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Sombati细胞模型中Toll样受体4的表达及意义

目的:研究Sombati细胞模型中神经元Toll样受体4(TLR4)表达变化,探讨TLR4在Sombati癫痫细胞发病过程中的意义.方法:将新生SD乳鼠海马神经元进行体外培养至第9天,随机分为对照组和Sombati细胞模型组,分别检测TLR4蛋白及TLR4mRNA的表达.结果:免疫组化结果显示Sombati细胞TLR4蛋白表达增强,荧光定量PCR显示Sombati细胞组TLR4 mRNA表达增加(P<0.05),且随时间的延长而增强.结论:Sombati细胞模型中TLR4mRNA与蛋白表达均增加,可能与癫痫的发病有关.

李偲俊,吴原,黄金山,叶洁梅,韦兴,刘夕霞 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

Toll样受体和其他分子识别受体在固有免疫中的相互作用

Toll样受体(Toll-like receptors, TLRs)是参与非特异性免疫(天然免疫)的一类重要蛋白分子,也是连接非特异性免疫和特异性免疫的桥梁。 TLRs是一类单次跨膜非催化性的蛋白,可以识别来源于微生物上具有保守结构的分子。当微生物突破机体的物理屏障,如皮肤、黏膜等时,TLRs可以通过识别这些微生物来激活机体的免疫应答反应。除此之外,机体还具有一些其他类型的分子识别模式受体,包括C型凝集素样受体、NOD样受体、视黄酸诱导基因Ⅰ样受体。这些受体都参与了机体免疫调节,它们之间相互作用,使之形成一张极为复杂而精密的网络体系。该综述主要阐明TLRs在机体免疫调节中的作用及其与其他分子识别受体在对病原体识别过程中的交叉相互作用。

胥静,丁力,张俊平 - 药学实践杂志

文章来源：万方数据

高迁移率蛋白1、Toll受体与动脉粥样硬化的关系

动脉粥样硬化是血管慢性增殖性炎症过程,也是对血管损伤的反应和修复过程.高迁移率蛋白l作为一种重要的晚期炎症介质,参与多种炎性疾病的发生发展.Toll样受体是最重要的先天免疫系统的模式识别受体识别微生物的病原相关分子模式.高迁移率蛋白1可能通过Toll样受体激活炎性反应,参与动脉粥样硬化的发生和发展.

曾瑜,李家富 - 心血管病学进展

文章来源：万方数据

小鼠脑梗死后小胶质细胞内Toll样受体9选择性上调

目的:观察脑梗死后Toll样受体9(TLR9)表达量及其在神经元和神经胶质细胞中的表达变化.方法:线栓法制备C57小鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,90 min后再灌注.假手术组为对照.再灌注后6h、3d、7d和14 d处死动物(n=3),制备脑冠状位冰冻切片.免疫荧光染色观察TLR9表达量及其在神经元和神经胶质细胞中的表达变化.结果:梗死灶边缘区TLR9的表达量随时间增加,始终高于对侧及假手术组.病变全程偶见神经元胞内小点状TLR9,TLR9阳性率无时间、组间差异.激活态小胶质细胞聚集于梗死灶边缘区,胞内TLR9由散在小点状变为团块状粗颗粒样.TLR9阳性率随时间先升后降,始终高于对侧及假手术组.星形细胞和少突胶质细胞未见TLR9阳性染色.结论:脑梗死后,中枢定居细胞中神经元TLR9维持固有表达,仅小胶质细胞TLR9表达选择性上调,星形细胞及少突胶质细胞无TLR9表达.

纪原,杨碧莹,黄小雄,潘经锐,王鸿轩,王艺东 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

亚低温对脂多糖诱导巨噬细胞Toll样受体4 mRNA转录及炎症平衡的影响

目的探讨亚低温对脂多糖(LPS)刺激下巨噬细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA转录及下游炎症平衡的影响.方法实验用RAW264.7小鼠巨噬细胞株,将细胞分别置于37 ℃和32℃的温育箱中培养,干预组加入10 ng/mL LPS进行刺激,对照组加入等量生理盐水.分别于培养2、8、24h取细胞上清液检测白细胞介素(IL-1β、IL-10)水平;用TRIzol提取细胞总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TLR4 mRNA的转录水平.结果 LPS刺激下,常温组和亚低温组TLR4 mRNA表达水平均呈先升高、后降低的趋势(均P< 0.001);同一时间点,亚低温组TLR4 mRNA表达水平(2-AAC)均明显低于常温组(2 h:9.19 ±0.57比10.08±1.02,t=-2.285,P=0.036;8 h:13.58±1.57比15.24±1.63,t=-2.201,P=0.042;24 h:6.85±1.17比8.17±1.21,t=2.353,P=0.032).LPS刺激下,常温组和亚低温组随时间延长IL-1β、IL-10均逐步增高(均P<0.001);同一时间点,亚低温组IL-1β(ng/L)明显低于常温组(2 h:87.08±29.35比110.53±26.58,t=1.777,P=0.047;8 h:119.19±49.14比173.25±37.21,t=2.631,P=0.018;24 h:208.66±53.83比346.56±64.30,f =4.933,P<0.001);IL-10(ng/L)明显高于常温组(8 h:170.01±24.90比140.02±15.08,t=-3.091,P=0.007;24 h:423.10±52.40比165.06±31.97,t=-12.611,P<0.001).随着LPS刺激时间的延长,常温组IL-1B/IL-10比值逐渐升高(F=20.003,P<0.001),亚低温组IL-1 β/IL-10比值则逐渐降低(F=1.811,P=0.185);同一时间点,亚低温组IL-1WIL-10比值明显低于常温组(2h:0.740±0.214比0.993±0.256,t=2.275,P=0.037;8 h:0.701±0.363比1.237±0.455,t=2.763,P=0.014;24 h:0.493±0.292比2.099±0.428,t=9.299,P<0.001).结论亚低温可以降低LPS刺激下巨噬细胞TLR4 mRNA的转录水平,相对降低IL-1β水平,但保留了更高水平的IL-10,使炎症平衡向抗炎方向发展.

汪首振,汤展宏,胡军涛,蒋良艳,尹祥 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

早期抗凝对脂多糖致急性肺损伤大鼠的保护作用

目的:观察早期应用肝素对脂多糖(LPS)致急性肺损伤(ALI)大鼠的保护作用.方法健康清洁级SD大鼠40只,按照随机数字表法分为对照组、模型组和大、小剂量肝素组,每组10只.采用尾静脉注射大肠杆菌LPS 5 mg/kg制备ALI动物模型.大、小剂量肝素组分别在给予LPS后1 min静脉注射1000 U/kg、250 U/kg肝素;对照组则给予等量生理盐水.各组分别于注射LPS后4 h经右颈静脉取血检测凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及纤维蛋白原(FIB)水平;经右股动脉采血进行血气分析.取血后6 h,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织Toll样受体4(TLR4)mRNA表达.结果与对照组比较,模型组PT、TT明显缩短〔PT(s):4.45±1.17比6.58±0.59,t=2.237,P=0.045;TT(s):13.29±1.15比15.17±1.08,t=2.765,P=0.019〕,FIB明显下降(g/L:1.80±0.12比4.60±0.57,t=2.813,P=0.032);与模型组比较,大、小剂量肝素组PT、APTT均明显延长〔PT(s):12.98±1.25、9.88±0.72比4.45±1.17,APTT(s):46.60±2.01、44.08±1.46比39.53±2.89,P<0.05或P<0.01〕,FIB显著降低(g/L:2.10±0.43、2.50±0.57比1.80±0.12,P<0.01和P<0.05);而不同剂量肝素组间凝血指标比较差异无统计学意义.模型组血气分析指标较对照组均明显下降;小剂量肝素组PaO2较模型组明显改善〔mmHg(1 mmHg=0.133 kPa):80.87±11.65比65.37±3.58,t=2.903,P=0.017〕,而大剂量肝素组与模型组相比氧合改善无统计学差异.模型组BALF中TNF-α及肺组织TLR4 mRNA表达均较对照组明显升高〔TNF-α(ng/L):534.36±65.33比125.13±11.61,t=4.932,P=0.000;TLR4 mRNA(灰度值):2.451±0.028比0.998±0.021,t=4.687,P=0.001〕;不同剂量肝素组BALF中TNF-α及肺组织TLR4 mRNA?

佟欣,栾婷,李国福,臧彬 - 中华危重病急救医学

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孕酮对LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞表达TNF-α、IL-1β、TLR4、CD14和MD2的影响

先分离培养小鼠腹腔巨噬细胞,经差速贴壁法纯化后,随机分为6组:空白对照组、0.5mg/L脂多糖(LPS)组、10-6 mol/L孕酮(P4)组、LPS+10-5 mol/L P4组、LPS+10-6 mol/L P4组、LPS+10-7 mol/L P4组.各组在处理12、24h分别提取上清液,ELISA法测TNF-α和IL-1β的含量;各组在处理24h分别提取细胞总RNA,用RT-PCR法测TLR4、CD14、MD2mRNA的表达.结果显示,处理12、24h,0.5mg/L LPS组TNF-α和IL-1β的含量均极显著高于对照组(P0.05);LPS+10-5 mol/L P4组极显著低于对照组(P0.05),IL-1β的表达差异显著(P

曹荣峰,崔晓妮,张乃生 - 中国兽医学报

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肺泡巨噬细胞Toll样受体9-髓样分化因子88信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用机制研究

目的探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体9(TLR9)-髓样分化因子88(MyD88)信号通路在呼吸机相关性肺损伤(VILI)中的作用.方法清洁级SD大鼠30只,按随机数字表法将大鼠分为3组,每组10只.A组保留自主呼吸作为对照;B组给予正常潮气量(VT,7 mL/kg)机械通气4h;C组给予大VT(40 mL/kg)机械通气4h.机械通气结束时,透射电镜下观察大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞(AECⅡ)超微结构改变;测定肺组织湿/干质量(W/D)比值以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白、白细胞介素(IL-6、IL-1β)的浓度;用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测肺泡巨噬细胞TLR9、MyD88、核转录因子-κB(NF-κB)的蛋白及其mRNA表达.结果 A、B组大鼠AECⅡ细胞超微结构基本正常;C组AECⅡ胞质内板层小体、细胞膜、细胞核中的染色质及微绒毛等均有不同程度的损伤性改变.C组较A组、B组肺组织W/D比值(5.54±0.17比4.58±0.17、4.69±0.16),BALF中总蛋白(g/L:6.33±0.61比0.45±0.05、0.47±0.04)、IL-6(μg/L:1.989±0.103比1.033±0.061、1.010±0.069)、IL-1β(ng/L:2.79±0.25比1.05±0.15、1.23±0.22),肺泡巨噬细胞TLR9、MyD88、NF-κB的蛋白表达[TLR9(A值):0.770±0.042比0.300±0.027、0.310±0.037,MyD88(A值):0.950±0.091比0.560±0.082、0.580±0.084,NF-κB(A值):1.020±0.076比0.740±0.052、0.700±0.076]均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).B组肺泡巨噬细胞TLR9、MyD88、NF-κB的mRNA表达分别是A组的(1.13±0.32)倍、(1.18±0.33)倍、(1.11±0.22)倍,差异均无统计学意义(均P>0.05);C组肺泡巨噬细胞TLR9、MyD88、NF-κB的mRNA表达分别是A组的(8.66±0.69)倍、(6.41±0.53)倍、(5.29±0.71)倍,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论肺泡巨噬细胞TLR9-MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤.

戴惠军,潘灵辉,林飞,葛万运,李玮,贺盛 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据

TLR2和 TLR4在牛型结核分枝杆菌诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用

目的:探讨Toll样受体(TLR)2和TLR4在牛型结核分枝杆菌卡介苗(BCG)诱导的人肾小管上皮细胞( HK-2细胞)损伤中的作用。方法:用BCG刺激HK-2细胞,通过荧光定量PCR和Western blotting 方法分别检测TLR2、TLR4、转化生长因子β1( TGF-β1)和趋化因子CX3CL1的表达。将TLR2抗体和TLR4拮抗剂CLI-90分别与BCG共刺激HK-2细胞,通过荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测TGF-β1和CX3CL1的表达水平。结果:BCG刺激HK-2细胞可诱导TLR2、TLR4、TGF-β1和CX3CL1表达上调,TLR2抗体和TLR4拮抗剂可部分抑制BCG引起的TGF-β1和CX3CL1表达上调。结论:BCG可通过激活TLR2和TLR4引起TGF-β1和CX3CL1表达上调,提示TLR2和TLR4介导的信号通路在结核分枝杆菌致肾小管上皮细胞损伤中发挥重要作用。

- 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

生长抑素对内毒素致小鼠急性肺损伤中炎症反应的影响和机制

目的探讨生长抑素(SST)对内毒素致急性肺损伤(ALI)小鼠炎症反应的影响及其机制.方法将72只SPF级雄性ICR小鼠按随机数字表法分为对照组、SST对照组、模型组和SST干预组,每组18只.采用腹腔注射内毒素40 mL/kg制备ALI模型,对照组则给予等量生理盐水;SST干预组于制模后0.5、2、6、12h皮下注射SST(20 μg,20 mL/kg).各组于首次给药后3、8、16h分别取6只小鼠取血后活杀,用烘干法测定肺组织湿/干质量(W/D)比值;光镜下观察肺组织病理学改变;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清SST、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL-6、IL-10)的含量;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白质免疫印迹试验(Westem Blot)检测肺组织Toll样受体4(TLR4)和核转录因子-κBp65(NF-κBp65)的mRNA及蛋白表达.结果对照组与SST对照组小鼠各指标比较差异均无统计学意义.与对照组比较,模型组肺组织W/D比值,血清SST、TNF-α、IL-6、IL-10水平,肺组织TLR4、NF-κBp65的mRNA及蛋白表达均明显升高,其中W/D比值、IL-6、IL-10及TLR4的mRNA和蛋白表达均于16h达峰值[W/D比值:6.32±0.18比4.14±0.14,IL-6(ng/L):673.78±56.13比50.17±7.06,IL-10(ng/L):481.13±40.78比61.71±10.05,TLR4 mRNA:0.740±0.099比0.183±0.021,TLR4蛋白:0.935±0.067比0.222±0.019,均P< 0.05],SST、TNF-α及NF-κBp65的mRNA和蛋白表达均于8h达峰值[SST(ng/L):254.97±38.75比95.87±13.95,TNF-α(ng/L):139.69±19.06比21.90±4.52,NF-κBp65 mRNA:0.753±0.065比0.208±0.029,NF-κBp65蛋白:1.214±0.079比0.303±0.067,均P<0.05].与模型组比较,SST干预组小鼠肺组织损伤程度明显减轻,除血清SST呈持续增加趋势外,其余指标均明显降低[16 h W/D比值:5.21±0.14比6.32±0.18,8 h TNF-α(ng/L):80.48±8.52比139.69±19.06,16 h IL-6(ng/L):394.99±37.17比673.78 ±56.13,16 h IL-10(ng/L):326.95±36.41比481.13±40.78,16 hTLR4 mRNA:0.240±0.028比0.740±0.099,16 h TLR4蛋白:0.618±0.066比0.935±0.067,8 h NF-κBp65mRNA:0.240±0.045比0.753±0.065,8 h NF-κBp65蛋白:0.784±0.041比1.214±0.079,均P<0.05].结论 SST干预后对内毒素诱导的ALI小鼠炎症因子释放及组织因子基因、蛋白表达均起到明显的抑制作用;其机制可能是通过阻断TLR4-NF-κB信号通路,从而减轻肺组织炎症反应.

徐丽艳,刘瑶,韩文文,南超,李冬,洪广亮,赵光举,卢中秋 - 中华危重病急救医学

文章来源：万方数据