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蚜虫蛋白质组双向电泳体系条件优化

原文链接：万方

• 作者：

  武丽娟,樊永亮,宋月,张战凤,刘小凤,刘同先

• 摘要：

  为优化有效分离蚜虫全蛋白的双向电泳体系,以豌豆蚜Acyrthosiphon pisum(Harris)为材料,比较了不同蛋白提取方法(裂解液提取法、三氯乙酸/丙酮沉淀法、饱和酚抽提法)、蛋白上样量、IPG胶条p H梯度等条件对蚜虫全蛋白双向电泳的影响.结果表明:不同的蛋白提取方法所获得的豌豆蚜全蛋白提取率有显著差异,其中以饱和酚抽提法的提取率最高,为5.34±0.26 mg/g,且所提取的蛋白种类丰富度也优于其它2种方法;当蛋白上样量为100μg时所得蛋白点为1 793±36个,高于其它上样量;相同条件下选用11 cm p H 3~10非线性IPG胶条时所得蛋白点为1 803±42个,优于p H 4~7的IPG胶条.表明采用饱和酚抽提法进行提取蛋白,选用11 cm p H 3~10非线性IPG胶条,以蛋白银染方法、分离胶浓度为12.5%进行双向电泳时最适蛋白上样量为100μg,所得可识别蛋白质点最高,且重复性试验匹配率高,可用于豌豆蚜蛋白质组学研究.

• 关键词：

  蚜虫 蛋白质组 双向电泳 条件优化

• 作者单位：

  西北农林科技大学,西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室,农业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室%西北农林科技大学,西北旱区作物逆境生物学国家重点实验室农,业部西北黄土高原作物有害生物综合治理重点实验室

• 基金项目：

  国家公益性行业(农业)科研专项(20133019)%西北农林科技大学2013年校级大型仪器设备新功能开发项目

• 来源期刊：

  植物保护学报

• 年，卷(期)：

  2014006