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孕酮对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、TLR4、CD14和MD2的影响

先分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,经差速贴壁法纯化后,随机分为6组:空白对照组、0.5mg/L脂多糖(LPS)组、10-6 mol/L孕酮(P4)组、LPS+10-5 mol/L P4组、LPS+10-6 mol/L P4组、LPS+10-7 mol/L P4组.各组在处理12、24h分别提取上清液,ELISA法测TNF-α和IL-1β的含量;各组在处理24h分别提取细胞总RNA,用RT-PCR法测TLR4、CD14、MD2mRNA的表达.结果显示,处理12、24h,0.5mg/L LPS组TNF-α和IL-1β的含量均极显著高于对照组(P0.05);LPS+10-5 mol/L P4组极显著低于对照组(P0.05),IL-1β的表达差异显著(P

曹荣峰,崔晓妮,张乃生 - 中国兽医学报

文章来源：万方数据

生理状态下大鼠大网膜Ⅰ型与Ⅱ型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞数量对比研究

目的对比研究生理状态下大鼠大网膜I型与II型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞的数量.方法 SD大鼠大网膜铺片,CD68、CD163双重标记,免疫荧光显微镜下观察计数CD68、CD163阳性巨噬细胞,对比分析I型与II型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞的数量.结果 I型与II型乳斑内均可见CD68阳性、CD163阳性巨噬细胞;I型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞数量比较差异无统计学意义(P﹥0.05);II型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞数量对比差异无统计学意义(P﹥0.05);I型与II型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞的数量基本相同.结论生理状态下大鼠大网膜I型与II型乳斑内均存在CD68、CD163阳性巨噬细胞;均存在巨噬细胞的极化分型,主要以M2型巨噬细胞的形式存在,推断乳斑具有发挥降低炎症反应,发挥组织修复的功能.

刘志,黄允宁 - 宁夏医学杂志

文章来源：万方数据

MicroRNA-132转染对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的作用

目的:探讨转染微小RNA-132(miR-132)对肺泡巨噬细胞炎症反应的作用。方法:将体外去致热源培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为空白对照组、阴性对照组和转染组,分别采用miR-132增敏剂、错义链和PBS作用。转染24 h后,CCK-8法检测细胞増殖;实时荧光定量PCR检测细胞中miR-132的表达;用脂多糖( LPS)作用细胞后,凝胶电泳迁移率实验( EMSA )检测细胞中NF-κB活性;Western blotting法检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。结果:与空白对照组和阴性对照组相比较,转染组细胞中miR-132的表达明显升高;转染组细胞増殖被明显抑制,与空白对照组相比较,差异有统计学意义( P<0.05);LPS作用后,转染组NF-κB、TNF-α和IL-6表达量显著下降,与空白对照组和阴性对照组相比较,差异均有统计学意义( P <0.05)。结论:转染miR-132可抑制NR8383细胞増殖,并抑制LPS诱导的NR8383细胞的炎症反应。

蓝琳友,洪溪屏,蔡元晖 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

脂多糖通过PI3彰Akt/mToR通路调控巨噬细胞自噬

目的:观察脂多糖对巨噬细胞自噬活化的影响及相关信号通路的探讨.方法:体外培养巨噬细胞株RAW264.7,分为对照组、饥饿状态激活自噬组、单纯脂多糖(LPS)刺激组、LPS+P13K抑制剂(hVps34)组和LPS+roTOR抑制剂(雷帕霉素)组.构建荧光真核表达载体pcDNA3.1.GFP-LC3,转染巨噬细胞,通过荧光显微镜观察各组细胞中自噬体形成情况.qRT.PCR方法检测各组中与细胞自噬相关的Atg5、Atg7、LC3一II和Bnip3mRNA表达水平的改变.利用Westernblotting检测LC3-II、P-Akt和p-roTOR蛋白在各组中的表达情况,以评价LPS激活巨噬细胞自噬的分子通路.结果:成功构建稳定表达GFP.LC3的巨噬细胞,在荧光显微镜下可以观察到自噬在饥饿状态组、LPS+hVps34组和U玛+雷帕霉素组均有明显增强;qRT-PCR检测到Atg5、LC3-II和Bnip3mRNA的表达在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组均有明显增强,而在LPS组中略微下降;Westernblotting检测发现p-Akt在饥饿状态组、LPS组和LPS+雷帕霉素组中表达明显升高;p-mTOR在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组表达明显下降;LC3-II的表达在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组中表达要高于对照组和LPS组.结论:LPS参与巨噬细胞自噬的调控,其可能的信号通路为P13K/Akt/mTOR通路,但仍存在其它有效的调控通路.

杜涛,黄海,陈欣,丁红,张睿,刘梅兰,陈慧 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

重组人粒细胞巨噬细胞刺激因子致过敏性休克1例

1病例资料患者,女,62岁,左侧颈部无痛性包块2周.于2012年4月12日收住院.既往身体健康,无药物、食物过敏史.体检:T 36.2℃,P 90次/min,R 22次/min,BP 110/80 mmHg.发育正常,检查合作,神志清楚,全身皮肤及巩膜无黄染,全身浅表淋巴结无肿大,无突眼,左侧甲状腺可触及,可随吞咽上下移动.甲状腺彩色多普勒提示甲状腺左侧叶囊实性混

邹俊荣,徐翔 - 中国药师

文章来源：万方数据

经典及替代途径激活巨噬细胞在视网膜新生血管中的作用

巨噬细胞(Mf)是非特异性免疫反应的主要效应细胞,分为经典途径激活Mf(M1型)和替代途径激活Mf(M2型).Mf通过表达细胞外因子蛋白调控血管生成、融合尖端细胞协助血管网形成、改变细胞外基质成分协助血管网构建,从而参与新生血管的形成过程.视网膜新生血管是缺血、缺氧性视网膜病变共有的病理改变,其形成过程涉及到多种细胞因子和调节机制.Mf通过联络和(或)上调各促血管形成因子,发挥促血管生成的作用;Mf激活和极化与新生血管形成过程中的多种分子和细胞功能变化紧密相关.针对Mf的作用机制以及型别调控药物的深入探究,将为视网膜新生血管疾病的治疗寻找到更多的治疗靶点并开发出新型治疗手段.

朱艳吉,沈玺,钟一声,谢冰 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

亚低温对脂多糖诱导巨噬细胞Toll样受体4 mRNA转录及炎症平衡的影响

目的探讨亚低温对脂多糖(LPS)刺激下巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA转录及下游炎症平衡的影响.方法实验用RAW264.7小鼠巨噬细胞株,将细胞分别置于37 ℃和32℃的温育箱中培养,干预组加入10 ng/mL LPS进行刺激,对照组加入等量生理盐水.分别于培养2、8、24h取细胞上清液检测白细胞介素(IL-1β、IL-10)水平;用TRIzol提取细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4 mRNA的转录水平.结果 LPS刺激下,常温组和亚低温组TLR4 mRNA表达水平均呈先升高、后降低的趋势(均P< 0.001);同一时间点,亚低温组TLR4 mRNA表达水平(2-AAC)均明显低于常温组(2 h:9.19 ±0.57比10.08±1.02,t=-2.285,P=0.036;8 h:13.58±1.57比15.24±1.63,t=-2.201,P=0.042;24 h:6.85±1.17比8.17±1.21,t=2.353,P=0.032).LPS刺激下,常温组和亚低温组随时间延长IL-1β、IL-10均逐步增高(均P<0.001);同一时间点,亚低温组IL-1β(ng/L)明显低于常温组(2 h:87.08±29.35比110.53±26.58,t=1.777,P=0.047;8 h:119.19±49.14比173.25±37.21,t=2.631,P=0.018;24 h:208.66±53.83比346.56±64.30,f =4.933,P<0.001);IL-10(ng/L)明显高于常温组(8 h:170.01±24.90比140.02±15.08,t=-3.091,P=0.007;24 h:423.10±52.40比165.06±31.97,t=-12.611,P<0.001).随着LPS刺激时间的延长,常温组IL-1B/IL-10比值逐渐升高(F=20.003,P<0.001),亚低温组IL-1 β/IL-10比值则逐渐降低(F=1.811,P=0.185);同一时间点,亚低温组IL-1WIL-10比值明显低于常温组(2h:0.740±0.214比0.993±0.256,t=2.275,P=0.037;8 h:0.701±0.363比1.237±0.455,t=2.763,P=0.014;24 h:0.493±0.292比2.099±0.428,t=9.299,P<0.001).结论亚低温可以降低LPS刺激下巨噬细胞TLR4 mRNA的转录水平,相对降低IL-1β水平,但保留了更高水平的IL-10,使炎症平衡向抗炎方向发展.

汪首振,汤展宏,胡军涛,蒋良艳,尹祥 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

微小RNA-132在脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应中的表达变化

目的观察脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应后微小RNA-132(miR-132)的动态变化,以初步探讨miR-132在肺泡巨噬细胞炎症反应中的作用.方法将体外去致热源培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为空白对照组和以终浓度1 mg/LLPS刺激3、6、12及24 h组,分别收集各时间点上清液及细胞,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中炎症因子肿瘤坏死因子-cα (TNF-α)、白细胞介素(IL-1β和IL-6)的含量,采用实时定量聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR-132的表达.结果与空白对照组相比,LPS刺激大鼠肺泡巨噬细胞后3h上清液中TNF-α含量(ng/L:364.83±46.29比34.07±8.62,P<0.01)、IL-1β含量(ng/L:153.83±43.67比32.33±10.62,P<0.05)、IL-6含量(ng/L:183.85±43.52比42.62±11.21,P<0.05)即明显升高,随时间延长均逐渐升高至12h达峰值(TNF-α:605.09±57.13,IL-1β:377.09±28.55,IL-6:558.04±77.45,均P<0.01),24 h时均有所下降(TNF-α:281.95±41.61,IL-1β:263.17±51.36,IL-6:438.74±79.94),但仍显著高于空白对照组(均P<0.01).LPS刺激后3 h,miR-132表达水平较空白对照组上调了(1.12±0.11)倍(P=0.995),6、12、24h miR-132表达较空白对照组分别上调了(5.98±0.65)、(7.64±0.53)和(8.92±0.83)倍(均P<0.01).结论 LPS诱导大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应后,miR-132表达随时间延长逐步上调,其可能参与调控大鼠肺泡巨噬细胞炎症反应.

刘芬,江榕,李勇,曾振国,赵宁,夏亮,聂成,钱克俭 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

形态学指标测量与人脾破裂损伤时间推断的观察

目的观察人脾破裂和大鼠脾锐器创损伤后不同时间形态学指标的变化,寻求推断损伤时间的形态学方法和分子指标.方法选取118例外伤性脾破裂标本,按破裂损伤时间分为10组;建立大鼠脾锐器创模型.HE染色后分别观察人和大鼠脾破裂损伤中央区、纤维素渗出带和损伤外周区的组织形态学变化;采用免疫组化和图像分析法检测人脾破裂损伤中央区、纤维素渗出带和损伤外周区MPO、CD68、α-SMA阳性细胞的数量变化.结果脾破裂损伤组织形态学变化经历炎症期、增生期、肉芽组织及瘢痕组织形成期.免疫组化标记示MPO阳性细胞数在脾伤后6~12h开始升高,12~24 h阳性细胞数最多,随后逐渐下降,0~5天相邻各损伤组之间比较差异均有统计学意义(P <0.05);CD68阳性细胞数在伤后12~24 h开始升高,第7天阳性细胞数最高,之后开始下降,12 ~24 h以后相邻各损伤组之间比较差异均有统计学意义(P <0.05);α-SMA在损伤24 h之内无阳性表达,第2天开始出现少量表达,随后依次升高,损伤24 h后各损伤组之间差异均有统计学意义(P<0.05).结论 MPO、CD68及α-SMA在脾破裂损伤后组织中表达呈时序性改变;多指标综合应用结合脾破裂组织形态学改变有望更加精确推断人脾破裂损伤时间.

万阳,孟刚,杨苗苗,陈林,赵元峰 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

rhGM-CSF凝胶对LEEP治疗宫颈上皮内瘤变创面愈合的影响

目的研究外用重组人粒细胞-巨噬细胞刺激因子(recombinant human granulocyte/macrophage colony-stimulating factor,rhGM-CSF)凝胶对子宫颈电热圈环切术(LEEP)治疗宫颈上皮内瘤变(CIN)术后创口愈合的影响.方法选择CIN患者124例,分为治疗组(73例)和对照组(51例),均用LEEP治疗,术后创口分别敷用rhGM-CSF凝胶和无菌纱布,观察两组创面愈合情况(阴道出血时间和出血量、创面止血结痂初步愈合时间)、疗效、并发症发生率,并统计分析数据.结果治疗组和对照组阴道出血持续时间≤2周、2~3周、3~5周和>5周的发生率分别为93.15%和23.52%、5.48%和41.18%、1.37%和17.39%、0.00%和13.73%,两组患者阴道出血量≤20 ml、21 ~49 ml和>50 ml的发生率分别为91.78%和27.45%、8.22%和62.75%、0.00%和9.80%,两组患者创面愈合平均时间分别为(8.1±2.4)d和(17.7±3.5)d,差异均有统计学意义(P<0.05);6个月后随访,两组有效率分别为98.63%和86.27%(P<0.05);两组并发症发生率分别为1.37%和13.73% (P<0.05).结论 rhGM-CSF可促进LEEP刀治疗CIN术后创面的愈合,减少并发症的发生率.

郑洁,朱珍珍,虞如芬 - 药学实践杂志

文章来源：万方数据