微小RNA-146a调控肺泡巨噬细胞中白细胞介素-1受体相关激酶1和肿瘤坏死因子受体相关因子6的表达

原文链接:万方

  • 作者:

    黄萍,刘芬,曾振国,黄彩雪,邵强,夏亮,揭克敏,钱克俭

  • 摘要:

    目的 观察转染微小RNR-146a(miR-146a)对肺泡巨噬细胞中白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)表达的影响,为探讨miR-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控机制奠定基础.方法 将体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为miR-146a模拟物(mimic)组和阴性对照组,分别加入50 nmol/L Pre-miR miR-146a前体和Cy3标记的Pre-miR阴性对照进行转染,转染24 h后收集细胞,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-146a、IRAK-1 mRNA、TRAF-6mRNA的表达,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞中IRAK-1和TRAF-6的蛋白表达.结果 miR-146amimic组miR-146a表达较阴性对照组上调了(24.55±6.14)倍(t=-6.643,P=0.003).细胞中IRAK-1和TRAF-6的mRNA表达分别为阴性对照组的(1.16±0.10)倍(t=2.701,P=0.054)和(1.19±0.16)倍(t=2.032,P=0.112).而IRAK-1和TRAF-6的蛋白表达分别为阴性对照组的73.0%(t=-9.353,P=0.001)和64.1%(t=-6.839,P=0.002).结论 miR-146a mimic能成功转染肺泡巨噬细胞NR8383; miR-146a过表达后,能有效下调肺泡巨噬细胞中IRAK-1和TRAF-6的表达,其机制可能是在蛋白翻译水平的抑制.

  • 关键词:

    微小RNA-146a 白细胞介素-1受体相关激酶1 肿瘤坏死因子受体相关因子6 肺泡巨噬细胞 炎症反应

  • 作者单位:

    330006 江西,南昌大学第一附属医院,国家药物临床试验机构%南昌大学第一附属医院重症医学科, 江西,330006%南昌大学医学院生物化学与分子生物学教研室

  • 基金项目:

    国家自然科学基金(81060152)%国家自然科学基金(81160233)%国家自然科学基金青年基金项目(81101410)

  • 来源期刊:

    中华危重病急救医学

  • 年,卷(期):

    201426005

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