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ALK基因FISH检测失败的补救方法

随着分子病理学和个体化靶向治疗的发展,FISH技术作为分子诊断的主要工具,应用越来越广泛和普及.FISH技术由于其具有检测ALK变异体类型的全面性,经FDA批准,用于临床非小细胞肺癌靶向用药人群的筛选.肺穿刺石蜡组织标本经过几轮切片(常规HE、免疫组化、EGFR突变检测),所剩组织只能切出为数不多的适合FISH(切片可计数细胞>50个)实验的切片,如果FISH实验失败,几乎不可能重新切片;外院会诊的病例也存在无法重新获得白片的情况.因此,作者直接将FISH实验失败的片子重新处理,加探针,得到比较满意的结果,现介绍如下.

许洁,陈洁,张科平,骆新兰,朱小兰,庄恒国,刘艳辉 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

脑转移性ALK阳性间变性大细胞淋巴瘤1例

患者男性,49岁.10年前发现腹膜后肿物,可活动、有轻度压痛.在外院行手术切除,病理诊断为腹膜后间变性大细胞淋巴瘤(anaplasticlargecelllymphoma,ALCL),术后行放、化疗,复查未见复发.本次因头痛及右侧肢体乏力1个月余入院,平素常出现恶心呕吐,右下肢感觉异常,跛行.MRI检查示左顶叶类圆形占位,周围脑组织明显水肿.术中见肿块位于硬膜下,左侧顶叶中央后皮层下脑内,顶部矢状窦旁脑

王彩霞,王建军,余波,李杰,马恒辉,陆珍凤,石群立 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

FISH和RT-PCR法在ALK基因检测中的临床应用分析

目的:探讨荧光原位杂交( fluorescence in situ hybrid-ization, FISH)和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( real-time quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reac-tion, RT-PCR)技术检测非小细胞肺癌中间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase, ALK)突变的差异性。方法应用FISH及RT-PCR技术分别检测22例非小细胞肺癌中ALK基因突变,采用Spearman Correlation统计法进行差异性比较分析。结果两种方法在检测非小细胞肺癌中ALK基因突变的结果具有一致性( P<0.05)。结论虽然两种方法检测ALK基因突变结果具有一致性,但实际操作中RT-PCR法比FISH法更简便、敏感、易判读。

李霄,刘冲,李扬,朱芸,宋国新,张智弘 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

免疫组化染色及FISH法检测肺鳞状细胞癌中ALK蛋白的表达

目的:探讨棘皮类微管蛋白4(echinoderm microtubule-associated protein-like 4, EML4)与间变性淋巴瘤激酶基因(ana-plastic lymphoma kinase, ALK)融合在肺鳞状细胞癌中的发生率,为进一步开展靶向治疗提供参考。方法采用高度特异性和敏感性的ALK抗体(D5F3)对219例肺鳞状细胞癌石蜡包埋组织标本进行免疫组化染色,并对阳性标本行EML4-ALK荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization, FISH)检测。结果免疫组化染色检出ALK强阳性标本4例(1.8%,4/219)、中等强度3例和弱阳性6例。 FISH检测确认ALK强阳性标本存在EML4-ALK基因融合,中等和弱阳性标本为假阳性。结论肺鳞状细胞癌中存在少量EML4-ALK基因融合,其是否对Crizotinib治疗敏感亟需进行临床研究;免疫组化检测ALK蛋白强阳性才能判断为EML4-ALK基因融合。

王建东,余波,孙绪,王璇,王海,马捷,周晓军,石群立 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

原发性肺印戒细胞癌6例临床病理分析

目的探讨原发性肺印戒细胞癌(signet-ring cell carcinoma,SRCC)的临床病理特征及生物学特征.方法回顾性分析6例肺SRCC的临床病理资料,采用FISH技术检测其中2例肿瘤组织EML4-ALK基因融合情况,并复习相关文献.结果镜下见瘤细胞胞质内富含黏液,胞核偏于一侧呈印戒状.免疫表型:瘤细胞弥漫性表达TTF1和CK7,2例局部表达p63.2例瘤组织EML4-ALK融合基因阳性.患者容易发生淋巴结和远处转移.结论原发性肺SRCC有特异性组织学特点、免疫表型和基因改变,提示其可能为腺癌的一种亚型,与其他腺癌相比预后差.

李桂梅,杨志慧,梅佳,曹晓卉 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

mTOR 信号通路在克唑替尼诱导的 EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株 H2228凋亡中的作用

目的:探讨以磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶蛋白家族成员哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mTOR)为中心的信号通路在克唑替尼( crizotinib)诱导的棘皮动物微管结合蛋白样蛋白4-间变性淋巴瘤激酶( EML4-ALK)融合基因阳性的非小细胞肺癌细胞株H2228凋亡中的作用。方法:根据不同的实验目的处理H2228细胞后,荧光定量PCR检测基因状态,MTT法检测细胞抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western blotting 检测细胞mTOR信号通路中关键蛋白的表达及活化水平。结果: Crizotinib对H2228细胞有促凋亡作用,呈时间和剂量依赖性,且能使H2228细胞阻滞在G1期。在使用crizotinib处理的凋亡细胞株中发现mTOR活化水平降低,mTOR上、下游关键蛋白的活化水平都呈下降趋势,肺癌细胞株H2228中特殊表达的融合蛋白EML4-ALK变异体3表达量未受影响,但其活化形式p-ALK明显受到抑制。结论:初步证实mTOR信号通路在crizotinib诱导含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞H2228凋亡中有一定作用,为crizotinib的作用机制提供了依据。

- 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

伴有ALK基因融合的Spitz痣、非典型Spitz肿瘤的临床病理学特征

Spitz肿瘤是一组发生于青年人,主要由梭形及上皮样肿瘤细胞组成的黑色素细胞肿瘤.Spitz黑色素肿瘤包括良性的Spitz痣,恶性潜能未定的非典型Spitz肿瘤和Spitz样恶性黑色素瘤.目前通过皮肤病理学形态上鉴别惰性病变或是侵袭性致命肿瘤仍是一个难题.有研究表明,Spitz肿瘤存在包括ALK基因融合在内的多种基因融合,且这些基因融合肿瘤具有特定的临床病理特点.为此作者对17例伴有

Busam K L,Kutzner H,Cerroni L,陈佳菁,余英豪 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据