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活性氧在多能干细胞中的作用
多能干细胞是具有自我更新能力和能向体内多种细胞分化的一类细胞群体.活性氧(reactive oxy gen species,ROS)是反应活性极强的代谢分子.虽然过多的ROS会对干细胞产生毒性,引起干细胞的衰老和凋亡,但是ROS的调节在维持干细胞的干性和分化中起重要作用.ROS在不同的干细胞中发挥的作用也不尽相同.深入了解ROS如何调控干细胞的功能将有助于加强干细胞在转化医学方面的应用.本文将以胚胎干细胞和诱导性多能干细胞为主,对近年来ROS调节多能干细胞功能的研究进行简要综述.徐洁,刘俊许,康雪玲,蒋丽,周忠伟,陈思锋,孟丹 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
小鼠来源诱导多能干细胞定向分化为神经元的体外实验研究
目的:探讨源于小鼠的诱导多能干细胞( induced pluripotent stem cells , iPSCs)体外定向分化为神经元的方法,为大量稳定地获得神经元及提供种子细胞治疗脊髓损伤奠定体外实验基础。方法:源于小鼠的iPSCs在不同的诱导培养基中经悬浮、贴壁、再悬浮和再贴壁培养。免疫荧光检测iPSCs多能性标志物、神经干细胞及其分化细胞标志物的表达。 RT-PCR检测神经元及胶质细胞基因表达并行神经元基因测序鉴定,流式细胞术检测iP-SCs定向分化为神经干细胞及进一步分化为神经元的比例。结果:源于小鼠的iPSCs表达干细胞多能性标志物Sox2、Oct4和SSEA1。悬浮培养可以形成类球形拟胚体;经诱导及机械分离后的细胞可形成神经球,神经球经诱导后可分化为神经元。免疫荧光显示iPSCs可诱导出表达nestin的神经球,贴壁培养的神经球可分化为分别表达微管相关蛋白2(MAP-2)、胶质细胞原纤维酸性蛋白(GFAP)及髓磷脂碱性蛋白(MBP)的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。 RT-PCR及基因鉴定结果显示形成小鼠神经元;流式细胞术检测结果显示分化细胞中神经干细胞和神经元的比例分别为63.93%±1.47%和21.40%±1.70%。结论:源于小鼠的诱导多能干细胞能够稳定地在体外定向分化为神经元,为脊髓损伤的治疗提供了一个可靠的细胞来源。庞卯,杨阳,刘斌,张良明,戎利民 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
日本科学家用诱导能干细胞(iPS细胞)培育出癌症干细胞
据新华社东京4月13日电,日本冈山大学教授妹尾昌治领导的研究小组13日在美国《科学公共图书馆·综合卷》上报告,他们先用小鼠细胞培育出诱导多能干细胞(iPS细胞),然后向培养液中添加曾培育过肺癌、皮肤癌等癌细胞的液体,4周后将其中未分化的iPS细胞移植到小鼠皮下.结果显示,小鼠全部患上了癌症,且部分癌细胞不断分化,甚至有一些向肺转移.此结果提示,所使用的未分化的iPS细胞就是癌症干细胞.- 生物学教学文章来源： 万方数据 -
人骨髓间充质干细胞体外不同分离与培养方法的比较
目的 探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)理想的分离、培养方法.方法 采用密度梯度离心法和全骨髓贴壁法分离培养人骨髓干细胞,并将其分别置于普通培养瓶、60Co培养瓶中培养,应用倒置显微镜和免疫组化法观察和鉴定骨髓间充质干细胞;流式细胞术检测细胞表面标志.结果 人骨髓干细胞呈均一梭形、成纤维细胞样,形成集落样生长.60Co培养瓶细胞贴壁情况明显好于普通培养瓶,且费用低;免疫组化及流式细胞术显示CD34、CD45表达为阴性,CD29、CD44表达为阳性.60Co照射处理的培养瓶结合采用全骨髓贴壁法分离培养法获得的骨髓干细胞活性高,增殖力强,克隆形成早,传代时间短.结论 全骨髓贴壁法和密度梯度离心法均可获得高纯度贴壁生长的骨髓干细胞,其中60Co照射处理的培养瓶结合采用全骨髓贴壁法分离培养简单易行,骨髓干细胞增殖快,活性好,传代力持久.可以收获大量、高纯度的MSCs;本实验为MSCs进一步的研究与临床应用提供了实验方法及依据.刘贤华,仝青英,白晓东 - 武警医学文章来源： 万方数据 -
移植BDNF和GDNF基因修饰的hMSCs对大鼠大脑中动脉阻塞的影响
目的:构建脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的非病毒表达载体,用脂质体法转染人骨髓间充质干细胞(hMSCs),观察其对大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型的影响,探索移植转基因修饰的hMSCs治疗脑血管疾病的可行性.方法:构建高效非病毒表达载体,用脂质体法转染获得高表达2种神经营养因子的hMSCs.建立大鼠MCAO模型,建模后24 h经股静脉进行转基因hMSCs移植,并以磷酸盐缓冲液(PBS)和hMSCs为对照.用脑梗死体积计算、体重变化、行为学评测等指标对大鼠脑损伤程度进行评估,通过大鼠脑组织观察和病理切片对脑组织损伤以及细胞的迁移分化情况进行分析.结果:经股静脉转基因hMSCs移植能够提高大鼠MCAO后的感觉运动功能,减小脑梗死体积,与PBS对照组相比有显著差异;与hMSCs治疗组相比,治疗效果较好且稳定.移植的细胞在脑损伤区域有少数存活但未见分化现象.结论:经静脉移植脂质体介导、GDNF和BDNF基因修饰的hMSCs,可促进缺血脑组织的损伤修复,效果较好,为非病毒载体在干细胞相关转基因治疗的应用提供了理论依据.本研究表明,MSCs的作用不依赖于细胞的分化和神经元的替换,而可能与其分泌细胞因子对抗脑损伤并促进神经修复有关,在MSCs中转入特定的外源性神经营养因子可加强这一作用.钟慧霖,陈文明,李翠莹,王茜婷,张静远,兰丹,刘海霞,邹清雁 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
原发性肝细胞癌中干细胞标志物的表达与上皮细胞-间质转化的关系
目的 探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中肝干细胞标志物的表达及其与上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系.方法 采用免疫组化法检测72例HCC中肝干细胞标志物CK19、EpCAM、CD133、CD90的表达及其与EMT相关蛋白E-cadherin、vimentin和Snail的关系.结果 HCC组织中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率分别为31.9%(23/72)、40.3% (29/72)、51.4% (37/72)、41.7%(30/72),有镜下癌栓和门静脉癌栓组中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率均高于无镜下癌栓和无门静脉癌栓组,Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤数目多发的HCC中EpCAM、CD133、CD90阳性率高于Ⅰ+Ⅱ期和单发的HCC;<46岁、组织学Ⅲ+Ⅳ级、血清AFP≥350 ng/ml的HCC中CK19阳性率高于其相应对照组.E-cadherin与其余两种EMT标志物均呈负相关(vimentin:r=-0.572,P=0.004;Snail:r=-0.597,P=0.003),CK19、Ep-CAM、CD90阳性HCC组中vimentin阳性强度均高于阴性组,CD133阳性HCC组中E-cadherin阳性强度低于CD133阴性组,vimentin、Snail阳性强度均高于CD133阴性组.结论 与CK19、EpCAM、CD90相比,CD133阳性的肝癌干细胞与EMT的关系更加密切,CD133可作为同时针对HCC肝干细胞和EMT的治疗靶点.徐军,胡勇,王健,王星星,程兰兰,余宏宇 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
miR-193通过细胞周期相关蛋白调控大鼠骨髓间充质干细胞的增殖能力
目的:探讨microRNA-193( miR-193)对大鼠骨髓间充质干细胞( bone marrow mesenchymal stem cells,MSCs)增殖和凋亡的影响,并进一步分析miR-193影响MSCs增殖的可能机制。方法:体外培养大鼠MSCs,分别转染miR-193片段或其抑制剂到MSCs。采用MTS法、BrdU细胞增殖比色法和Ki-67免疫染色法检测细胞增殖,AnnexinV/PI双染流式细胞术分析细胞凋亡,qRT-PCR检测miR-193对细胞周期相关蛋白表达的调控。结果:(1) siPORT NeoFX Transfection Agent 转染miR-193到MSCs 能有效调控MSCs中miR-193的表达水平。(2)过表达miR-193能显著促进MSCs 的增殖(P<0.05),而抑制miR-193能显著降低MSCs 的增殖(P<0.05)。(3) miR-193对MSCs的凋亡无明显影响( P>0.05)。(4) qRT-PCR结果显示miR-193能调控细胞周期蛋白依赖性激酶2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)的表达水平(P<0.01)。结论:miR-193具有促进MSCs增殖的作用,并且可能是通过增强CDK2的表达来实现的。毛晨熙,陆地,孙成超 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
重视系统性淀粉样变性的诊断和治疗
系统性淀粉样变性是一类疾病的总称,临床上以免疫球蛋白轻链型淀粉样变性(AL型)最为常见,占淀粉样变性的80%以上.AL型淀粉样变性好发于老年人,中位诊断年龄约62岁,随着我国人口老龄化和环境致病因素的加剧,AL型淀粉样变性的发病率也呈现出逐年升高的趋势.笔者所在单位1979年~2002年的13 519例肾活检结果显示淀粉样变性占肾活检总数的0,5%,而近年来AL型淀粉样变性已占肾活检总数的2%左右.国外资料表刘志红,黄湘华 - 肾脏病与透析肾移植杂志文章来源： 万方数据 -
骨组织工程种子细胞研究进展
近年来,随着创伤领域各种新的治疗方法的涌现和各种先进理念的不断完善,使创伤导致的骨折得到了更合理地治疗,也使骨缺损的发病率明显下降,但是骨缺损的治疗仍是国际骨科学领域的一个难题.随着骨组织工程的迅速发展,杨杜明,李福兵,唐辉,闻一新,刘华,徐永清 - 西南国防医药文章来源： 万方数据 -
微RNA-34 a与乳腺癌相关信号通路
据卫生部疾病预防控制中心发布的乳腺癌发病数据显示:全国肿瘤登记地区乳腺癌发病率位居女性恶性肿瘤的第1位[1].近20年来,全球乳腺癌病死率呈现出下降趋势,一方面是因为乳腺癌筛查工作的开展,使早期病例的比例增加,另一方面是乳腺癌综合治疗的开展,提高了疗效.随着微RNA-34a(miR-34a)在乳腺癌中的相对特异性表达被越来越多的学者认识,其作用机制也成为近年的研究热点,而信号通路在其中占有重要解永松,贾淞淦,李连宏 - 中华乳腺病杂志(电子版)文章来源： 万方数据
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