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RNA干扰技术沉默CDC25a基因对人肝癌细胞HepG2增殖的影响

原文链接：万方

• 作者：

  李薇,曹骥,周玲丽,罗旺,杨春,骆成飘,李瑗,苏建家

• 摘要：

  目的:研究细胞分裂周期素25a( cell division cycle 25a,CDC25a)基因沉默后对于人肝癌细胞系HepG2增殖的影响。同时探讨该影响发生的可能作用机制。方法:使用RNA干扰技术沉默人肝癌HepG2细胞的CDC25a基因,采用实时荧光定量PCR技术检测肝癌细胞中的CDC25a及其作用基因cyclin E及CDK2的mRNA表达水平,Western blotting检测CDC25a的蛋白表达水平,并采用MTT法、Giemsa染色法及流式细胞技术检测细胞的增殖情况。结果:CDC25a的mRNA及蛋白表达水平在RNA沉默组细胞中的表达低于阴性对照组及正常对照组细胞(P<0.05)。 Cyclin E及CDK2的mRNA表达水平在沉默组低于阴性对照及正常对照组(P<0.05)。 MTT法、Giemsa染色法结果显示沉默组细胞增殖能力低于阴性对照组及正常对照组细胞( P<0.05),流式细胞技术结果显示沉默组细胞阻滞在G1期。结论:LV-CDC25a-RNAi重组体感染HepG2细胞可以有效抑制CDC25a基因的表达,使人肝癌HepG2细胞增殖受到抑制,提示CDC25a基因可能是肝癌治疗的关键靶点。

• 关键词：

  基因 CDC25a RNA干扰 肝肿瘤

• 作者单位：

  广西壮族自治区肿瘤防治研究所,广西南宁,530021

• 基金项目：

  国家自然科学基金资助项目(No．30960428)；广西科技基础条件平台建设项目(No．10-108-25)；广西科学基金资助项目(2013GXNSFAA019210)

• 来源期刊：

  中国病理生理杂志

• 年，卷(期)：

  2014012