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一株产纤维素酶细菌的分离鉴定及其酶学特性研究

采用CMC平板筛选和刚果红染色等方法,从湖南科技大学校园腐烂木芙蓉根部土壤中分离1株产纤维素酶菌株CXB001,经生理生化测试、16SrDNA分子进化树分析,鉴定菌株为Bacillus velezensis.对该菌株的生物特性研究表明,其最适生长温度为37℃,在10~ 50 ℃,pH5.0 ~11.0中能生长,在pH 6.0~9.0,34~40℃,1.5% ~3.5% NaC1的培养条件下,最适产酶.CXB001所产纤维素酶最适反应温度为50℃,最适反应pH为5.0;在20℃、pH 5.0~7.0具有较好的稳定性.Co2+对纤维素酶具有激活作用,Mg2+,Fe2+对纤维素酶具有抑制作用.

邓先余,邹谋勇,黄志坚,易俗 - 中山大学学报(自然科学版)

文章来源：万方数据

地震儿童截肢伤员血清酶学检查指标初步分析

目的回顾分析地震中儿童截肢伤员的血清酶学检查结果,并讨论其临床意义.方法从2008年四川汶川和2013年四川芦山两次特大地震150例地震创伤患儿中,选择血清酶学检查结果完整的、以肢体外伤为主的患儿45例,分为3组:截肢组6例、骨筋膜室切开减压组5例、普通创伤组34例.统计各组患儿的血清酶学检查数据,配对后进行统计分析.以同期随机选取的10例非地震创伤的骨科患儿作为对照;以20例成人地震截肢伤员作为对照.结果各组地震创伤患儿损伤严重度评分(ISS)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、羟丁酸脱氢酶(HBDH)等血清酶学指标比较差异均有统计学意义(FISS=15.474,P<0.001;FASTT=10.770,P<0.001;FALT=12.799,P<0.001;FCK=12.848,P<0.001;FLDH=13.126,P<0.001;FHBDH=13.186,P<0.001),以截肢组患儿升高最为明显;且儿童截肢组AST、LDH、HBDA明显高于成人截肢组,而ALT、CK略为升高.血清酶学指标对病情及预后的正确判断有很大的帮助.同时在统计中还发现,CK是一个对急性重症创伤患者特别是伴随严重软组织损伤患者病情进行评估的极其敏感的生化检查指标,在各组病例中增高极为显著,CK可从非地震创伤组的(129±62) U/L升高到地震截肢组的(44208±39 788) U/L,超过300多倍,增高极为显著,其中有的患者最高值竟达到117 513 U/L,超过840倍.而一旦及时进行了截肢手术或骨筋膜室切开减压等治疗处理后,患儿的CK值又会迅速下降,直至正常.结论完善而连续的血清生化检查在急性重度创伤儿童的治疗过程中极为必要,对临床医生正确判断病情并确定治疗方案有着非常重要的临床意义.

蒋欣,刘利君,李卉 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

高糖诱导的牛视网膜血管内皮细胞中共济失调毛细血管扩张突变基因激酶活性变化及其对细胞氧化应激状态的影响

目的观察高糖诱导的牛视网膜血管内皮细胞(BRECs)中共济失调毛细血管扩张突变基因(ATM)激酶的活性变化及其对细胞氧化应激状态的影响.方法体外培养BRECs,取4~8代细胞用于实验.采用含5 mmol/L葡萄糖(正常糖组)、30 mmol/L葡萄糖(高糖组)、30 mmol/L葡萄糖和10 μmol/LATM激酶特异性抑制剂KU55933(干预组)的细胞培养液培养BRECs.细胞培养48 h后,采用蛋白免疫印迹法检测细胞中磷酸化ATM(P-ATM)、磷酸化细胞分裂素活化蛋白激酶(P-P38)及磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK) 1/2的蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)的含量;细胞内活性氧(ROS)水平检测试剂盒检测细胞内ROS水平;碘化丙啶和赫斯特染料双染色法检测细胞凋亡情况;异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖检测内皮细胞屏障的通透性.结果与正常糖组比较,高糖组P-ATM、P-P38、P-ERK1/2蛋白表达均增高;与高糖组比较,干预组P-ATM蛋白表达降低,p-p38、p-ERK1/2蛋白表达明显增加.3组间P-ATM、P-P38、P-ERK1/2蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=436.00、14 010.00、985.10,P<0.05).与正常糖组比较,高糖组、干预组细胞上清液中VEGF含量均升高,干预组升高幅度更明显;3组间细胞上清液中VEGF含量比较,差异有统计学意义(F=278.00,P<0.05).高糖组ROS含量(t=2.98、10.91)、BRECs细胞凋亡率(t=4.31、11.14)均较正常糖组升高,而又明显低于干预组,差异均有统计学意义(P<0.05).与正常糖组比较,高糖组、干预组细胞旁通透率均升高,干预组升高更明显;3组间细胞旁通透率比较,差异有统计学意义(F=2 223.00,P<0.05).结论高糖诱导的BRECs中P-ATM表达、ROS水平、细胞凋亡率及细胞旁通透率均增高,其机制可能与P38、ERK、VEGF有关.

鲁理,郑志,李静文,肖文玮,李春霞 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

Ecological and evolutionary connections between morphology, physiology, and behavior

1 Introduction
Phenotype variation within populations both provides the raw material for and is the product of evolutionary change. An individual's phenotype, defined as the amalgamation of morphology, physiology, and behavior, is highly complex. It has been common to try to isolate each of these aspects of phenotype rather than directly examine their integration. For example, despite the demonstrated importance of single aspects of phenotype for acquiring mates it is well known that signal traits are not evaluated in isolation, but rather in conjunction with associated behaviors, and sometimes with other signal traits (Moiler and Pomiankowski, 1993; Candolin, 2003;

Rebecca J. SAFRAN,Maren N. VITOUSEK,Guest Editors - 动物学报(英文版)

文章来源：万方数据

生防棘孢木霉T31菌株的分离筛选及其生物学特性

为评价具有生防潜力的棘孢木霉,采用平板对峙法、对扣培养法、圆盘滤膜法从长白山土样中分离筛选出木霉菌株T31,结合形态学及分子生物学分析对其进行种类鉴定,并采用菌丝生长法研究了该菌株的生物学特性.所分离的菌株T31被鉴定为棘孢木霉Trichoderma asperellum,该菌株对8种靶标菌的抑菌率在44.49%-77.91%之间,其中,对玉米大斑病菌Exserohilum turcicum、核盘菌Sclerotinia sclerotiorum、腐霉菌Pythiumuhtimum sp.及镰刀菌Fusarium sp.均有较强生长竞争优势,对玉米灰斑病菌Magnaporthe oryzae具明显重寄生作用.菌株T31的最适培养基为PDA培养基,最适生长温度为30 ℃、最适产孢温度为25 ℃,最适pH值为6.持续光照可以促进木霉菌孢子产生,Zn^2+、Mn^2+、Ca^2+和Mg^2+利于菌丝生长,但是高浓度的Fe^2+和Cu^2+抑制菌丝生长,Mn^2+和Mg^2+可促进产孢.此外,与普通木霉菌相比,该菌株具有耐寒性及耐盐性.

李琳,张雅梅,张祥辉,刘金亮,潘洪玉 - 植物保护学报

文章来源：万方数据

绿色荧光蛋白转基因小鼠不同源性间充质干细胞原代培养及生物学特性比较

目的:探讨绿色荧光蛋白转基因小鼠脐带和骨髓源性间充质干细胞( MSCs )的体外分离培养方法、生物学特性、表面标志及多向分化潜能。方法:应用Ⅱ型胶原酶消化培养法分离脐带MSCs及密度梯度离心法分离骨髓MSCs进行体外培养。在倒置显微镜下观察2种细胞的生长特点,运用生长曲线和MTT法检测其原代细胞增殖能力,台盼蓝法测定细胞传代成活率,采用流式细胞术测定2种第3代( P3)细胞DNA周期及表面标志物的表达,并比较其向成脂细胞和成骨细胞的分化潜能。结果:酶消化法分离培养的脐带MSCs 1 d后,细胞贴壁呈成纤维形,2 d后呈漩涡状生长且增殖明显,3 d后达80%融合即可传代;应用密度梯度离心法分离骨髓MSCs,体外培养4 d后,细胞贴壁呈圆形、梭形和多角形生长,5 d后呈克隆样生长且增殖明显,7 d后达80%融合即可传代。原代培养的脐带MSCs生长曲线近似“S”形,骨髓MSCs 生长曲线较平缓;MTT法显示脐带MSCs在3~5 d增殖较明显,骨髓MSCs 7 d后细胞增殖较明显。2种P3细胞传代成活率均为96%以上,G0/G1期细胞均为85%以上,无明显差异(P>0.05);2种P3细胞CD44、CD90和CD105阳性率均为(60.7±2.3)%以上高表达,CD45、CD19、CD14和CD79a均为(25.6±4.8)%低表达,两者无明显差异( P>0.05);2种MSCs在体外均具有向成骨细胞和成脂细胞分化的潜能,脐带MSCs向成骨及成脂细胞分化率均为90%以上,与骨髓MSCs的分化潜能比较有显著差异( P<0.05)。结论:脐带MSCs较骨髓MSCs具有较强的增殖能力及分化潜能。绿色荧光蛋白转基因小鼠的脐带MSCs可作为较好干细胞示踪的细胞源。

- 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

Cry1Ac和Cry2Ab蛋白对大草蛉生长发育及酶活力的影响

为明确转Cry1Ac和Cry2Ab基因棉花对大草蛉的影响,运用Bt蛋白与人工饲料混合的方法,以大于转基因棉花叶片中蛋白含量20倍的剂量饲喂大草蛉初孵幼虫,初步研究了Cry1Ac和Cry2Ab对大草蛉生物学参数和消化酶、解毒酶活性的影响.结果表明:取食含Bt蛋白饲料的大草蛉幼虫的发育历期、体重、蛹重、成虫体重、羽化率等生物学参数与对照相比均没有显著差异;在大草蛉幼虫体内可以检测到含量较高的Cry1Ac和Cry2Ab蛋白,分别为974.92~1282.39 ng/g鲜重和5592.62~6082.92 ng/g鲜重,而在大草蛉成虫体内检测到的Cry1Ac和Cry2Ab蛋白含量非常低,分别为0.29~0.39 ng/g鲜重和50.34~56.71 ng/g鲜重;取食含Bt蛋白的饲料对大草蛉幼虫的类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶、氨肽酶和谷胱甘肽-S-转移酶活性有一定的影响,但对大草蛉成虫影响与对照差异不显著.表明大草蛉取食含Bt蛋白的人工饲料后,虽然体内可以检测到一定含量的Bt蛋白,但对大草蛉的生长发育并没有显著的直接不利影响.

王英丽,魏纪珍,张丽丽,袁向东,梁革梅 - 植物保护学报

文章来源：万方数据

N~6-甲基腺苷依赖的信使RNA稳定性调节

N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰是现今最常见的高等真核生物信使RNA(mRNA)内部(非帽子结构)修饰,是在转录后由m6A甲基转移酶(如MT-A70)在序列的G(m6A)C(70%)或A(m6A)C(30%)部位上加工形成的.这种修饰对于细胞的存活和发育是必不可少的,但其确切作用仍有待进一步研究.最近,Wang等在哺乳类动物细胞发现2个m6A脱甲基酶FTO和ALKBH5,突出显示了m6A在基本生物学功能与疾病中的重要性-mRNA的甲基化是可逆的,从而能动态操控

陈桂玲 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

一种多尺度多视点特性视图生成方法的研究和应用

基于单目视觉的测距必须建立在对目标姿态的准确识别基础上,而姿态的识别又应与已知3D模型紧密联系.本文主要讨论单目视觉系统测距算法中姿态识别方法的多视点特性视图.多视点特性视图模型能够避免从二维图像恢复三维目标这个不适定性问题,得到了比较广泛的应用.因此,本文利用三维几何模型生成多尺度特性视图作为标准数据,用于多尺度递推识别.本文围绕如何实现三维目标的识别进行,提出了建立多尺度多视点特性视图模型的方法,并论证了方法的有效性.

谢冰,方斌 - 微计算机信息

文章来源：万方数据

新生大鼠心肌成纤维细胞培养方法的比较

目的:建立并比较新生大鼠心肌成纤维细胞的培养方法.方法:分别通过胶原酶+胰酶消化法和胰酶消化法对新生大鼠心肌组织进行消化,利用贴壁时间差分离心肌细胞和心肌成纤维细胞,然后对收集的心肌成纤维细胞进行形态、纯度及对药物反应方面的检测.结果:在细胞形态和纯度方面,2种方法收集的心肌成纤维细胞没有明显差异,但用胶原酶+胰酶消化法可以获得更多数量的心肌细胞;在药物反应方面,采用胰酶消化法获得的心肌成纤维细胞比胶原酶+胰酶消化法具有更强的增殖能力.结论:采用胶原酶+胰酶消化法和胰酶消化法可以获得相同形态和纯度的心肌成纤维细胞,但是采用胰酶消化法获得的心肌成纤维细胞对药物具有更强的增殖反应能力.

孙刚,薛睿聪,刘晨,董吁钢 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据