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心肌组织特异性高表达核仁素转基因小鼠的构建与鉴定

原文链接：万方

• 作者：

  刘艳娟,周斌,蒋碧梅,童中艺,孙丽,李媛彬,肖献忠

• 摘要：

  目的:构建并鉴定心肌组织特异性高表达核仁素( Ncl )的转基因小鼠,为从整体水平上研究核仁素对心肌功能的影响及其发挥心肌保护作用的机制提供动物模型。方法:采用基因重组法将小鼠核仁素基因的全长cDNA插入含心肌细胞特异性启动子的Alpha-MyHC clone 26载体,构建Alpha-MyHC clone 26-Ncl重组载体,通过双酶切及基因测序鉴定其正确性;采用PCR鉴定阳性小鼠并用Western blotting法观察转基因小鼠中核仁素的表达情况,采用组织切片及HE染色法观察转基因小鼠心肌组织形态;测量心脏重量指数和左室压最大上升速率,观察核仁素在心肌组织高表达后对小鼠心脏形态功能是否有影响。结果: PCR法观察显示获得4只阳性小鼠(51、52、56和86,其中52和86系繁殖良好),Western blotting结果表明转基因小鼠的核仁素表达量明显高于野生鼠,HE染色等结果表明核仁素对心肌形态学、心脏/体重比值及心功能无明显影响。结论:成功制备了心肌组织特异性高表达核仁素的转基因小鼠,与野生型小鼠相比,转基因小鼠心肌形态及心功能无明显差异。

• 关键词：

  核仁素 转基因 心肌 小鼠

• 作者单位：

  中南大学湘雅医学院病理生理教研室,湖南长沙,410078

• 基金项目：

  国家自然科学基金资助项目(81170113)

• 来源期刊：

  中国病理生理杂志

• 年，卷(期)：

  2014007