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  • 竞争性内源RNA与肿瘤发生

    微小RNA(microRNA,miRNA)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)等转录物在肿瘤发生发展中发挥着重要作用[1-4],越来越多的研究表明,它们之间存在着复杂的网络关系[5-6].2011年,哈佛大学医学院的研究人员提出了竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)假说.该假说认为mRNA、lncRNA等转录物通过miRNA应答元件(miRNA response element,MRE)竞争性结合miRNA,从而相互调控各自的表达水平,进而影响各
    蔺新秀,杨蔓,夏天,郭俊明 - 中国病理生理杂志
    文章来源： 万方数据

  • 肿瘤中miRNA异常表达的分子调控机制及研究进展

    microRNA(miRNA)是一类长约22 nt的非编码RNA分子,在转录后水平调控基因表达.研究表明miRNA在多种生物学过程中发挥作用,包括调控细胞的发育、分化、增殖和凋亡,以及在肿瘤的发生、侵袭、转移中起着重要作用.虽然miRNA具有重大的生物学功能,但目前大部分研究主要关注于筛选差异表达的miRNA及鉴定其调控的靶基因,而对自身转录调控的研究不多.该文将概述miRNA的分子调控机制,并简单介绍在肿瘤中miRNA异常表达的分子调控机制.
    龚勇,谢海龙 - 临床与实验病理学杂志
    文章来源： 万方数据

  • MicroRNA-132转染对脂多糖诱导的肺泡巨噬细胞炎症反应的作用

    目的:探讨转染微小RNA-132(miR-132)对肺泡巨噬细胞炎症反应的作用。方法:将体外去致热源培养的大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383分为空白对照组、阴性对照组和转染组,分别采用miR-132增敏剂、错义链和PBS作用。转染24 h后,CCK-8法检测细胞増殖;实时荧光定量PCR检测细胞中miR-132的表达;用脂多糖( LPS)作用细胞后,凝胶电泳迁移率实验( EMSA )检测细胞中NF-κB活性;Western blotting法检测细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的表达。结果:与空白对照组和阴性对照组相比较,转染组细胞中miR-132的表达明显升高;转染组细胞増殖被明显抑制,与空白对照组相比较,差异有统计学意义( P<0.05);LPS作用后,转染组NF-κB、TNF-α和IL-6表达量显著下降,与空白对照组和阴性对照组相比较,差异均有统计学意义( P <0.05)。结论:转染miR-132可抑制NR8383细胞増殖,并抑制LPS诱导的NR8383细胞的炎症反应。
    蓝琳友,洪溪屏,蔡元晖 - 中国病理生理杂志
    文章来源： 万方数据

  • MicroRNA-185通过靶向调节 DN-MT1/PTEN/Akt通路抑制肝细胞癌的生长

    近来研究表明miRNAs与肝癌的发生密切相关,然而单个miRNAs的具体作用机制仍未完全阐明.作者对microRNA-185(miR-185)在肝细胞癌生物学功能和分子机制方面做了一些研究.实验发现,与非肿瘤性的肝脏实质相比,miR-185在人肝细胞癌组织中的表达减少;qRT-PCR检测显示,与原代肝细胞相比,miR-185在人肝细胞癌细胞中的表达下降;在体外人肝细胞癌细胞中miR-185的过表达会抑制细胞的增殖和侵袭,并且阻止SCID小鼠体内肿瘤的生长.miR-185的过表达能够抑制肝细胞癌细胞中DNMT1 3'端非
    魏建国(摘译),许春伟(审校) - 临床与实验病理学杂志
    文章来源： 万方数据

  • qRT-PCR检测石蜡包埋组织microRNA的研究进展

    实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRTPCR)是一种具有高度敏感性和特异性的核酸定量分析技术,因其具有重复性好、定量准确等优点,已成为核酸检测的重要方法.microRNA是核酸家族中的重要成员,可使用qRT-PCR技术进行检测.由于microRNA具有其特殊性,与mRNA的检测方法不完全一样,仍需进行深入探讨qRT-PCR技术分析组织中microRNA的表达方式.现就该方面的研究进展作一综述.
    程凯,余波,王建东,石群立 - 临床与实验病理学杂志
    文章来源： 万方数据

  • MicroRNA-378*通过抑制CTGF促进人骨髓间充质干细胞凋亡

    目的:研究年龄相关microRNA-378*(miR-378*)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)存活和凋亡的调控作用。方法:通过microRNA芯片和qRT-PCR检测供体年龄对hMSCs中miR-378*表达的影响;通过H2 O2诱导hMSCs凋亡;通过转染miR-378*模拟物或抑制物,过表达或抑制miR-378*的表达;用MTT、LDH、caspase-3/7、TUNEL检测等方法研究其对hMSCs存活和凋亡的影响;通过siRNA研究结缔组织生长因子( CTGF)对hMSCs存活和凋亡的影响。结果:随供体年龄增加,hMSCs中miR-378*的表达增加。 H2 O2刺激可促进miR-378*表达,抑制CTGF表达。过表达miR-378*可减少hMSCs的存活,促进细胞凋亡。相反,抑制miR-378*的表达促进hMSCs的存活,减少细胞凋亡。同时抑制miR-378*和CTGF的表达,使miR-378*失去对hMSCs存活和凋亡的调控作用。直接抑制CTGF的表达可减少hMSCs的存活,促进细胞凋亡。结论:miR-378*通过抑制CTGF的表达减少hMSCs存活,促进hMSCs凋亡。
    董珺,曾波航,刘宁宁,莫沛,熊龙根,刘世明,黎佼 - 中国病理生理杂志
    文章来源： 万方数据

  • MicroRNA-196a通过HOXB7调控人骨髓间充质干细胞的增殖功能

    目的:研究年龄相关microRNA-196a(miR-196a)对人骨髓间充质干细胞(hMSCs)增殖功能的调控作用.方法:通过MTT研究年龄对hMSCs增殖能力的影响.通过microRNA芯片和qRT-PCR检测年龄对miR-196a表达的影响.通过转染miR-196a模拟物或抑制物,研究其对hMSCs增殖能力的影响.通过萤光素酶报告基因系统证实HOXB7为miR-196a的靶基因.通过siRNA研究HOXB7对碱性成纤维细胞生f长因子(bFGF)表达及hMSCs增殖功能的影响和研究bFGF对hMSCs增殖功能的影响.结果:随年龄增加,hMSCs的增殖能力下降,miR-196a的表达增加.miR-196a可抑制hMSCs的增殖.抑制miR-196a的表达可促进hMSCs的增殖.同时抑制miR-196a和HOXB7的表达,使miR-196a失去对hMSCs增殖能力的调控作用.抑制HOXB7的表达可使bFGF的表达下调.直接抑制HOXB7或bFGF的表达可抑制hMSCs的增殖.结论:miR-196a通过抑制HOXB7及bFGF的表达导致hMSCs增殖能力下降.
    黎佼,董珺,张振辉,田朝伟,成传访,吴功雄,刘世明 - 中国病理生理杂志
    文章来源： 万方数据

  • MicroRNA-16对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞增殖、侵袭及细胞因子分泌的影响

    目的:研究microRNA-16(miR-16)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis synovial fibroblasts,RASFs)增殖、侵袭及细胞因子分泌的影响.方法:体外分离培养RASFs,脂质体转染化学合成的miR-16 mimic或miR-16抑制剂,分别采用MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测其对RASFs增殖、侵袭及凋亡的影响;RT-PCR和Western blotting检测miR-16对RASFs基质金属蛋白酶3/13(matrix metalloproteinase 3/13,MMP3/13)及白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)表达的影响.结果:增殖实验结果表明miR-16可显著抑制RASFs的增殖;细胞侵袭结果表明miR-16可显著抑制RASFs的侵袭;流式细胞术检测发现miR-16对RASFs凋亡无显著影响;miR-16可下调MMP3/13及IL-1β的表达水平.结论:miR-16在RA的发生中起着重要作用,它可能通过下调MMP3/13及IL-1β的表达抑制RASFs增殖和侵袭.这为进一步研究miR-16在RA中的作用机制奠定了基础.
    史栋梁,史桂荣 - 中国病理生理杂志
    文章来源： 万方数据

  • MicroRNA-3666调节白血病细胞 PTEN 基因的表达

    目的:探讨白血病细胞中microRNA-3666( miR-3666)对第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源基因( PTEN)表达的调控作用。方法:qRT-PCR检测miR-3666在正常人外周血单个核细胞、不同类型白血病细胞系以及临床初诊未治的不同类型白血病细胞中的表达差异,利用TargetScan在线分析软件预测miR-3666潜在靶基因PTEN后,构建含有靶基因野生型3’端非翻译区域(3’UTR)及突变型3’UTR(缺失了整段预测的miR-3666结合序列)的双萤光素酶报告基因质粒,采用脂质体Lipofectamine 2000包裹双萤光素酶重组质粒及miR-3666模拟体或阴性对照,共转染HEK293T细胞,应用双萤光素酶检测试剂盒测定萤光素酶活性。 FAM标记的miR-3666抑制体和阴性对照分别核转染至K562细胞,FACS检测转染效率,并采用 Western blotting 检测PTEN蛋白的表达。结果:miR-3666在人白血病细胞系及原代白血病细胞中的表达明显高于正常人外周血单个核细胞,尤其高表达于K562细胞系及原代慢性粒细胞白血病细胞中;双萤光素酶报告基因测定系统验证PTEN是miR-3666的潜在靶基因;K562细胞中下调miR-3666后,Western blotting检测结果显示PTEN蛋白显著上调。结论:白血病细胞中miR-3666的表达上调,下调miR-3666后可以促进靶基因PTEN的表达,miR-3666有可能成为白血病治疗的新靶点。
    倪芳,张玉侠,汪心怡,赵华,汪思应 - 中国病理生理杂志
    文章来源： 万方数据

  • miR-21在大肠癌细胞迁移和侵袭中的作用及机制探讨

    目的 探讨miR-21在大肠癌细胞迁移和侵袭中的作用及机制.方法 取大肠癌SW480细胞培养、传代,分为两组.观察组转染miR-21 mimics,对照组加入同浓度的miRNA mimics negative control.采用实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-21的表达情况,采用Transwell小室检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot法检测上皮一间质转化(EMT)相关蛋白表达情况.结果 转染组miR-21的表达量、细胞的迁移和侵袭能力均明显高于对照组(P均<0.05);细胞中紧密连接蛋白(ZO-1)和上皮钙黏蛋白(E-cad)的表达明显降低、神经钙黏蛋白(N-cad)和转录因子Slug的表达明显升高,第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)表达明显降低、而磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达明显升高(P均<0.05).结论 miR-21可促进人大肠癌细胞发生EMT发生细胞迁移和侵袭,其机制为下调PTEN蛋白表达、激活P13K/Akt,促进EMT.
    胡婷,陈梅香,闫雍容,钟雪云 - 山东医药
    文章来源： 万方数据
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