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从白屈菜乙醇提取物中分离出的白屈菜碱通过p38-p53和P13K/AKT信号转导通路促进HeLa细胞凋亡

原文链接：万方

• 作者：

  Avijit Paul, Kausik Bishayee, Samrat Ghosh, Avinaba Mukherjee, Sourav Sikdar, Debrup Chakraborty, Naoual Boujedaini, Anisur Rahman Khuda-Bukhsh

• 摘要：

  目的:研究从白屈菜乙醇提取物中分离出的白屈菜碱在诱导HeLa细胞凋亡中的作用及参与其作用的主要信号转导通路.方法:细胞先以不同浓度白屈菜碱处理48h,用噻唑蓝法分析确定半数致死量(medianlethaldose,LD50).用4',6-二脒基-2-苯基吲哚染色,追踪分析核浓染以及DNA损伤和碎片的形态学变化,并用流式细胞术分析检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生以及细胞周期阻滞和线粒体膜电位的变化.用圆二色光谱分析寻找白屈菜碱和小牛胸腺DNA可能的相互作用.用逆转录聚合酶链反应和蛋白免疫印迹法测定p38、p53、蛋白激酶B(proteinkinase B,AKT)、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K)、Janus激酶3(Janus kinase 3,JAK3)、信号转导及转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)等的mRNA和蛋白表达,以及E6、E7癌基因和促凋亡基因、抗凋亡基因的mRNA和蛋白表达.结果:根据白屈菜碱的LD50(30μg/mL),选定3种实验剂量,即22.5、30和37.5μg/mL.结果显示,白屈菜碱抑制了HeLa细胞增殖,诱发其细胞凋亡,表现为ROS的产生,细胞亚G1和G0/G1周期阻滞,线粒体膜电位变化和DNA碎片产生.圆二色光谱分析结果显示白屈菜碱和小牛胸腺DNA间存在有效的相互作用.信号通路的研究显示白屈菜碱通过上调p38、p53和其他促凋亡基因的表达,以及下调AKT、P13K、JAK3、STAT3、E6、E7和其他抗凋亡基因的表达,有效诱发细胞凋亡.结论:从白屈菜中分离出的自屈菜碱能通过改变p38-p53及AKT/P13激酶信号转导通路有效地诱发HeLa细胞凋亡.

• 关键词：

  白屈菜碱 白屈菜 抗肿瘤药 植物 信号转导 细胞凋亡 HeLa细胞 chelidonine Chelidonium majus antineoplastic agents phytogenic signaltransducing apoptosis HeLa cells

• 作者单位：

  Cytogenetics and Molecular Biology Laboratory, Department of Zoology, University of Kalyani, Kalyani 741235, India%Boiron Laboratory, Lyon, France

• 基金项目：

  Partial financial support was received from Boiron Laboratory, Lyon, France for this work.

• 来源期刊：

  中西医结合学报

• 年，卷(期)：

  201210009