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MUC1 mRNA 体外负载树突状细胞诱导细胞毒性T 细胞对非小细胞肺癌的杀伤作用

原文链接：万方

• 作者：

  巴俊慧,吴本权,王艳红,刘慧,杨洋,石云锋,罗进梅,张天托

• 摘要：

  目的:将体外扩增的黏蛋白1( MUC1) mRNA转染入成熟的树突状细胞( DCs ),观察其体外诱导的特异性抗肿瘤效应。方法:将分离提纯的单核细胞培养诱导为DC并用流式细胞术鉴定。构建pcDNA3.1(+)-MUC1质粒,体外转录为mRNA,电穿孔法转染DCs。定量PCR检测转染的DCs中MUC1的表达;MTT法检测T细胞增殖情况;流式细胞术检测CD8+在T细胞的表达;LDH释放法测定细胞毒性,ELISA检测IFN-γ分泌水平。结果:流式细胞术结果表明成熟DCs标志表型的表达明显高于对照组。定量PCR结果说明转染后的DCs MUC1 mR-NA相对表达量增高。转染组DCs与T细胞按1∶10共培养时,刺激增殖能力明显高于未转染组,且CD8+T细胞表达率高于未转染组,诱导产生特异性的细胞毒性T细胞杀伤表达MUC1蛋白的靶细胞,而未转染组的杀伤作用较弱。转染组DCs与T细胞共培养的上清中IFN-γ的分泌水平高于未转染组。结论:电穿孔法可以将MUC1 mRNA成功转染至DCs,产生特异性杀伤效应,为以MUC1为靶点的非小细胞肺癌的免疫治疗提供实验和理论依据。

• 关键词：

  树突状细胞 黏蛋白1 电转染 抗肿瘤免疫 肺肿瘤

• 作者单位：

  中山大学附属第三医院 呼吸内科,广东广州,510630%中山大学附属第三医院 呼吸内科,广东广州510630; 中山大学附属第三医院 内科ICU,广东广州510630%中山大学附属第三医院 内科ICU,广东广州,510630

• 基金项目：

  广东省科技计划(No．2011B061300009)；国家自然科学基金资助项目(No．81170004)；国家自然科学青年基金资助项目(81000986)

• 来源期刊：

  中国病理生理杂志

• 年，卷(期)：

  2014009