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结肠癌干细胞样细胞的体外培养、鉴定及n-3多不饱和脂肪酸对结肠癌干细胞样细胞的抗增殖作用

原文链接：万方

• 作者：

  方仕,龙健婷,张冰,杨婷,卢味,李鹤平,石汉平

• 摘要：

  目的:采取无血清培养法培养出SW620细胞球,并对细胞球细胞进行干细胞鉴定;在细胞水平研究n-3多不饱和脂肪酸( n-3 PUFAs)对结肠癌干细胞样细胞的作用。方法:正常培养人结肠癌细胞株SW620并使其逐步适应无血清培养条件,经无血清培养1周后收集SW620细胞球。用免疫荧光法检测胚胎干细胞标志物SSEA-1和TRA-1-81;采用real-time PCR的方法检测干细胞相关基因Sox-2和Oct-4的表达情况;对比SW620贴壁细胞和干细胞样细胞( CSCLC)在软琼脂上的克隆形成能力;采用裸鼠移植瘤模型比较2种细胞的成瘤能力;用MTS法对比2种细胞在递增浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)或mitomycin C处理下的生长抑制情况;用MTS法、Annexin V/PI染色和台盼蓝染色分别观察递增浓度二十二碳六烯酸( DHA)和二十碳五烯酸( EPA)作用于SW620 CSCLC后细胞生长抑制情况、凋亡情况和死亡情况;MTS法检测5-FU或mitomycin C联合n-3 PUFAs对结肠癌CSCLC增殖的影响。结果:无血清培养法成功从SW620中培养出细胞球。细胞球细胞高表达SSEA-1和TRA-1-81并一过性表达Sox-2和Oct-4基因;对5-FU及mitomycin C相对抵抗;在软琼脂上克隆形成率及在裸鼠皮下的成瘤率均显著高于贴壁细胞,表明这些细胞具有干细胞特性,即为来自于SW620的CSCLC。 DHA和(或) EPA作用于SW620 CSCLC能抑制细胞生长、诱导细胞凋亡,并能增强5-FU及mitomycin C对其抑制作用。结论:无血清培养法能够从SW620细胞中培养出具有干细胞特性的细胞,它们具有高克隆形成能力及高致瘤性,对化疗药物相对抗拒;DHA和EPA能够诱导SW620来源CSCLC发生凋亡并增强化疗药物的抗肿瘤活性。

• 关键词：

  结肠肿瘤 肿瘤干细胞 无血清培养 n-3多不饱和脂肪酸 化学治疗

• 作者单位：

  中山大学附属第一医院 临床营养科,广东广州,510080%中山大学附属第一医院 肿瘤科,广东广州,510080%中山大学附属第一医院 核医学科,广东广州,510080%中山市人民医院重症治疗科,广东中山,528400%中山大学附属第一医院 普通外科,广东广州,510080

• 基金项目：

  国家“十一·五”科技支撑计划( No．2008BAD91B03)；广东省科技计划社会发展项目( No．2013B021800284)；广东省教育部产学研结合项目(2011B090400558)

• 来源期刊：

  中国病理生理杂志

• 年，卷(期)：

  2014012