科创中国

目的:通过检测脓毒症患者外周血自然杀伤细胞(NK细胞)的表型和功能,探讨其在脓毒症免疫功能紊乱中的可能作用机制.方法采用回顾性研究方法,选择2011年8月至2013年8月安徽省立医院重症医学科收治的59例全身炎症反应综合征(SIRS)患者和65例脓毒症患者,在患者进入重症监护病房(ICU)48 h内抽取外周血,用流式细胞仪检测NK细胞的表型和功能.以同期28例健康体检者的血样本为对照.结果 SIRS和脓毒症患者外周血CD3-CD56+NK细胞比例及计数均正常,与健康对照组均无明显差异〔细胞比例:0.102±0.019、0.102±0.108比0.106±0.018,F=0.018,P=0.982;细胞计数(×106/L):182.46±65.98、172.97±63.51比179.25±60.44,F=0.349,P=0.706〕.NK细胞脱颗粒作用试验显示,健康对照组、SIRS组和脓毒症组CD107表达及γ-干扰素(IFN-γ)分泌无明显差异〔CD107:0.135±0.050、0.140±0.058、0.128±0.070,F=0.583,P=0.560;IFN-γ(kU/L):14.36±4.74、12.49±4.21、13.45±5.04, F=1.616,P=0.202〕.抗体依赖细胞毒作用(ADCC)试验显示,健康对照组、SIRS组和脓毒症组CD107表达无差异(0.574±0.166、0.643±0.165、0.581±0.157,F=0.808,P=0.448);但与健康对照组比较,SIRS组NK细胞分泌IFN-γ的能力显著增加(kU/L:40.5±13.2比28.4±9.6,P=0.001),而脓毒症组NK细胞分泌IFN-γ的能力显著降低(kU/L:19.8±6.7比28.4±9.6,P<0.01).与SIRS组比较,脓毒症组只有NK细胞表面抑制性受体CD158e(KIR 3DL1)表达明显升高(0.203±0.057比0.079±0.021,t=15.762,P<0.001);而两组间其他表型均无明显差异.与SIRS组比较,脓毒症组基础血清IFN-γ分泌水平显著降低(kU/L:0.280±0.040比0.310±0.038,t=3.390,P=0.009),IL-12的产生也明显减少(ng/L:0.15±0.03比0.30±0.08, t=32.832,P<0.001).结论 NK细胞表型和功能检测结果?

目的:探讨有针对性的系统的健康教育干预措施,对糖尿病足发生率的影响。方法:将2009年5月至2011年5月门诊及住院的糖尿病患者224例随机分成对照组与干预组,每组各112例,干预组给予系统的针对性的糖尿病足健康教育,对照组给予一般的糖尿病教育,采用糖尿病知识掌握情况问卷、糖尿病足知识掌握情况问卷对两组患者进行指标观察。结果:干预组糖尿病足发病率较对照组明显降低(P <0.01)。结论:系统的健康教育干预措施能有效降低糖尿病足的发生。

目的:探讨转染微小RNA-132(miR-132)对肺泡巨噬细胞炎症反应的作用。方法:将体外去致热源培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为空白对照组、阴性对照组和转染组,分别采用miR-132增敏剂、错义链和PBS作用。转染24 h后,CCK-8法检测细胞増殖;实时荧光定量PCR检测细胞中miR-132的表达;用脂多糖( LPS)作用细胞后,凝胶电泳迁移率实验( EMSA )检测细胞中NF-κB活性;Western blotting法检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。结果:与空白对照组和阴性对照组相比较,转染组细胞中miR-132的表达明显升高;转染组细胞増殖被明显抑制,与空白对照组相比较,差异有统计学意义( P<0.05);LPS作用后,转染组NF-κB、TNF-α和IL-6表达量显著下降,与空白对照组和阴性对照组相比较,差异均有统计学意义( P <0.05)。结论:转染miR-132可抑制NR8383细胞増殖,并抑制LPS诱导的NR8383细胞的炎症反应。

系统性淀粉样变性是一类疾病的总称,临床上以免疫球蛋白轻链型淀粉样变性(AL型)最为常见,占淀粉样变性的80%以上.AL型淀粉样变性好发于老年人,中位诊断年龄约62岁,随着我国人口老龄化和环境致病因素的加剧,AL型淀粉样变性的发病率也呈现出逐年升高的趋势.笔者所在单位1979年~2002年的13 519例肾活检结果显示淀粉样变性占肾活检总数的0,5%,而近年来AL型淀粉样变性已占肾活检总数的2%左右.国外资料表

目的 探讨苦柯胺B(KB)对脓毒症小鼠肺部炎症反应的抑制作用及分子机制.方法 将28只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为对照组(8只)、脂多糖(LPS)组(10只)、LPS +KB组(10只).腹腔注射LPS 20 mg/kg制备脓毒症模型(LPS组);对照组给予等体积生理盐水;LPS +KB组于LPS刺激4h后经尾静脉注射KB 20 μg/kg.于LPS刺激后8h检测动物血浆LPS浓度及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆、肺泡灌洗液及肺组织匀浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织核转录因子-κB(NF-κB)活性和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达;用苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变;免疫组化法观察肺组织中细胞间黏附分子-1 (ICAM-1)蛋白表达.结果 与对照组比较,LPS组血浆LPS浓度(kEU/L:1 155.650±147.149比31.390±18.859)、MPO活性(U/g:1.177 ±0.093比0.775±0.166)、NF-κB活性(灰度值:1.557±0.105比0.824±0.032)、iNOS蛋白表达(灰度值:0.650±0.129比0.392±0.097)均显著升高(均P<0.05);KB干预后LPS浓度(624.461±149.012)、MPO活性(0.919±0.023)、NF-κB活性(1.127±0.074)、iNOS蛋白表达(0.425±0.066)均被明显抑制(均P<0.05).与对照组比较,LPS组血浆、肺泡灌洗液、肺组织匀浆中TNF-α(ng/L:47.325±13.864比6.534±0.544,13.382±2.231比3.748±0.692,31.127±7.399比14.948±4.673)、IL-1β(ng/L:74.329±11.890比29.921±6.487,9.422±2.674比1.105±0.364,528.509±32.073比109.945±13.561)浓度均显著增加(均P<0.05);而应用KB干预后TNF-α(20.331±7.789、7.145±1.202、15.966±2.946)、IL-1β(57.707±8.098、2.212±0.878、426.154±11.270)浓度均明显降低(血浆TNF-α:F=16.052、P=0.002,IL-1β:F=20.649、P=0.000;肺泡灌洗液TNF-α:F=31.134、P=0.001,IL-1β:F=22.792、P=0.002;肺组织匀浆TNF-α:F=10.013、P=0.009,IL-1β:F=319.857、P=0.000).光镜下观察显示,与LPS组比较,KB干预后肺组织病理改变明显减轻,ICAM-1表达明显减少.结论 KB作为新型的LPS中和剂,能够拮抗LPS对脓毒症小鼠的炎症刺激作用,减轻肺部炎症反应,保护脓毒症小鼠的肺脏功能.

目的 探讨老年系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的临床特点及诊断、鉴别诊断要点.方法 对我院肾内科收治的1例老年SLE的临床资料进行回顾性分析,并复习相关文献.结果 本例为74岁女性患者,6个月前出现双下肢水肿,2个半月前出现皮肤破溃,在当地医院查尿蛋白(+++),血清白蛋白16 g/L,诊断为肾病综合征,治疗效果差.入我院后查血清抗核抗体等多种自身抗体和免疫复合物阳性,血清补体水平降低,明确诊断为SLE并狼疮性肾炎,肺部感染、风湿性心脏病.后因病重死亡.结论 老年SLE临床表现多不典型,易误诊和漏诊.接诊疲乏、肌无力、肺部病变、皮疹、血常规异常、肾脏病变、感染、心包积液,具有不典型的中枢神经系统症状的老年患者,应及早考虑到老年SLE的可能,及时行相关检查,尽早治疗,改善预后.

目的 探讨系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)的临床病理学特征和死亡原因.方法 对1例SLE死者进行尸检,观察其病理组织学和免疫表型特征,探讨该病的临床病理学特征和死亡原因.结果 死者,男童,11岁,因发现双下肢皮疹1周入院,诊断为SLE(活动期),住院期间突发呼吸急促,经抢救无效死亡.尸检发现死者肺脏、肾脏受累,因狼疮性肺炎致急性呼吸衰竭死亡.结论 SLE可造成全身多脏器损害,急性期患者的死亡原因主要是SLE多脏器严重损害和感染,慢性肾功能不全和药物不良反应是SLE远期死亡的主要原因.

视神经脊髓炎(NMO)是一种主要侵犯视神经和脊髓的中枢神经系统炎症性脱髓鞘性疾病.NMO患者血清中特异性自身抗体-水通道蛋白4(AQP4)抗体的发现不仅确定了NMO是一种抗体介导的自身免疫性疾病,并且修改了NMO的诊断标准,扩展了NMO疾病谱[1].随着对NMO的研究进展,目前发现许多NMO患者伴随其他自身免疫性疾病或者血清中存在非特异性自身免疫抗体[2],

目的 观察脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应后微小RNA-132(miR-132)的动态变化,以初步探讨miR-132在肺泡巨噬细胞炎症反应中的作用.方法 将体外去致热源培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为空白对照组和以终浓度1 mg/LLPS刺激3、6、12及24 h组,分别收集各时间点上清液及细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-cα (TNF-α)、白细胞介素(IL-1β和IL-6)的含量,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR-132的表达.结果 与空白对照组相比,LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞后3h上清液中TNF-α含量(ng/L:364.83±46.29比34.07±8.62,P<0.01)、IL-1β含量(ng/L:153.83±43.67比32.33±10.62,P<0.05)、IL-6含量(ng/L:183.85±43.52比42.62±11.21,P<0.05)即明显升高,随时间延长均逐渐升高至12h达峰值(TNF-α:605.09±57.13,IL-1β:377.09±28.55,IL-6:558.04±77.45,均P<0.01),24 h时均有所下降(TNF-α:281.95±41.61,IL-1β:263.17±51.36,IL-6:438.74±79.94),但仍显著高于空白对照组(均P<0.01).LPS刺激后3 h,miR-132表达水平较空白对照组上调了(1.12±0.11)倍(P=0.995),6、12、24h miR-132表达较空白对照组分别上调了(5.98±0.65)、(7.64±0.53)和(8.92±0.83)倍(均P<0.01).结论 LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应后,miR-132表达随时间延长逐步上调,其可能参与调控大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应.

目的 探讨外周血淋巴细胞计数、淋巴细胞比例在非感染性全身炎症反应综合征(SIRS)、脓毒症及严重脓毒症患者中的变化及意义.方法 回顾分析201 1年1月至2013年9月入住北京大学第三医院急诊科重症监护病房(ICU)423例患者的临床资料,其中非感染性SIRS患者54例,脓毒症患者177例,严重脓毒症患者192例;死亡150例,存活273例.入院时检测外周血白细胞计数(WBC)、中性粒细胞比例(N)、淋巴细胞计数、淋巴细胞比例、乳酸、血清超敏C-反应蛋白(hs-CRP)和降钙素原(PCT)水平,并计算急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分.根据患者诊断和预后分组,比较各指标,并采用Spearman相关分析评价淋巴细胞与各指标的相关性.结果 年龄越大,病情越重.在SIRS组、脓毒症组及严重脓毒症组,随病情加重,APACHEⅡ评分(分:7.78±3.72、13.85±7.22、24.00±9.79)、住院时间[d:6.0(1.0,9.0)、12.0(8.0,22.0)、19.5(7.0,29.0)]、病死率(0、10.2%、52.6%)、WBC(×109/L:7.59±3.27、8.94±3.95、10.32±5.50)、N(0.685±0.132、0.778±0.135、0.831±0.086)、hs-CRP[mg/L:4.60(2.80,7.52)、23.58(13.49,49.22)、59.77(19.36,110.62)和PCT[μg/L:0.05(0.05,0.05)、0.09(0.05,0.61)、0.63(0.10,5.25)]呈升高趋势(均P=0.000),淋巴细胞计数[×109/L:1.53 (0.89,1.88)、0.90 (0.65,1.42)、0.80 (0.50,1.12)]、淋巴细胞比例(0.225±0.122、0.138±0.097、0.106±0.070)呈降低趋势(P<0.05和P<0.01);3组乳酸水平比较差异有统计学意义[分别为2.40(1.30,5.10)、1.10(0.80,2.00)、1.40(1.00,2.50)mmol/L,P=0.000].与存活组比较,死亡组年龄(岁:76.71±12.21比73.21±14.49)、APACHEⅡ评分(分:24.69±9.58比13.91±8.41)、住院时间[d:12.0(4.0,28.0)比11.0(8.0,22.0)]、WBC(×109/L:10.29±5.82比8.89±3.98)、N(0.809±0.130比0.776±0.120)、乳酸[mmol/L:1.80(1.10,2.90)比1.30(0.90,2.49)]、hs-CRP[mg/L:50.94(19.21,97.13)比21.71 (6.39,54.40)和PCT[μg/L:0.74 (0.13,5.83)比0.08(0.05,0.59)]明显升高(P<0.05或P<0.01),淋巴细胞计数[×109/L:0.90(0.50,1.29)比1.05 (0.70,1.54)]、淋巴细胞比例(0.123±0.098比0.143±0.097)明显降低((P<0.01和P<0.05).淋巴细胞计数与N(r=-0.597,P=0.000)、hs-CRP(r=-0.298,P=0.000)、PCT(r=-0.304,P=0.000)和APACHEⅡ评分(r=-0.214,P=0.000)呈明显负相关,与淋巴细胞比例呈明显正相关(r=0.691,P=0.000),与WBC(r=0.082,P=0.0910),乳酸(r=0.073,P=0.132)无相关性.结论 淋巴细胞水平与脓毒症的严重程度相关,监测其水平变化可作为脓毒症患者病情评估及治疗效果的辅助指标之一.