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NOD8对H₂O₂诱导的人肝细胞凋亡的影响

原文链接：万方

• 作者：

  郑媛媛,杨文欣,周晗,胡巢凤

• 摘要：

  目的:探讨NOD8对H2O2诱导的人肝细胞L02凋亡的影响.方法:p EGFP-C2及p EGFP-NOD8重组质粒经Jet PRIME介导转染L02细胞;用H2O2诱导细胞凋亡.实验分为p EGFP-C2组、p EGFP-C2+H2O2组和p EGFP-NOD8+H2O2组.采用MTT法检测细胞活性,Western blotting检测细胞NOD8的蛋白表达,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法检测细胞caspase-3活性.结果:通过MTT检测不同浓度(0.2~2 mmol/L)H2O2刺激6 h后的细胞活性,确定1 mmol/L H2O2为诱导细胞凋亡的剂量.Western blotting检测结果显示,转染p EGFP-NOD8质粒的细胞NOD8蛋白表达明显增加.Hoechst 33342染色法观察发现,p EGFPC2+H2O2组有较多细胞出现强蓝色荧光细胞核,细胞凋亡较多,而p EGFP-NOD8+H2O2组细胞凋亡明显减少.流式细胞术分析显示,p EGFP-C2+H2O2组的细胞凋亡率明显升高,p EGFP-NOD8+H2O2组的细胞凋亡率则显著下降.p EGFP-C2+H2O2组细胞的caspase-3活性明显升高,而p EGFP-NOD8+H2O2组细胞的caspase-3活性显著下降.结论:NOD8可抑制H2O2诱导的L02细胞凋亡,其作用机制可能与NOD8抑制细胞的caspase-3活性有关.

• 关键词：

  L02细胞 过氧化氢 NOD8 半胱氨酸蛋白酶-3

• 作者单位：

  暨南大学医学院病理生理学系,国家中医药管理局病理生理实验室

• 基金项目：

  广东省自然科学基金资助项目(No.S2012010008161)%暨南大学"211工程"三期预研项目

• 来源期刊：

  中国病理生理杂志

• 年，卷(期)：

  2014011