-
枯草芽胞杆菌PTS-394的GFP标记及其定殖能力
为探明枯草芽胞杆菌PTS-394在番茄根围的定殖能力,采用电转化法获得绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)标记菌株PTS-GFP,构建其生长曲线,采用对峙生长法评价其室内抑菌活性,并应用抗生素平板回收结合激光扫描共聚焦显微镜观察标记菌株在番茄根围的定殖数量.结果显示:与原始菌株PTS-394相比,标记菌株PTS-GFP的生长、对青枯病菌和4种病原真菌的室内抑菌能力无明显差异.标记菌株PTS-GFP和青枯病菌菌液单独或混合处理番茄苗,灌根当天标记菌株初始菌量接近108CFU/g,处理3 d后种群数量迅速下降,约106CFU/g,随后缓慢下降,处理10d后种群数量约104CFU/g,处理30 d后,标记菌株仍然能被检测到,约20 CFU/g.表明枯草芽胞杆菌PTS-394在番茄根际土壤中具有一定的定殖能力.刘邮洲,梁雪杰,乔俊卿,张荣胜,陈志谊 - 植物保护学报文章来源： 万方数据 -
绿色荧光蛋白转基因小鼠不同源性间充质干细胞原代培养及生物学特性比较
目的:探讨绿色荧光蛋白转基因小鼠脐带和骨髓源性间充质干细胞( MSCs )的体外分离培养方法、生物学特性、表面标志及多向分化潜能。方法:应用Ⅱ型胶原酶消化培养法分离脐带MSCs及密度梯度离心法分离骨髓MSCs进行体外培养。在倒置显微镜下观察2种细胞的生长特点,运用生长曲线和MTT法检测其原代细胞增殖能力,台盼蓝法测定细胞传代成活率,采用流式细胞术测定2种第3代( P3)细胞DNA周期及表面标志物的表达,并比较其向成脂细胞和成骨细胞的分化潜能。结果:酶消化法分离培养的脐带MSCs 1 d后,细胞贴壁呈成纤维形,2 d后呈漩涡状生长且增殖明显,3 d后达80%融合即可传代;应用密度梯度离心法分离骨髓MSCs,体外培养4 d后,细胞贴壁呈圆形、梭形和多角形生长,5 d后呈克隆样生长且增殖明显,7 d后达80%融合即可传代。原代培养的脐带MSCs生长曲线近似“S”形,骨髓MSCs 生长曲线较平缓;MTT法显示脐带MSCs在3~5 d增殖较明显,骨髓MSCs 7 d后细胞增殖较明显。2种P3细胞传代成活率均为96%以上,G0/G1期细胞均为85%以上,无明显差异(P>0.05);2种P3细胞CD44、CD90和CD105阳性率均为(60.7±2.3)%以上高表达,CD45、CD19、CD14和CD79a均为(25.6±4.8)%低表达,两者无明显差异( P>0.05);2种MSCs在体外均具有向成骨细胞和成脂细胞分化的潜能,脐带MSCs向成骨及成脂细胞分化率均为90%以上,与骨髓MSCs的分化潜能比较有显著差异( P<0.05)。结论:脐带MSCs较骨髓MSCs具有较强的增殖能力及分化潜能。绿色荧光蛋白转基因小鼠的脐带MSCs可作为较好干细胞示踪的细胞源。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
绵羊肺炎支原体标准株Y98外膜蛋白MOP30基因真核表达载体的构建及其在烟草中的瞬时表达
以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma oumvipneoniae,MO)标准株Y98基因组为模板,设计1对特异引物,PCR扩增得到798bp的P30目的基因(MOP30),将其定向克隆到pMD19-T Simple载体中进行测序分析.重组质粒进行XbaⅠ/BamHⅠ双酶切并回收目的片段,将目的基因亚克隆入黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,YFP)表达载体pCAMBIA1300-YFP中构建重组融合表达质粒pCAMBIA1300-MOP30-YFP.双酶切验证后的融合表达质粒转化农杆菌(Agrobacterium)感受态细胞,侵染烟草(tobacco)叶片.通过激光共聚焦成像显微镜(cofocal imagingmicroscope)观察到融合表达的黄色荧光蛋白,Western-blotting试验得到57 000的特异条带,RT-PCR检测到MOP30基因在烟草叶片中转录.MOP30-YFP融合蛋白在烟草中的成功表达,为转基因植物疫苗防治绵羊支原体肺炎奠定了基础.张亚宁,赵利峰,张乐祎,赵宝华 - 中国兽医学报文章来源： 万方数据 -
实时控制FISH预处理中酶消化的操作
荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是通过荧光素标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交,在荧光显微镜下观察探针的杂交信号.在产前诊断、肿瘤遗传学等领域研究得到广泛应用.然而在FISH检测过程中,有多种因素(如组织标本的固定、切片厚度、酶的消化、杂交后洗涤)影响检测结果.其中影响最多的是蛋白酶的预处理,即蛋白酶的种类及消化时间[1-8].作者在实验中发现,控制消化时间固然重要,但掌握组织或细胞消化的程度徐明堂,赵焕芬,何春年,康林,张秀智,陈琛 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
前列腺癌中TMPRSS2-ERG融合基因和ERG蛋白表达及其意义
目的探讨前列腺癌(prostate cancer,PC)中TMPRSS2-ERG(T-E)融合基因和ERG蛋白表达及其与各临床病理参数和预后的关系.方法采用FISH和免疫组化技术分别检测145例PC穿刺标本中T-E融合基因和ERG蛋白的表达,以癌旁正常腺体为内对照.结果 145例PC中37例(25.5%)T-E融合基因阳性.T-E融合基因表达与患者年龄、术前血清PSA水平、Gleason评分、肿瘤有无远处转移和生存期均无相关性(P>0.05).PC中ERG蛋白阳性率为24.8%(36/145).ERG蛋白与术前血清PSA水平具有相关性(P<0.05);与患者年龄、Gleason评分、肿瘤有无远处转移和患者生存期均无相关性.结论T-E融合基因和ERG蛋白表达仅出现在PC中,而不出现于正常前列腺腺体,T-E融合基因和ERG蛋白可作为PC的特异性标志物.仅ERG蛋白表达与PSA水平相关,而T-E融合基因与临床病理参数和预后均无相关性.郭琦,余英豪 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
APP发布2012年第二季度"绿色承诺"报告
(APP消息)最新发布的《"绿色承诺,绿色发展"2012年第二季度报告》就引入比利时研究学者冈特鲍利提出的"蓝色经济"的理念,- 中华纸业文章来源： 万方数据 -
当前中国医疗建筑机能的可持续发展研究
相对于一般意义上的绿色建筑理念和技术应用,医疗建筑的可持续发展应更加关注医疗建筑机能的优化和改进,这将对医疗建筑的绿色节能和高效率运行起到更重要的作用.李辉 - 建筑学报文章来源： 万方数据 -
FISH技术在93例自然流产绒毛及胎儿组织中的应用
染色体异常包括胚胎染色异常和夫妇染色体异常,是自然流产最常见的原因,其中胚胎染色异常是导致自然流产发生的主要原因[1].采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对自然流产的绒毛及胎儿组织中的13、16、18、21、22、XY染色体数目异常进行检测,FISH具有成功率高、准确、省时,对检测标本限制低等优点[2].而如何确保FISH的制片质量尤为重要,本文着重介绍FISH技术操作在3种类型流产组织中的应用体会.1材料与方法1.1标本来源收集广州医科大学附属第三医院病理科诊刘少颜,杨嶽鑫,谭学贤,罗秋萍 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
东北寒区部队绿色营区评价指标体系研究
通过对东北寒区军营的实地调研,根据寒地营区的功能特征,构建了东寒地区绿色建设的评价指标体系,为建立寒区绿色营区评价模型奠定基础,从而指导寒区绿色军营建设,为寒区军营设计人员及相关职能部门提供参考,实现寒地营区的可持续目标.金虹,吴显慧,赵巍,吴鹄鹏 - 建筑学报文章来源： 万方数据 -
绿色建筑实施对策及发展机制研究-以曹妃甸新区·唐山湾生态城为例
从唐山湾生态城发展定位出发,通过城市规划设计、指标体系、能源规划、技术选择、体系建立、产业发展等方面的研究,总结生态城绿色建筑的发展机制和实施对策.吕霞,叶青,赵强,孙奎利 - 建筑学报文章来源： 万方数据
科创中国
