原文链接:万方
张文峰,张琼宇,邵红伟,吴凤麟,王腾,黄树林
目的:利用5型腺病毒载体转染人T淋巴细胞,对其转染T淋巴细胞的效率以及细胞毒性进行分析.方法:选取T淋巴瘤Jurkat细胞及原代T细胞,腺病毒按感染复数(multiplicity of infection,MOI)为20、50、100、200和400对其转染,转染48 h后利用流式细胞术检测转染效率;选取腺病毒转染后的不同时点,利用碘化丙啶染色法分析转染对于细胞周期的影响;利用Annexin V/7-AAD染色法分析转染诱导细胞凋亡情况;利用台盼蓝染色计数法分析转染对活细胞数目的影响.结果:5型腺病毒载体转染T淋巴瘤的效率最高,转染效率随着MOI值的增大而增加;CD8+T细胞和CD4+T细胞的转染效率大致相同,T细胞经刺激活化后,CD8+T细胞的转染效率下降;病毒转染未导致明显细胞凋亡;病毒转染对细胞周期与活细胞数目没有显著影响.结论:5型腺病毒载体转染T细胞呈现较低细胞毒性.
广东药学院生命科学与生物制药学院,广东广州510006;广东省生物技术候选药物研究重点实验室,广东广州510006%永州职业技术学院基础医学部,湖南永州,425100
科技部“重大新药创制”科技重大专项“十一五”计划项目(2009ZX09103-708)%国家自然科学基金资助项目(31100664,31300737,81303292)%东莞市科技计划项目(2011105102027)
中国病理生理杂志
201430002