人大肠癌细胞系HCTll6中Sirt1基因敲除细胞株的构建

原文链接:万方

  • 作者:

    贾一帆,张慧慧,王卫星,杜润蕾

  • 摘要:

    目的利用AAV介导的体细胞基因敲除技术,在人大肠癌细胞系HCTll6中对靶基因Sirt1进行敲除,达到基因沉默的目的.方法构建Sirtl打靶载体,通过病毒包装、感染、药物筛选、PCR鉴定、Westernblotting鉴定等步骤获得Sirt1基因敲除的细胞株.结果经过筛选和鉴定后获得两个Sirtl-/-阳性克隆,成功构建HCTll6Sirtl.一细胞系.结论通过体细胞敲除技术,我们成功地获得Sirtl敲除肠癌细胞株.

  • 关键词:

    体细胞基因敲除 同源重组Sirt l Somatic cell line gene knockout Homologous recombination Sirtl

  • 作者单位:

    武汉大学人民医院麻醉科,430060%武汉大学生命科学学院,430072

  • 基金项目:

    国家重大研究计划项目:科技部“973”基金资助项目(2011CB944404);湖北省自然科学基金资助项目(2010CDB08704)

  • 来源期刊:

    医学研究杂志

  • 年,卷(期):

    201241005

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