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外源性 ATP 诱导 PC12细胞的膜孔形成
目的:探讨外源性三磷酸腺苷( ATP)诱导PC12细胞的膜孔形成及关键分子靶标。方法:用不同浓度的ATP处理培养的PC12细胞,采用倒置相差显微镜观察形态,CCK-8法检测细胞存活率,YO-PRO-1染色检测细胞膜通透性,Western blotting和real-time PCR检测P2X7受体和pannexin 1(Panx1)表达的变化。结果:(1)ATP(1 mmol/L、3 mmol/L、5 mmol/L)作用3 h,可见随着ATP浓度升高,PC12细胞变圆,脱壁细胞增多;当ATP浓度为3 mmol/L或5 mmol/L时,PC12细胞活力较对照组显著下降(P<0.05)。(2)不同浓度的ATP(0、1、3、5 mmol/L)作用1 h,PC12细胞摄入YO-PRO-1的荧光强度随着浓度增加而增加;同一浓度的ATP作用不同时间(15、30、60 min),随着时间的增加,胞内的荧光强度也增加。(3)亮蓝G(P2X7受体的抑制剂)预处理可明显拮抗ATP引起的细胞活力下降和胞内荧光强度增强(P<0.05),而生胃酮(Panx1的抑制剂)预处理不改变细胞活力和胞内的荧光强度(P>0.05)。(4)ATP作用3 h使PC12细胞 P2X7受体的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05),而Panx1 mRNA和蛋白表达变化不大(P>0.05)。结论:胞外高浓度ATP引起PC12细胞的膜孔形成可能主要与P2X7受体的表达和激活有关。沈慧,尹雅玲,李超堃,赵红岗,马洁,李东亮 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
CD147对前列腺癌PC-3细胞自噬的影响
目的:研究白细胞分化抗原(CD)147在体外对前列腺癌PC-3细胞的自噬作用。方法:通过氨基酸饥饿法建立自噬模型,免疫印迹技术检测CD147的表达。利用RNA干扰CD147表达的细胞系,免疫印迹技术检测自噬蛋白LC3-I和LC3-II的表达;台盼蓝排斥实验检测细胞的死亡情况。结果:在PC-3细胞自噬模型中,随着饥饿诱导时间延长,CD147表达逐渐升高。用RNA干扰技术降低CD147表达后,与阴性对照组比较,在自噬模型中CD147干扰组自噬相关蛋白LC3-II表达增多;并且细胞死亡数量明显增加,阴性对照组细胞死亡率分别为(19.3±3.1)%和(22.3±3.5)%,而在CD147干涉组细胞死亡率为(38.4±3.1)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在前列腺癌PC-3细胞中CD147抑制饥饿诱导的自噬,减少自噬性细胞死亡的发生。方芳,冯淳,姚杨,马潇潇,王立国 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
通过单细胞测序发现结肠癌双系起源的新型癌基因--SLC12 A5
单细胞测序是一种为划定遗传关系和个性化癌症管理确认重要驱动基因的功能强大的工具.本研究运用单细胞测序分析1例结肠癌.群体遗传学分析确定了肿瘤群体中两个独立的克隆.作为早期致癌事件的大部分肿瘤克隆包含APC和TP53基因突变,然而少数克隆却包含CDC27和PABPC1基因的优势突变.APC和TP53基因突变在少数克隆中的缺失说明这两个克隆来自两个细胞起源.对于另外21例整个组织外显子测序并检查其体细胞突变的等位基因张俊(摘译),许春伟(摘译),张博(审校) - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
采用PDIUSBD12的USB接口固件程序开发
随着计算机技术的更新换代,USB接口已经成为个人计算机上最重要的外部设备扩展接口,在进行USB外设开发的过程中需要编写其固件程序.在此对USB接口固件程序进行了开发,在Keil C51软件环境中,采用C语言开发.介绍了固件程序的主要功能,给出了固件程序的流程、结构和端点配置,并给出了重点地方的具体程序.该固件编写采用分层结构简洁且易于修改和测试,既增加了代码的可读性,又增加了程序的通用性和移植性.刘韶华,禹华钢,邹岚 - 现代电子技术文章来源： 万方数据 -
LASS2/TMSG-1基因沉默对人前列腺癌细胞生物学功能的影响及其机制
目的 探讨LASS2/TMSG-1基因沉默对PC-3M-2B4细胞增殖、迁移及侵袭的影响及其作用机制.方法 将实验分为3组:空白对照组(仅转染PBS的PC-3M-2B4细胞)、无关阴性对照siRNA组及LASS2/TMSG-1 siRNA转染组.首先针对LASS2/TMSG-1基因,设计并合成siRNA;在脂质体介导下瞬时转染人前列腺癌PC-3M-2B4细胞24h后分别采用Western blot 和RT-PCR技术检测细胞内LASS2/TMSG-1蛋白及ATP6L mRNA表达水平;使用BCECF AM H+敏感荧光探针检测转染24、36、48、96 h后3组细胞的细胞内H+浓度;用MTT法检测细胞增殖;划痕修复实验和Transwell体外侵袭实验分别检测PC-3M-2B4细胞的迁移和侵袭能力.结果 转染LASS2/TMSG-1 siRNA 24 h后,LASS2/TMSG-1 siRNA组LASS2/TMSG-1蛋白表达与对照组相比下降65%,ATP6L mRNA表达水平与对照组比较提高75%.通过BCECF AM荧光探针检测LASS2/TMSG-1 siR-NA转染组细胞内H+浓度明显下降,且与空白对照组及无关阴性对照siRNA组相比,差异有统计学意义(P<0.05).MTT法检测显示,PC-3M-2B4细胞在转染24、48 h后,3组细胞生长速度无明显差异(P>0.05);转染72 h后LASS2/TMSG-1 siRNA转染组细胞生长速度明显升高,与空白对照组、无关阴性对照siRNA组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05).划痕修复试验和Transwell体外侵袭实验显示,转染LASS2/TMSG-1 siRNA 24 h后,与空白对照组及无关阴性对照siRNA组相比,能显著促进细胞迁移和侵袭能力(P<0.05).结论 体外合成的siRNA能有效沉默LASS2/TMSG-1基因表达,同时上调V-ATPase质子泵中关键性亚基—ATP6L mRNA的表达水平,且基因沉默后其细胞内H+浓度下降,提示LASS2/TMSG-1基因可能与ATP6L相互作用、共同参与对细胞内pH值的影响,导致肿瘤细胞内外微环境的改变并影响肿瘤细胞的生物学行为,如增殖、迁移及侵袭能力.徐晓艳 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
基于单片机的油罐车工况监测仪
为了杜绝部分司机在油罐车运输途中,私自从储油罐中卸油,以STC12C5A60S2单片机为核心,结合阀门开关监测、油量监测、SD卡录像等模块,开发了多功能、智能化的油罐车工况监测仪器.主要介绍了油罐车工况监测仪的硬件和软件设计.按该方案设计的监测仪已投入实际应用,实现了油罐车运输过程中违规卸油的监测和记录,以小票形式打印记录的参数.该监测仪具有良好的功能和性能,界面良好,工作稳定,记录参数稳定可靠,可以满足预期要求.万世杰,谢扩军,江金浓,尹治强 - 现代电子技术文章来源： 万方数据 -
光伏发电并网系统双向电能表的设计
太阳能光伏发电作为一种零排放、零污染的可再生能源,已经受到世界各国的关注和青睐。为了满足小型光伏发电系统并网测试记录双向电能的需求,本文基于Cirrus Logic公司的电能计量芯片CS 5463与宏晶科技公司的STC12C5A60S2芯片,完成了并网双向测试电表的设计和性能测量,并对并网过程中相关参数进行了理论分析和计算,达到了实时判别光伏发电和电网供电方向和分别记录各自所供电能的目标,实现了光伏发电并网的计量需要。蒙宇,董有尔,陈宝明,唐晋娥 - 测试技术学报文章来源： 万方数据 -
79例毛细胞肿瘤的组织学分类及临床病理分析
目的 观察中间型毛细胞黏液样肿瘤(intermediate pilomyxoid tumor,IPMT)、毛细胞黏液样星形细胞瘤(pilomyxoid astrocytoma,PMA)和毛细胞星形细胞瘤(pilocytic astrocytoma,PA)的临床病理学特征.方法 回顾性分析79例毛细胞肿瘤,按照WHO(2007)中枢神经系统肿瘤分类标准重新诊断,结合其临床病理学特征进行对比分析.结果 67例为典型PA,1例为典型PMA,11例为IPMT.男性患者均多于女性,IPMT患者平均年龄大于PMA,明显小于PA,三者病变部位相似.镜检:PMA由形态单一的双极梭形细胞以血管为中心生长,间质内见大量黏液,未见Rosenthal纤维或嗜酸性颗粒小体;PA均可见Rosenthal纤维和嗜酸性颗粒小体;IPMT则具有PMA的大量黏液,形态单一的双极小肿瘤细胞且呈假菊形团样生长,具有PA的Rosenthal纤维和嗜酸性颗粒小体特征,可见多量微囊.三者均可复发.结论 IPMT确实存在且数量不少,PA、PMA和IPMT在组织学上有联系.马小梅,余宏宇,刘惠敏,夏春燕,黄佳,何金,杨慧玲,刘胜楠 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
膜联蛋白A2对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和凋亡的影响
目的:研究膜联蛋白A2(annexin A2,ANXA2)对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和凋亡能力的影响.方法:以HeLa细胞为研究对象,构建过表达载体以及ANXA2-siRNA,转染入细胞.将细胞分为正常对照组、scrambled组、ANXA2过表达组及ANXA2-siRNA组.应用real-time PCR法检测ANXA2 mRNA表达水平及Western blotting检测ANXA2蛋白表达水平.分别采用MTT法、Boyden小室法和流式细胞术观察ANXA2对HeLa细胞增殖、迁移及凋亡能力的影响.结果:ANXA2过表达组可以显著促进HeLa细胞的增殖和迁移;ANXA2-siRNA组明显抑制HeLa细胞的增殖和迁移;ANXA2对HeLa细胞凋亡几乎无影响.结论:沉默ANXA2对人宫颈癌细胞的凋亡无显著影响,但可显著抑制其增殖能力和迁移能力.ANXA2可能在宫颈癌的发生发展中具有十分重要的作用,提示它有可能成为宫颈癌治疗的分子靶点.魏建勋,马文君,李红梅 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
原发性肝细胞癌中干细胞标志物的表达与上皮细胞-间质转化的关系
目的 探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中肝干细胞标志物的表达及其与上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系.方法 采用免疫组化法检测72例HCC中肝干细胞标志物CK19、EpCAM、CD133、CD90的表达及其与EMT相关蛋白E-cadherin、vimentin和Snail的关系.结果 HCC组织中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率分别为31.9%(23/72)、40.3% (29/72)、51.4% (37/72)、41.7%(30/72),有镜下癌栓和门静脉癌栓组中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率均高于无镜下癌栓和无门静脉癌栓组,Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤数目多发的HCC中EpCAM、CD133、CD90阳性率高于Ⅰ+Ⅱ期和单发的HCC;<46岁、组织学Ⅲ+Ⅳ级、血清AFP≥350 ng/ml的HCC中CK19阳性率高于其相应对照组.E-cadherin与其余两种EMT标志物均呈负相关(vimentin:r=-0.572,P=0.004;Snail:r=-0.597,P=0.003),CK19、Ep-CAM、CD90阳性HCC组中vimentin阳性强度均高于阴性组,CD133阳性HCC组中E-cadherin阳性强度低于CD133阴性组,vimentin、Snail阳性强度均高于CD133阴性组.结论 与CK19、EpCAM、CD90相比,CD133阳性的肝癌干细胞与EMT的关系更加密切,CD133可作为同时针对HCC肝干细胞和EMT的治疗靶点.徐军,胡勇,王健,王星星,程兰兰,余宏宇 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据
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