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游离脂肪酸混合物对肝细胞脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响

原文链接：万方

• 作者：

  王辉,陈骁,项夏霖,彭鑫,王苑芳,刘填桂,黄树林,邵红伟

• 摘要：

  目的:研究游离脂肪酸( FFA)混合物对肝细胞L-02的脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响。方法:正常肝细胞L-02分别用正常培养基和0.5、1、2 mmol/L FFA混合物(油酸和软脂酸的比例为2∶1)培养24 h后,尼罗红染液室温避光染色,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪确定细胞内脂质堆积情况。组织细胞酶法测定试剂盒测定细胞内甘油三酯含量。 MTT法分析细胞存活率,Annexin V-PI凋亡检测试剂盒分析肝细胞的凋亡情况,丙氨酸氨基转移酶( ALT)和天冬氨酸氨基转移酶( AST)测定试剂盒分别检测培养液中ALT和AST活性。实时定量PCR技术检测脂代谢相关的脂肪分化相关蛋白( ADRP )和固醇调节元件结合蛋白1( SREBP-1)的mRNA表达情况。结果:各浓度FFAs混合物均可剂量依赖性增加肝细胞脂肪堆积和肝细胞甘油三酯含量,且1 mmol/L FFA混合物可增高肝细胞的甘油三酯含量2.6倍,与非酒精性脂肪肝病人的变化基本相同。2 mmol/L FFA混合物可降低肝细胞L-02细胞存活率并诱导细胞凋亡,而0.5 mmol/L和1 mmol/L FFA混合物对细胞无明显影响。与对照组相比,各浓度FFA混合物对细胞上清中ALT和AST活性无明显影响。1 mmol/L FFA混合物作用后可分别上调肝细胞的ADRP和SREBP-1 mRNA的表达2.660和2.758倍。结论: FFA混合物可诱导肝细胞L-02脂肪变性且2 mmol/L FFA混合物可造成轻度细胞损伤。脂代谢相关基因ADRP和SREBP-1表达上调与FFA混合物诱导的脂肪变性相关。

• 关键词：

  非酒精性脂肪肝病 游离脂肪酸 脂毒性 脂肪分化相关蛋白 固醇调节元件结合蛋白1

• 作者单位：

  广东省生物技术候选药物研究重点实验室,广东药学院生命科学与生物制药学院,生物制药研究所,广东广州510006

• 基金项目：

  国家自然科学基金资助项目(No．81303292；No．31100664；No．31300737)；广东省自然科学基金资助项目(S2012040007958)

• 来源期刊：

  中国病理生理杂志

• 年，卷(期)：

  2014007