1-IB、AG2-1、AG3、AG4-HG-Ⅱ、AG4-HG-Ⅲ、AG5、AG9及AG-A.其中84株菌株为AG3,占77.06%;AG4-HG-Ⅱ和AG5分别为8株和6株,占7.34%和5.50%;其余5个融合群各不超过5株,所占比例均在5.00%以下.在84株AG3融合群中,从薯块分离得到52株,茎表分离得到32株;其它7个融合群共25株菌株均分离自茎表.除AG-A无致病能力外,其它融合群均可致病,AG3致病力最强,AG4和AG5次之,AG2-1、AG9和AG1-IB最弱.表明内蒙古马铃薯黑痣病菌具有丰富的多样性,但其优势融合群仍为AG3.张春艳,杨志辉,王宇,朱杰华 - 植物保护学报文章来源: 万方数据 -
中药对百草枯中毒肺损伤动物模型干预作用的Meta分析
目的 系统评价中药在百草枯中毒肺损伤动物中的干预作用,为今后临床试验提供理论依据.方法 搜索万方数据库、中国知网CNKI、维普数据库、PubMed/MEDLINE、EMBASE 1979年1月至2012年9月发表的有关中药对百草枯中毒肺损伤动物干预作用的相关文献,按Cochrane系统评价方法筛选实验、提取资料,采用RevMan 5.0软件对符合纳入标准的文献进行荟萃分析(Meta分析),均采用随机效应模型,得出合并后的加权均数差(WMD)及95%可信区间(95%CI).结果 最终共纳入18篇文献,总计1 188只动物.Meta分析结果显示,中药干预能够改善百草枯中毒肺损伤动物的肺系数(WMD为-0.07,95%CI为-0.14~-0.01,P=0.03),降低肺湿/干质量比值(WMD为-1.15,95%CI为-2.03 ~-0.27,P=0.01),提高血浆超氧化物歧化酶(SOD)含量(WMD为56.08,95% CI为23.46~88.70,P=0.000 8),改善谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平(WMD为26.64,95%CI为18.95~34.33,P<0.000 01),降低肺组织丙二醛(MDA)含量(WMD为-0.65,95%CI为-1.00 ~-0.30,P=0.000 2);但中药干预对炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、羟脯氨酸(HYP)的影响与对照组比较差异无统计学意义,其中TNF-α的WMD为-25.15,95%CI为-54.87~4.57,P=0.10;HYP的WMD为-1.11,95%CI为-2.71 ~ 0.48,P=0.17.结论 中药干预治疗对百草枯中毒肺损伤动物具有一定的保护作用,但数据存在较大的异质性,故仍需进一步验证.王磊,洪广亮,李冬,陈肖,韩文文,卢中秋 - 中华危重病急救医学文章来源: 万方数据 -
急性肾损伤网络分期在急性百草枯中毒中的预后价值
目的 探讨临床应用急性肾损伤网络(AKIN)分期标准对急性百草枯(PQ)中毒患者预后的价值.方法 回顾性分析山东省立医院2010年4月至2013年3月收治的184例口服PQ中毒患者的临床资料,比较存活组和死亡组患者的各种临床指标和AKIN分期,采用Cox比例风险回归模型进行多因素分析,Kaplan-Meier法对不同AKIN分期患者进行生存分析.结果 184例PQ中毒患者死亡79例,病死率42.93%.死亡组和存活组之间性别、是否合并饮酒、服毒至洗胃时间、服毒至首次灌流时间、血液灌流次数差异均无统计学意义;年龄、服毒量、是否血液净化、AKIN分期,以及入院时白细胞计数、中性粒细胞比例、血糖、血尿素氮、肌酐、β2-微球蛋白(β2-MG)、血清K+、CO2总量、阴离子间隙和尿PQ浓度等14项指标差异明显,其中AKIN分期[优势比(OR)=3.242,95%可信区间(95%CI)为2.236~4.701,P=0.000]、尿PQ浓度(OR=1.773,95%CI为1.008 ~ 3.116,P=0.047)、服毒量(OR=1.003,95%CI为1.000~ 1.006,P=0.040)和CO2总量(OR =0.094,95%CI为0.891 ~ 0.991,P=0.021)是死亡的独立预后因素.Kaplan-Meier生存分析显示,AKIN 3期患者生存率明显低于AKIN 2期(5.88%比56.25%,x2=16.149,P=0.000)、AKIN 1期(5.88%比78.95%,x2=62.444,P=0.000)和肾功能正常者(5.88%比100.0%,x2=173.549,P=0.000).结论 AKIN分期是PQ中毒患者可靠的预后预测因素.在没有开展血浆PQ浓度测定的医院,应用AKIN分期可以作为评估PQ中毒严重性的简单而实用的工具.刘尊齐,纪宏斌,王海石,张兴国,谷燕,商德亚,刘东兴,郝凤桐 - 中华危重病急救医学文章来源: 万方数据 -
选择性磷酸酶抑制剂Salubrinal对急性百草枯中毒大鼠肺组织细胞自噬和凋亡的影响
目的 观察选择性磷酸酶抑制剂Salubrinal治疗对急性百草枯(PQ)中毒大鼠肺组织细胞自噬和凋亡的影响,并探讨其治疗机制.方法 将200只Wistar大鼠按计算机生成的随机排列表分为4组,每组50只.一次性灌胃40 mg/kg PQ溶液1 mL制备PQ染毒模型,之后每日1次腹腔注射1 mL生理盐水(NS);对照组一次性给予1 mL NS灌胃,之后每日2次腹腔注射1 mL NS;Sal 0.5和Sal 1.0组分别于PQ染毒后1、3、5d腹腔注射0.5 mg/kg或1.0 mg/kg Salubrinal 1 mL,每日1次.染毒后7d取肺组织,苏木素-伊红(HE)染色后观察肺组织形态学改变;免疫组化染色观察肺组织自噬相关蛋白LC3-Ⅱ阳性表达;蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织LC3-Ⅱ和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)的蛋白表达.结果 HE染色结果显示:PQ染毒组肺组织结构部分破坏,肺泡壁塌陷,肺泡腔扩大,局部炎性细胞浸润,肺泡隔显著增厚,局部明显出血;Sal 0.5组和Sal 1.0组肺组织病理改变较PQ染毒组明显减轻.免疫组化染色显示:与对照组比较,PQ染毒组、Sal 0.5组和Sal 1.0组肺组织LC3-Ⅱ阳性表达均明显降低(A值:78.34±10.71、76.52±8.21、77.48±9.11比117.58±15.26,均P<0.05);而后3组间两两比较差异无统计学意义(均P>0.05).Western Blot结果显示,与对照组比较,PQ染毒组肺组织LC3-Ⅱ、caspase-3蛋白表达均明显升高[LC3-Ⅱ(A值):0.22±0.05比0.14±0.03,caspase-3(A值):0.115 ±0.013比0.023±0.006,均P<0.05].与PQ染毒组比较,Sal 0.5组和Sal 1.0组肺组织LC3-Ⅱ、caspase-3蛋白表达均明显降低[LC3-Ⅱ(A值):0.19±0.05、0.18±0.04比0.22±0.05,caspase-3(A值):0.078±0.012、0.076±0.010比0.115±0.013,均P<0.05].结论 急性PQ中毒大鼠肺组织发生了内质网应激-自噬;Salubrinal可降低急性PQ中毒大鼠肺组织发生细胞自噬,抗细胞凋亡,从而起到治疗作用.李海峰,邢宝鹏,权玉兰,孙明莉 - 中华危重病急救医学文章来源: 万方数据 -
血必净干预下百草枯中毒大鼠肺组织线粒体融合蛋白2及超微结构变化的研究
目的 探讨百草枯(PQ)中毒致肺纤维化的发生机制以及血必净在PQ中毒时的治疗作用.方法 72只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、PQ中毒组和血必净干预组3组,每组24只.一次性灌胃50 mg/kg PQ染毒致肺纤维化,对照组灌胃1 mL蒸馏水;血必净组在染毒后30 min腹腔注射血必净注射液4 mL/kg,12h1次;PQ组和对照组则腹腔注射等量生理盐水;给药周期均为14 d.各组于染毒后1、3、7、14d末次干预后30 min各处死6只大鼠,取肺组织,通过苏木素-伊红(HE)染色、马松(Masson)染色,光镜下观察肺组织病理学及肺纤维化改变;透射电镜下观察肺组织超微结构变化;采用碱水解法测定羟脯氨酸(HYP)含量;采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达.结果 ①HE染色:PQ组3d时炎症反应最重;7d时肺泡腔内渗出液逐渐机化,由肥大的成纤维细胞分泌纤细的胶原纤维,肺泡腔内可见到纤维化;14d时成纤维细胞大量增生,肺泡结构破坏并萎陷,胶原沉积,肺纤维化初步形成.血必净组各时间点肺组织病理变化较PQ组轻.②Masson染色:14d时血必净组肺泡炎、肺纤维化程度较PQ组减轻.③电镜下观察:PQ组14d时肺组织线粒体相对少,多数发生变性、肿胀和破坏;可见基膜卷折,肺泡塌陷,间质内胶原纤维增多,纤维化明显,且均较血必净组严重.④HYP含量(μg/g):PQ组、血必净组3d时肺组织HYP含量即明显高于对照组(743.3±50.2、718.1±34.0比665.8±6.6,均P<0.05),随后逐渐升高;但血必净组7d、14d时HYP含量明显低于PQ组(790.5±23.8比876.7±42.0、812.9±72.3比931.3±33.0,均P<0.05).⑤Mfn2表达:对照组Mfn2表达量相对较低;PQ组Mfn2表达量随时间延长呈应激性逐渐升高,但升高幅度较小;血必净组1d时Mfn2表达(A值)即明显高于PQ组(0.731±0.035比0.618±0.029,P<0.05),并持续高表达,7d时达峰值(0.732±0.037比0.669±0.034,P<0.05),而14 d时明显低于PQ组(0.708±0.034比0.765±0.041,P<0.05).结论 血必净可减轻PQ中毒引起的肺部炎症反应及肺纤维化程度,其作用机制可能为血必净调节并增加了肺组织中Mfn2的表达.胡明,吴伟,宫建,李延辉 - 中华危重病急救医学文章来源: 万方数据

