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硫代磷酸化修饰的反义 TGF-β1寡核苷酸抑制血管损伤后内膜增殖

原文链接：万方

• 作者：

  林志鸿,谢良地,吴可贵,李庚山,蔺佩鸿

• 摘要：

  目的:探讨反义转化生长因子β1(TGF-β1)寡核苷酸对血管损伤后血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转变的影响及对内膜增殖的作用。方法:在跨过TGF-β1 cDNA序列的起始密码区ATG范围内,设计含15个碱基、无修饰或硫代磷酸化修饰的反义TGF-β1寡核苷酸( AS TGF-β1)及对照的正义(与反义寡核苷酸互补)寡核苷酸( S TGF-β1)。球囊导管损伤SD大鼠颈总动脉,术后7 d取出正常或损伤的血管进行VSMCs的培养, RT-PCR及蛋白印迹分别检测VSMCs生物学标志平滑肌22α蛋白( SM22α)、基质Gla蛋白和骨桥蛋白,以及TGF-β1和纤维连结蛋白(fibronectin,FN)mRNA和蛋白质的表达。采用ALZET 泵皮下注射硫代磷酸化修饰AS TGF-β1及S TGF-β1(90μg· kg-1· d-1),连续给药28 d后测定血管内膜与中膜的面积比(I/M)。结果:(1)AS TGF-β1对血管损伤后VSMCs TGF-β1 mRNA表达并无明显作用,但呈浓度依赖性抑制TGF-β1蛋白质的表达,而S TGF-β1不影响TGF-β1mRNA和蛋白质的表达。(2)AS TGF-β1呈浓度依赖性抑制血管损伤后VSMCs DNA的合成,而不管是AS TGF-β1还是S TGF-β1对正常VSMCs DNA的合成均无明显的量效作用;同时AS TGF-β1显著抑制了血管损伤后VSMCs FN的合成。(3)AS TGF-β1显著促进了VSMCs SM22αmRNA的表达,但抑制了基质Gla蛋白和骨桥蛋白mRNA的表达,这种相反的作用在0.01及0.1μmol/L的水平最为明显。(4)硫代磷酸化修饰的AS TGF-β1治疗28 d后,显著抑制了颈动脉损伤后新生内膜的增殖,I/M比对照组下降了68%。结论:AS TGF-β1特异性抑制了VSMCs TGF-β1蛋白的表达,抑制血管损伤后VSMCs增殖及合成、分泌FN,减轻血管损伤后新生内膜的增殖。上述作用可能与逆转血管损伤后VSMCs的表型转变有关。

• 关键词：

  转化生长因子β1 反义寡核苷酸 血管损伤 平滑肌细胞

• 作者单位：

  福建医科大学附属第一医院急诊科,福建福州350005; 福建省高血压研究所,福建福州350005%福建医科大学附属第一医院干部病房; 福建省高血压研究所,福建福州350005%武汉大学人民医院心内科,湖北武汉,430000%福建医科大学附属第一医院急诊科,福建福州,350005

• 基金项目：

  福建省教育厅高校新世纪人才支持计划项目(NCETFJ-0609)

• 来源期刊：

  中国病理生理杂志

• 年，卷(期)：

  2014008