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重甲基 SILAC 技术分析雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞组蛋白 H3甲基化的差异
目的:整体分析雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞组蛋白H3甲基化差异,探讨前列腺癌从激素依赖性发展为非激素依赖性的表观遗传机制。方法:应用重甲基细胞培养条件下氨基酸稳定同位素标记( SILAC)技术结合生物质谱分析雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP和非依赖性前列腺癌细胞DU145组蛋白H3的甲基化修饰谱,寻找差异的修饰位点和模式;通过Western blotting验证所发现的差异修饰;采用real-time PCR检测2株细胞相关甲基化酶和去甲基化酶的表达差异。结果:质谱鉴定发现2株前列腺癌细胞的组蛋白H3存在5个甲基化位点,甲基化模式分别为 H3K14me2、H3R17me1、H3K36me1、H3K36me2、H3K36me3、H3R72me2、H3K79me1和H3K79me2。其中,包含甲基化位点H3K36的肽段有2种,分别为“KSAPATGGVKKPHR”和“KSAPST-GGVKKPHR”,前者鉴定到的频数高于后者,两者的区别在于第31位的氨基酸分别为A与S,前者归属于组蛋白H3变异体H31T、H31和H32,主要出现在DU145细胞中,后者归属于组蛋白H3变异体H33,在LNCaP细胞中出现次数稍多;提示2株细胞可能表达不同的组蛋白H3变异体,从而导致甲基化模式的差异。 Western blotting检测发现H3K36的一甲基化和二甲基化在2株细胞间没有差异,而其在DU145细胞中的三甲基化程度显著高于LNCaP细胞。 Real-time PCR检测显示DU145细胞的H3K36去甲基化酶mRNA表达比LNCaP细胞有所降低。结论:组蛋白H3变异体和H3K36去甲基化酶的差异表达可能导致非激素依赖性前列腺癌细胞H3K36三甲基化增加,成为前列腺癌从激素依赖性发展为非激素依赖性的一种表观遗传转变。王启林,李瑞乾,金从国,赵斌,张国颖,白宇,雷永虹 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
人剪切修复基因XPD肝癌对人HepG2细胞中Rb和MAD2表达的影响
目的:探讨人剪切修复基因着色性干皮病D组基因(xeroderma pigmentosum group D,XPD)转染人肝癌HepG2细胞后视网膜母细胞瘤蛋白(retinoblastoma,Rb)和有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(mitotic arrest deficient 2,MAD2)表达的变化及对细胞增殖的影响.方法:将人工合成的pEGFP-N2-XPD重组质粒通过LipofectamineTM2000转染HepG2细胞.实验分为4组,分别为无转染HepG2细胞组(空白对照组)、脂质体转染HepG2细胞组(脂质体组)、空载质粒pEGFP-N2转染细胞组(N2组)和重组质粒pEGFP-N2-XPD转染细胞组(XPD组).分别用RT-PCR和Wesrn blotting法检测各组细胞中XPD、Rb及MAD2 mRNA和蛋白的表达量,用MTT法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组的细胞凋亡情况及细胞周期.结果:与其它3组相比,XPD组XPD mRNA及蛋白表达量明显升高(P<0.05),Rb mRNA及蛋白表达量明显升高(P<0.05),而MAD2 mRNA及蛋白表达量显著降低(P<0.05).XPD组细胞增殖活力显著降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.05).XPD组细胞停滞在G1期,难以进入S期.结论:XPD可以抑制MAD2的表达和肝癌细胞的增殖,促进Rb的表达.张庆燕,赵慧,罗文,张吉翔 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
丙戊酸对致死性烫伤大鼠心肌的保护作用及机制研究
目的 研究丙戊酸(VPA)对致死性烫伤大鼠心肌的保护作用及机制.方法 78只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假烫组(n=10)、假烫+VPA组(n=10)、烫伤组(n=29)、烫伤+VPA组(n=29)4组.采用80℃水浴浸泡背部15s、双下肢15s、腹部8s造成55%总体表面积(TBSA)Ⅲ度烫伤大鼠模型;假烫组用37℃水浴浸泡,部位和时间与烫伤组相同.烫伤(假烫)后即刻皮下注射VPA300 mg/kg或等体积生理盐水(作为对照).各组分别于烫伤后6h取5只大鼠腹主动脉血,测定血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平;然后处死动物取心肌组织,用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测心肌细胞中组蛋白乙酰化水平及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)活化水平;各组余下大鼠观察12h生存情况.结果 与假烫组相比,烫伤组大鼠伤后6h血浆CK-MB水平明显升高(U/L:5 438.0±413.6比2 881.0±324.8,P<0.05),心肌组蛋白3第9位乙酰化的赖氨酸(Ac-H3K9)水平明显降低(灰度值:0.55±0.18比1.00±0.20,P<0.05),心肌caspase-3活化水平明显增高(灰度值:1.75±0.25比1.00±0.18,P< 0.05);而给予VPA处理后能明显降低血浆CK-MB水平[(4018.0±388.3) U/L],明显升高心肌Ac-H3K9水平(灰度值:2.20±0.23),明显降低心肌caspase-3活化水平(灰度值:1.33±0.20),与烫伤组比较差异均有统计学意义(均P<0.05).Kaplan-Meier生存曲线分析发现,VPA能显著延长大鼠烫伤后存活时间,12h时大鼠存活率可由0升高至50%(P<0.05).结论 VPA能改善致死性烫伤休克大鼠心肌酶学指标并延长其存活时间,其机制可能与其对组蛋白去乙酰化酶及caspase-3的抑制作用有关.罗红敏,胡森,白慧颖,王海滨,杜明华,林志龙,马丽,王欢,吕艺 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
前列腺癌中KDM5C过表达可作为前列腺特异性抗原复发的预后指标
目前,表观基因调控能够触发前列腺癌的转移和引发雄激素非依赖性前列腺癌.组蛋白赖氨酸脱甲基酶(KDMs)是一种可以去除抑制和激活组蛋白标记的表观酶.KDM5家族成员能够去除组蛋白H3赖氨酸4的二甲基化(一种激活标记),致使它们成为下调肿瘤抑制的潜在成员,这表明它魏建国(摘译),许春伟(审校),Rohde M - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
比较表观基因组学方法来研究基因组调节功能
人类基因组测序产生了大量的基因信息,但是理解每个基因的功能的目标仍未实现.比较表观基因组学(comparative epigenomics)能进行DNA和组蛋白修饰的种间比较,对起调节作用的基因组序列进行标注,该方法能确定基因的作用.- 中国农业科技导报文章来源： 万方数据 -
Biochemical characterization of human peroxiredoxin 2, an antioxidative protein
Sheng Yan, Shaopei Chen, Zhendong Li, Haiying Wang, Tuxiong Huang, Xiaoning Wang, Jufang Wang - 生物化学与生物物理学报(英文版)文章来源： 万方数据 -
某部新兵唾液总蛋白、白蛋白、球蛋白浓度及A/G检测与分析
目的 检测与分析军人健康人群唾液总蛋白(TP)浓度、白蛋白(ALB)浓度、球蛋白(GLO)浓度以及白蛋白与球蛋白比值(A/G),建立我军健康人群参考标准,为后续研究军队特殊人员特殊口腔疾病特点及口腔健康状况提供参照,同时也可为临床诊断提供参考.方法 此次检测采用常规硫脲新试剂探针测定法,建立以APT为分子探针,运用固定波长同步荧光光谱分析测定唾液TP、ALB、GLO含量.结果 TP 3.00~ 5.90 g/L,平均浓度为(4.470±0.905) g/L.ALB 0.29 ~ 2.09 g/L,平均浓度为(1.517 ±0.418)g/L.GLO 0.01~4.01 g/L,平均浓度为(2.898±0.737) g/L.A/G平均比值为0.527.结论 唾液具有复杂的生化组成,口腔中的各种疾病皆可反映在唾液中,测定唾液中TP、ALB、GLO浓度以及A/G比值对某些口腔疾病的诊断参考和预后判断有一定意义.王军,李广文,张燕,程硕,王宇欣,李翠霞,艾玉,李刚 - 临床军医杂志文章来源： 万方数据 -
鼻咽癌复发的分子标志物Jab1和Akt1蛋白表达的差异
目的:通过筛查鼻咽癌病人复发组织与鼻咽癌初发组织分子标志物表达的差异,探讨差异表达的蛋白与鼻咽癌复发的关系,为干预鼻咽癌复发提供新的靶点.方法:免疫组织化学SABC法检测Jab1、p-STAT3、CHOP和Akt1在复发和初发病人鼻咽癌组织中的表达;Western blotting法检测鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2、CNE-2R和HONE1中Jab1和Akt1蛋白的表达.结果:复发病人鼻咽癌组织Jab1和Akt1核表达水平均高于初发鼻咽癌组织(P <0.05);Jab1和Akt1在CNE-1、CNE-2R和HONE1细胞中的表达高于在CNE-2细胞中的表达,电离辐射能促进CNE-1、CNE-2、CNE-2R和HONE1细胞中Jab1蛋白的表达.结论:复发病人鼻咽癌组织或辐射抗拒鼻咽癌细胞中Jab1和Akt1核表达均高于初发鼻咽癌组织或辐射相对敏感的鼻咽癌细胞;电离辐射促进鼻咽癌细胞中Jab1过表达.王春华,王苏美,徐韬,苏箔金,黄河澄,杨惠玲 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
肌钙蛋白T和CRP在急性心肌梗死中的应用价值
目的:探讨血清 C 反应蛋白(CRP)和心肌肌钙蛋白 T( cTnT)在诊治急性心肌梗死(AMI)患者中的临床应用价值和意义。方法选择67例 AMI 患者(观察组)、51例非心血管疾病患者(对照组)及健康体检人群56例(健康对照组),分别测定 CRP 和 cTnT 水平并进行比较。结果观察组 CRP 及 cTnT 检测阳性率分别为82%和84%,对照组分别为6%和0,健康对照组分别为5%和0,观察组与对照组和健康对照组比较有显著性差异( P 均﹤0.01),对照组与健康对照组比较无显著性差异(P ﹥0.05)。观察组 cTnT 与 CRP 水平显著正相关(r =0.982,P ﹤0.01)。观察组 CRP、cTnT 单独检测时,其敏感度、特异度分别为82%,90%和84%,100%;联合应用两者后其敏感度为88%,特异度91%。结论 cTnl 与 CRP 对 AMI的诊断及早期诊断具有重要的临床应用价值,值得临床推广应用。- 现代中西医结合杂志文章来源： 万方数据 -
沉默NANOG表达对人肝癌细胞HepG2中cyclin D1表达及细胞增殖的影响
目的:探讨RNA干扰沉默NANOG表达后对肝癌细胞HepG2中细胞周期素D1 (cyclin D1)表达及细胞增殖的影响.方法:将以NANOG基因为靶点的NANOG-siRNA瞬时转染肝癌细胞HepG2,real-time PCR和Western boltting检测NANOG、cyclin D1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期情况.结果:与mock组比较,转染NANOG-siRNA后,肝癌细胞HepG2中NANOG、cyclin D1mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05),进入G0/G1期的细胞比例增多(P<0.05).结论:沉默NANOG表达可引起肝癌细胞HepG2中cyclin D1的表达下降,导致细胞增殖能力下降.周嘉嘉,陈汝福,邓小耿,周雨,周泉波,张杰,伍耀豪,曾乐祥,邱荣林 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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