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移植BDNF和GDNF基因修饰的hMSCs对大鼠大脑中动脉阻塞的影响

目的:构建脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的非病毒表达载体,用脂质体法转染人骨髓间充质干细胞(hMSCs),观察其对大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型的影响,探索移植转基因修饰的hMSCs治疗脑血管疾病的可行性.方法:构建高效非病毒表达载体,用脂质体法转染获得高表达2种神经营养因子的hMSCs.建立大鼠MCAO模型,建模后24 h经股静脉进行转基因hMSCs移植,并以磷酸盐缓冲液(PBS)和hMSCs为对照.用脑梗死体积计算、体重变化、行为学评测等指标对大鼠脑损伤程度进行评估,通过大鼠脑组织观察和病理切片对脑组织损伤以及细胞的迁移分化情况进行分析.结果:经股静脉转基因hMSCs移植能够提高大鼠MCAO后的感觉运动功能,减小脑梗死体积,与PBS对照组相比有显著差异;与hMSCs治疗组相比,治疗效果较好且稳定.移植的细胞在脑损伤区域有少数存活但未见分化现象.结论:经静脉移植脂质体介导、GDNF和BDNF基因修饰的hMSCs,可促进缺血脑组织的损伤修复,效果较好,为非病毒载体在干细胞相关转基因治疗的应用提供了理论依据.本研究表明,MSCs的作用不依赖于细胞的分化和神经元的替换,而可能与其分泌细胞因子对抗脑损伤并促进神经修复有关,在MSCs中转入特定的外源性神经营养因子可加强这一作用.

钟慧霖,陈文明,李翠莹,王茜婷,张静远,兰丹,刘海霞,邹清雁 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

不同途径移植人脐带间充质干细胞对糖尿病大鼠视网膜病变的影响

目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对糖尿病(DM)大鼠血糖的影响及对视网膜病变的治疗作用.方法健康雄性Sprague-Dawley大鼠45只,随机分为正常对照组(A组)、DM组,分别为10、35只大鼠.DM组经尾静脉注射链脲佐菌素诱导DM模型.10周时,A组、DM组分别随机选取2只大鼠行视网膜血管铺片.DM组剩余的33只大鼠随机分为糖尿病视网膜病变组(B组)、尾静脉注射hUCMSC组(C组)、玻璃体腔注射hUCMSC组(D组),各组均为11只大鼠.A、B组不进行干预.干预后2、4、6、8周为观察处理时间点.各处理时间点前,连续3d每次随机选取2只大鼠检测随机血糖.DM组大鼠血糖与同期A组大鼠血糖比较,差异均有统计学意义(t=-64.400、-60.601、-44.065、-43.872,P=0.000).8周时从B、C、D组随机选取2只大鼠行视网膜血管铺片.免疫组织化学法观察视网膜脑源性神经营养因子(BDNF)阳性染色情况;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测视网膜BDNFmRNA相对表达量.结果干预后,不同处理时间点A、B、C、D组大鼠血糖比较,差异均有统计学意义(F=400.017、404.410、422.043、344.109,P=0.000);C组大鼠血糖与B、D组大鼠血糖比较,差异有统计学意义(t=4.447、4.990、P<0.01).免疫组织化学染色结果显示,A组BDNF表达呈阳性,主要分布在神经节细胞层;B组BDNF表达呈弱阳性;C、D组BDNF表达增多.RT-PCR检测结果显示,4、6、8周时,B、C、D组间视网膜BDNF mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(F=29.372、188.492、421.537,P=0.000);C、D组视网膜BDNF mRNA相对表达量与B组比较,差异均有统计学意义(t=66.781、72.401、63.880、88.423、75.120、83.002,P<0.01);C组视网膜BDNF mRNA相对表达量与D组比较,仅8周时差异有统计学意义(t=127.321,P=0.005).结论尾静脉注射hUCMSC能够显著降低大鼠血糖水平;尾静脉或玻璃体腔注射hUCMSC均可增加BDNF的表达.

毕雪,陈松,林锦镛,王玉川 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

神经营养素-3对慢性踝关节不稳修复术后本体感觉恢复的作用

目的观察外源性神经营养素(NT)-3对慢性踝关节不稳手术修复后本体感觉恢复的意义.方法制造Beagle犬慢性踝关节不稳动物模型并予手术修复外侧副韧带治疗,术后实验组动物手术部位NT-31周,分别于术后3、6个月对外侧副韧带组织进行氯化金染色光学显微镜检查和电生理检查(包括体感诱发电位和腓骨肌肌电图),评价韧带内神经结构的形态功能情况.结果慢性踝关节不稳外侧副韧带手术重建后,韧带内本体感受器较正常形态不典型,体积小;与对照组相比,NT-3治疗组韧带内本体感受器形态、体积更偏向于正常.实验组和对照组体感诱发电位和腓骨肌肌电图的潜伏期和波幅与正常组比较差异具有统计学意义,术后6个月时实验组与对照组之间差异具有统计学意义,实验组强于对照组(P<0.05).结论外源性NT-3可以促进慢性踝关节不稳手术治疗后本体感觉的恢复,从而有利于慢性踝关节不稳患者的康复,值得应用.

李彬,温昱 - 山西医药杂志

文章来源：万方数据

银杏叶提取物对视网膜Muller细胞血管内皮生长因子表达的影响

研究显示,糖尿病视网膜病变(DR)与血管内皮生长因子(VEGF)基因启动区的多态性有关.眼部VEGF主要由视网膜Muller细胞分泌,视网膜Muller细胞VEGF的生成和调节机制、阻止和逆转DR的发生发展一直是DR研究的热点.

楼继先,胡昕倩,张志勇,李韧,王美钗 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

西兰花多肽组分Ⅱ诱导神经胶质瘤细胞凋亡的作用及其机制研究

目的:探讨西兰花多肽组分II诱导胶质瘤细胞凋亡的作用及机制.方法:培养人神经胶质瘤SHG-44细胞,将其分为对照组以及3、10、30和100 mg/L西兰花多肽组分II组,MTT法检测西兰花多肽组分II作用后细胞活力的变化;Annexin V/PI检测细胞的凋亡率;倒置显微镜观察西兰花多肽组分II诱导细胞凋亡的形态学变化;免疫细胞化学和Western blotting法检测西兰花多肽组分II作用后Bax、Bcl-2蛋白表达,Western blotting法检测caspase-3蛋白表达.结果:西兰花多肽组分II作用SHG-44细胞24 h、48 h和72 h时均可以降低细胞活力,作用呈时间-剂量依赖性.Annexin V/PI检测细胞凋亡率发现,各用药组细胞凋亡率随着药物剂量的增加而显著升高.倒置显微镜下观察,西兰花多肽组分II作用SHG-44细胞72 h后,各用药组细胞的密度随药物浓度升高而明显降低,并可见到明显的凋亡小体.细胞免疫组织化学和Western blotting结果显示,药物作用SHG-44细胞72 h后,与对照组比较,细胞Bax蛋白表达呈上升趋势,Bcl-2蛋白表达呈下降趋势,各用药组Bax/Bcl-2比值均明显增加(P<0.05或P<0.01);Western blotting检测caspase-3蛋白发现,各药物组caspase-3蛋白表达量均增加,与空白对照组比较,30和100 mg/L西兰花多肽组分II组差异有统计学意义(P<0.01).结论:西兰花多肽组分II可提高神经胶质瘤细胞中Bax/Bcl-2蛋白的比值,促进caspase-3蛋白活化,从而诱导肿瘤细胞凋亡.

齐玲,徐俊杰,赵东海,韩磊,纪朋艳,王玮瑶,吕士杰 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

乳头状胶质神经元肿瘤3例临床病理学分析

目的:探讨乳头状胶质神经元肿瘤( papillary glioneuronal tumor, PGNT)的临床病理学特征、免疫表型及鉴别诊断。方法分析3例PGNT的临床表现、影像学、病理形态及免疫表型特征,并复习相关文献。结果本组中女性2例,男性1例,临床表现为头晕或慢性难治性癫痫,头部MRI检查显示左侧颞叶或右侧顶叶脑实质内囊性占位。镜下可见肿瘤由星形胶质细胞、少突样胶质细胞和神经节细胞及神经节样细胞构成,呈假乳头状排列,乳头中心为玻璃样变性的血管。免疫表型:星形胶质细胞GFAP阳性,少突样胶质细胞Olig-2阳性,神经节细胞Syn、NeuN阳性。结论 PGNT是一种新增的、少见的神经元-胶质混合性肿瘤,绝大多数呈良性经过,属WHOⅠ级,预后良好。熟悉其病理学特征有助于与其他具有乳头状结构的中枢神经系统肿瘤鉴别诊断。

张安莉,李恒,丁敏 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

小鼠脑梗死后小胶质细胞内Toll样受体9选择性上调

目的:观察脑梗死后Toll样受体9(TLR9)表达量及其在神经元和神经胶质细胞中的表达变化.方法:线栓法制备C57小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,90 min后再灌注.假手术组为对照.再灌注后6h、3d、7d和14 d处死动物(n=3),制备脑冠状位冰冻切片.免疫荧光染色观察TLR9表达量及其在神经元和神经胶质细胞中的表达变化.结果:梗死灶边缘区TLR9的表达量随时间增加,始终高于对侧及假手术组.病变全程偶见神经元胞内小点状TLR9,TLR9阳性率无时间、组间差异.激活态小胶质细胞聚集于梗死灶边缘区,胞内TLR9由散在小点状变为团块状粗颗粒样.TLR9阳性率随时间先升后降,始终高于对侧及假手术组.星形细胞和少突胶质细胞未见TLR9阳性染色.结论:脑梗死后,中枢定居细胞中神经元TLR9维持固有表达,仅小胶质细胞TLR9表达选择性上调,星形细胞及少突胶质细胞无TLR9表达.

纪原,杨碧莹,黄小雄,潘经锐,王鸿轩,王艺东 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

高呼气末正压在神经源性肺水肿机械通气中的作用

目的探讨高呼气末正压(PEEP)在神经源性肺水肿(NPE)机械通气中的作用,寻找改善预后的最佳机械通气策略.方法采用前瞻性研究方法,选择2010年1月至2013年8月广西中医药大学第一附属医院重症医学科120例NPE患者,按随机数字表法分为两组,每组60例.两组患者均针对原发病给予对症治疗和经鼻气管插管机械通气,普通PEEP组PEEP为3~ 10 cmH2O(1 cmH2O=0.098 kPa),高PEEP组PEEP为11~30 cmH2O,其余机械通气参数相同.对比两组治疗前及治疗后7d各临床指标及28 d病死率.结果高PEEP组28 d病死率明显低于普通PEEP组[25.0%(15/60)比65.0%(39/60),x2=6.465,P=0.011].两组治疗后各指标均明显改善,高PEEP组改善程度较普通PEEP组更明显,其中两组治疗后体温(℃:37.4±0.5比38.5±0.6)、呼吸频率(次/min:18.3±3.1比23.3±3.5)、心率(次/min 94.7±8.5比113.5±8.0)、白细胞计数[WBC(×109/L):12.5±2.1比17.1±1.7]、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分(分:15.6±3.2比19.8±3.7)、格拉斯哥昏迷评分[GCS(分):12.5±2.1比8.5±2.9]、胃肠功能评分(分:3.9±3.0比3.6±2.4)、氧合指数[PaO2/FiO2(mmHg,1 mmHg=0.133 kPa):196.5±45.1比134.1±22.3]、血肌酐[SCr(μmol/L):86.5±35.6比98.5±37.7]、总胆红素[TBil (μmol/L):39.7±23.5比41.5±16.2]、C-反应蛋白[CRP(mmol/L):53.7±21.4比108.4±26.3]、凝血酶原时间[PT(s) 15.0±2.1比20.4±2.2]、活化部分凝血活酶时间[APTT(s) 37.3±4.9比56.7±13.6]、国际标准化比值(INR 2.52±0.65比4.01±0.77)、血管外肺水指数[EVLWI(mL/kg):7.53±1.21比15.85±3.41]、肺血管通透性指数(PVPI:6.07±0.89比9.47±1.26)、平均动脉压[MAP (mmHg):87.3±10.9比98.7±13.6]、心排血量[CO(L/min) 7.15±1.42比5.65±1.82]、体循环阻力指数[SVRI (KP):112.4±9.5比136.5±11.9]、动脉血乳酸(mmol/L 2.53±1.23比5.81±2.17)比较差异均有统计学意义(P< 0.05或P<0.01).结论在NPE患者机械通气中采用高PEEP通气可以改善患者氧合,降低28 d病死率.

马春林,梁道业,郑福奎 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

Muller细胞生理功能及其在糖尿病视网膜病变中的变化

Muller细胞接触并包裹视网膜神经元细胞体和突触,对视网膜神经元的功能及代谢起到支持作用;对维护视网膜细胞外环境的稳定,如离子、水平衡和血视网膜屏障(BRB)等具有重要调控作用;可释放神经胶质递质和刺激性神经物质,通过对神经递质的再吸收循环,为视网膜神经元提供神经递质前体进而影响神经突触的活性.此外,Muller细胞对病理刺激能够产生反应.该反应一方面具有视网膜神经元保护作用,如分泌神经营养因子、吸收降解兴奋性毒素、分泌抗氧化剂等,另一方面也可引起视网膜神经元谷氨酸盐代谢紊乱和离子平衡紊乱,导致视网膜水肿和神经元变性损伤.Muller细胞对糖尿病视网膜病变(DR)的发生发展具有重要影响.DR可引起Muller细胞增生,除造成谷氨酸盐代谢紊乱外,还会引起Muller细胞大量分泌炎症介质和血管内皮生长因子等破坏BRB.深入研究Muller细胞,对探讨DR的发病及防治具有重要意义.针对Muller细胞靶向转染的腺病毒载体研制成功,利用两亲肽携带蛋白或抗体直接转染细胞达到抑制DR的效果,这些方法为早期防治DR提供了新的途径.

王帅,吴强 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

辅酶Q10与美满霉素联合干预1-甲基-4-苯基吡啶诱导的偏侧帕金森病大鼠模型研究

目的:探讨辅酶Q10与美满霉素联合干预1-甲基-4-苯基吡啶( MPP+)帕金森病模型大鼠的效果。方法:采用MPP+黑质内注射建立帕金森病大鼠模型。小胶质细胞活化的程度用OX-42(小胶质细胞标志物)的免疫荧光强度测定。多巴胺能神经元由酪氨酸羟化酶( TH)阳性神经元的数目确定。大鼠行为学通过阿朴吗啡诱导的旋转行为、前肢跨步运动实验和触须引发的不对称放置实验进行评价。结果:辅酶Q10造模前给药与美满霉素造模后给药均可部分减轻MPP+诱导的帕金森模型鼠行为学缺陷,两者联合给药的效果优于任何一种单一给药方式(均P<0.01),免疫组化分析表明,TH阳性神经元数量在联合给药组中较美满霉素干预组(P<0.01)及辅酶Q10干预组(P<0.01)均显著增多。结论:美满霉素与辅酶Q10联合给药较任何一种单一给药方式对MPP+帕金森病大鼠模型具有更好的神经保护作用,这种针对帕金森病发病过程中不同的病理环节所采取的联合给药方式可能对该病的治疗提供新的思路。

高俊鹏,周子懿,向军,陈依萍,蔡定芳 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据