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rhTGF-β1对SD大鼠MSCs骨向分化的影响及机制研究
目的:通过观察重组人转化生长因子 β1(rhTGF-β1)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖和骨向分化能力的影响,以及对骨形态发生蛋白2(BMP-2)、Smad4及核心结合因子α1(Cbfa1)的作用,阐释其对MSCs骨向分化影响以及可能的作用机制.方法:用全骨髓贴壁法分离、纯化SD大鼠MSCs;用MTT法检测0、5、10、20、40、80和100 μg/L rhTGF-β1对MSCs增殖活性的影响;以碱性磷酸酶(ALP)活性及ALP染色阳性率确定rhTGF-β1的最佳促MSCs骨向分化浓度,并以该浓度对MSCs骨向分化进行干预.按是否添加经典成骨诱导液将实验分为:正常组、经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组.通过检测ALP、I型胶原、骨钙素表达和钙化结节的数目,评价各组骨向分化能力;通过检测BMP-2、Smad4和Cbfa1 mRNA的表达,评价各组促MSCs骨向分化的可能作用机制.结果:rhTGF-β1最佳促MSCs增殖浓度为10 μg/L,最佳促MSCs骨向分化浓度为5 μg/L.经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组均能促进MSCs骨向分化,刺激BMP-2分泌,并上调Smad4和Cbfa1 mRNA的表达,且rhTGF-β1对MSCs成骨分化的早期、中期效果好,而rhTGF-β1+经典组对MSCs成骨分化的晚期效果更为明显.结论:经典组、rhTGF-β1组和rhTGF-β1+经典组均有促MSCs骨向分化的作用,其机制可能是促进BMP-2的分泌,通过TGF-β超家族/Smads信号通路调控骨向分化.尹素娟,张荣华,朱晓峰,王攀攀,杨丽 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
瓦勒变性坐骨神经段对大鼠BMSCs向SCs分化的影响
目的:通过观察瓦勒变性坐骨神经段对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)增殖、分泌功能以及向施万细胞(Schwann cells,SCs)分化的影响,探讨其在BMSCs向SCs分化中的作用及可能的机制.方法:采用全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSCs,并采用免疫荧光法鉴定.应用Transwell建立坐骨神经段与BMSCs双层培养体系,将实验分为瓦勒变性坐骨神经段与BMSCs联合培养组(A组)、正常坐骨神经段与BMSCs联合培养组(B组)和BMSCs单独培养组(C组).倒置相差显微镜观察联合培养过程中BMSCs形态变化;免疫荧光染色检测联合培养第7天各组BMSCs表达S-100情况;联合培养第0、1、4、7、11、14天,利用细胞计数法绘制各组BMSCs生长曲线,ELISA法检测各组培养液上清中神经生长因子(nerve growth factor,NGF)含量,实时荧光定量PCR检测各组BMSCs中S-100 mRNA表达情况.结果:成功分离培养BMSCs,免疫荧光鉴定BMSCs呈CD29、CD44和CD90表达阳性.联合培养第7天倒置相差显微镜观察可见,A组BMSCs胞体回缩,呈梭形,并带有突起,形态类似SCs;B、C组大部分BMSCs形态无明显变化.联合培养第7天免疫荧光染色示,A、B、C组BMSCs S-100阳性表达率分别为31.1%±2.9%、16.2%±1.7%和0.42%±0.07%,A组阳性表达率明显增高(P<0.05).各组BMSCs生长曲线均近似"S"形,从第4天开始,A组BMSCs增殖速度明显快于B、C组(P<0.05);ELISA法检测示,A组NGF含量呈时间依赖性增加,于联合培养第7天达高峰,随后呈下降趋势.B、C组NGF含量随共培养时间延长有所增加,但显著低于A组(P<0.05);实时荧光定量PCR检测示,联合培养第4、7、11、14天,A组S-100 mRNA表达明显高于B、C组(P<0.05).结论:瓦勒变性坐骨神经段能有效促进大鼠BMSCs增殖并诱导BMSCs向SCs样细胞分化,联合培养过程中NGF可能参与BMSCs向SCs分化的调控.赵富生,武庚,武杨,金秀东,张际绯,李月珍 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
小鼠来源诱导多能干细胞定向分化为神经元的体外实验研究
目的:探讨源于小鼠的诱导多能干细胞( induced pluripotent stem cells , iPSCs)体外定向分化为神经元的方法,为大量稳定地获得神经元及提供种子细胞治疗脊髓损伤奠定体外实验基础。方法:源于小鼠的iPSCs在不同的诱导培养基中经悬浮、贴壁、再悬浮和再贴壁培养。免疫荧光检测iPSCs多能性标志物、神经干细胞及其分化细胞标志物的表达。 RT-PCR检测神经元及胶质细胞基因表达并行神经元基因测序鉴定,流式细胞术检测iP-SCs定向分化为神经干细胞及进一步分化为神经元的比例。结果:源于小鼠的iPSCs表达干细胞多能性标志物Sox2、Oct4和SSEA1。悬浮培养可以形成类球形拟胚体;经诱导及机械分离后的细胞可形成神经球,神经球经诱导后可分化为神经元。免疫荧光显示iPSCs可诱导出表达nestin的神经球,贴壁培养的神经球可分化为分别表达微管相关蛋白2(MAP-2)、胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)及髓磷脂碱性蛋白(MBP)的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。 RT-PCR及基因鉴定结果显示形成小鼠神经元;流式细胞术检测结果显示分化细胞中神经干细胞和神经元的比例分别为63.93%±1.47%和21.40%±1.70%。结论:源于小鼠的诱导多能干细胞能够稳定地在体外定向分化为神经元,为脊髓损伤的治疗提供了一个可靠的细胞来源。庞卯,杨阳,刘斌,张良明,戎利民 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
大豆苷元对人乳牙牙髓干细胞增殖和成骨分化的影响
目的 探讨大豆苷元对人乳牙牙髓干细胞(SHED)增殖和分化的影响.方法 对体外培养的第3代SHED用浓度分别为0.1、1、10、100 μM的大豆苷元培养基进行培养,采用MTT法检测细胞生长曲线,通过碱性磷酸酶(ALP)试剂盒、放免法和TGF-β1 Elisa试剂盒检测大豆苷元对SHED碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素(OCN)以及TGF-β1表达的影响.结果 0.1 μM的大豆苷元能够显著促进SHED的增殖,而高浓度(100μM)的大豆苷元则对SHED的增殖具有明显的抑制作用.大豆苷元剂量依赖性地促进了SHED ALP、OCN和TGF-β1的表达.结论 大豆苷元对SHED的增殖和成骨分化具有促进作用,其促成骨分化机制可能与增加TGF-β1表达有关.武斌,孟秋菊,谢春,黄谦,魏波,陈敏莹 - 昆明医科大学学报文章来源: 万方数据 -
Sox11 modulates neocortical development by regulating the proliferation and neuronal differentiation of cortical intermediate precursors
Yongzhe Li Jianjiao Wang Yongri Zheng Yan Zhao Mian Guo Yang Li Qiuli Bao Yu Zhang Lizhuang Yang Qingsong Li - 生物化学与生物物理学报(英文版)文章来源: 万方数据 -
滤泡辅助性T细胞及其与肝脏疾病关系研究进展
自身免疫性肝病的发病机制目前仍不清楚,这严重地影响了临床的诊治水平.人类滤泡辅助性T细胞(TFH)能够高表达趋化因子受体CXCR5及CD4分子,具有辅助B细胞分化为浆细胞进而产生抗体的功能.研究显示,该细胞与自身免疫疾病及传染病的发生和转归密切相关,本文针对TFH细胞及其与自身免疫性肝病及病毒性肝炎的关系进行综述.一、滤泡辅助性T(Tfh)细胞命名、表面标记及其分化和发育(一)细胞命名人类认识滤泡辅助CD4T细胞(Tfh)是在孙颖,李保森 - 肝脏文章来源: 万方数据 -
食管原发性未分化多形性肉瘤1例
患者女性,60岁,因无明显诱因反复出现吞咽梗阻感4年余,进食固体食物梗阻感加重入院.患者既往体健.胃镜检查示:食管黏膜光滑,距门齿30~35 cm见2.5 cm黏膜隆起,表面覆白苔,基底宽,质地韧,易出血.钡餐造影透视显示食管下段(第10~11胸椎水平)见一长44 mm充盈缺损,呈偏心性改变,表面可见小龛影,局部食管腔狭窄,黏膜破坏,钡剂通过稍受阻,缓慢,病灶近端食管扩张(图1).CT平扫示:食管中部下段见一40 mm*28 mm*15 mm大小肿块影,增强扫描可见轻度强化,CT值39~59 HU,周围食管壁界面清楚.临床诊断:食管下段平滑肌瘤,遂行经左胸食管肿瘤切除术.术中纵行切开食管下段肌层,于左下肺静脉黎美仁,王丽丽,徐晓,李婷,周燕 - 临床与实验病理学杂志文章来源: 万方数据 -
Hsa-miR-150过表达诱导弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-Ly10再分化
目的:探究hsa-miR-150过表达诱导弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-Ly10再分化的机制.方法:运用real-time PCR检测hsa-miR-150在永生化CD19+B细胞和OCI-Ly10细胞中的表达,利用Western blotting和免疫荧光细胞化学检测hsa-miR-150靶基因c-myb的表达;通过LipofectamineTM 2000脂质体法将含有重组慢病毒质粒的病毒上清转染OCI-Ly10细胞(Ly10-control组和Ly10-miR-150组);对新构建的细胞亚系,通过MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡;运用real-time PCR、免疫荧光细胞化学和Western blotting检测Ly10-control 和Ly10-miR-150的B细胞分化相关基因及c-Myb的表达;利用干扰片段干扰OCI-Ly10细胞c-myb表达后,运用real-time PCR和Western blotting检测干扰效率及干扰后转录调节因子BCL6和浆细胞分化开关蛋白PRDM1的表达.结果:(1)CD19+B淋巴细胞的hsa-miR-150表达量明显高于OCI-Ly10细胞(P<0.05);c-Myb在OCI-Ly10细胞中表达较强,而在CD19+B淋巴细胞表达较弱.(2)OCI-Ly10细胞经转染hsa-miR-150后,B细胞分化相关基因的表达都明显发生了变化,B细胞特异性激活蛋白(PAX5)和BCL6表达下调(P<0.05);干扰素调节因子4(IRF4)、PRDM1和X盒结合蛋白1(XBP1)的表达上调(P<0.05);和对照组相比,c-Myb在Ly10-miR-150细胞中表达明显下调(P<0.05).(3)干扰OCI-Ly10细胞c-myb表达后,BCL6表达明显下调,而PRDM1表达明显上调.结论:(1) hsa-miR-150过表达对OCI-Ly10细胞抑制增殖和诱导凋亡作用非常明显.(2)过表达hsa-miR-150可诱导该瘤细胞向末端B细胞方向分化,作用机制可能与下调其靶基因c-myb的表达有关.严金海,王志强,韩西群,陈少红,周新华,简文静,葛娟,赵彤 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
糖尿病大鼠肾脏组织中XBP-1 s和ADRP的表达
目的:探索糖尿病大鼠肾脏拼接型X盒子结合蛋白1(spliced X-box binding protein-1, XBP-1s)和脂肪分化相关蛋白( adipose differentiation related protein, ADRP)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及二者表达的相关性。方法腹腔注射STZ成功构建糖尿病大鼠模型,正常喂养2个月后,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠肾脏组织中XBP-1s和ADRP的表达。结果 XBP-1s和ADRP表达均定位于肾小管上皮细胞,对照大鼠相比,糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中XBP-1s和ADRP表达均显著增高,分别升高2.017倍和1.544倍,差异有统计学意义(t=2.648、2.741,P<0.05)。进一步行相关性分析显示:大鼠肾脏组织中XBP-1s表达增强往往伴随着ADRP的表达增强(相关系数为0.723,P<0.05)。结论 XBP-1s表达升高可能是导致糖尿病大鼠肾脏组织中ADRP上调的因素之一。朱琳,郝军,赵松,赵雪,陈宁,郑书深,段惠军 - 临床与实验病理学杂志文章来源: 万方数据 -
卵巢原发性子宫内膜间质肉瘤27例临床病理分析:形态学和生物学行为特征类似于子宫低级别子宫内膜间质肉瘤
原发性子宫外的子宫内膜间质肿瘤非常罕见,作者报道27例卵巢原发性子宫内膜间质肉瘤的临床病理特征.患者年龄38~76岁,平均56岁.20例为单侧卵巢病变,7例累及双侧卵巢.肿瘤直径1~20 cm,平均9.5 cm.实性区域切面呈典型的黄褐色,6例伴出血和(或)坏死,囊内常存留血性液体.镜检:肿瘤常表现的独特生长模式为小细胞弥漫性生长,小动脉散布其间.14例可见纤维瘤样结构,10例可见模糊的结节状结构,2例有席纹状结构,10例伴有玻璃样物质沉积,7例伴性索样分化,6例伴平滑肌分化,6例见泡沫细胞形成.肿瘤细胞轻度异型性,核分裂象1~17个/10Oliva E,Egger J F,Young R H,康锶鹏,余英豪 - 临床与实验病理学杂志文章来源: 万方数据

