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锌指蛋白ZBTB20基因重组腺病毒表达载体的构建和鉴定

原文链接：万方

• 作者：

  朱晓彤,杨瑞,周露婷,张晔,李玲,章卫平,施广霞,陈玉霞

• 摘要：

  目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能.方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-ZBTB20,之后在293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒滴度进行检测;采用肝脏组织特异性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝细胞和肝脏组织模型,分别于离体和在体水平鉴定所制备的重组腺病毒Ad-ZBTB20介导的ZBTB20蛋白表达情况;并采用报告基因技术检测过表达的ZBTB20蛋白的功能活性.结果:成功制备了锌指蛋白ZBTB20重组腺病毒,该重组腺病毒感染原代肝细胞和小鼠肝脏组织能过表达ZBTB20蛋白,并且此ZBTB20蛋白能抑制其下游靶基因甲胎蛋白的转录.结论:所构建的ZBTB20重组腺病毒可以介导ZBTB20的过表达并具备转录调节活性,为今后研究ZBTB20的相关生物学功能奠定了基础.

• 关键词：

  含锌指和BTB区蛋白20 重组腺病毒 甲胎蛋白类 转录调节

• 作者单位：

  第二军医大学基础部病理生理学教研室,上海200433;大连医科大学病理生理学教研室,辽宁大连116044%第二军医大学基础部病理生理学教研室,上海,200433%大连医科大学病理生理学教研室,辽宁大连,116044

• 基金项目：

  国家自然科学基金资助项目(81130084,31025013)

• 来源期刊：

  中国病理生理杂志

• 年，卷(期)：

  201430005