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丝状噬菌体pⅧ展示系统表达赭曲霉毒素A模拟表位及应用研究

原文链接：万方

• 作者：

  陈兴龙,徐玲,刘仁荣,裘雪梅,朱立鑫

• 摘要：

  目的传统赭曲霉毒素A(OTA)竞争抗原毒性强、成本高、制备难度大.将OTA模拟表位展示于丝状噬菌体pⅧ表面,获得无毒、易于制备的OTA竞争抗原替代物.方法构建带有OTA模拟表位的重组噬菌粒pC89-COTA,为了提高OTA模拟表位与抗体的结合率,在OTA模拟表位序列5'端引入了肠激酶酶切位点.噬菌粒转化进大肠杆菌XL1-blue后再经野生KM13噬菌体感染,获得带有OTA模拟表位的重组噬菌体.用该噬菌体代替竞争抗原建立OTA的无毒ELISA分析方法.结果成功表达出带有OTA模拟表位的重组噬菌体,经肠激酶酶切的OTA模拟表位噬菌体与OTA抗体的结合效率显著高于未酶切的噬菌体.利用酶切后的噬菌体建立OTA的无毒ELISA分析方法,其最低检出限为100pg/ml,线性范围为250pg/ml~1000pg/ml.进行加标回收实验,回收率为99.8%~112.3%,相对标准偏差为8.19%~11.64%,测试16份市售样品,阳性率为31.25%.结论成功表达了OTA模拟表位噬菌体,建立了OTA的无毒ELISA检测方法.

• 关键词：

  噬菌体展示 噬菌粒 赭曲霉毒素A 酶联免疫吸附测定

• 作者单位：

  江西科技师范大学生命科学院

• 基金项目：

  国家自然科学基金项目(No.30860240)

• 来源期刊：

  卫生研究

• 年，卷(期)：

  2012005