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变形链球菌pacA和gtfB-eat与etxB嵌合表达质粒的构建及表达

原文链接：万方

• 作者：

  张剑,赵秀,杨德琴,顾瑜,吴家媛,刘建国

• 摘要：

  目的:构建含变形链球菌表面蛋白A区编码基因(pacA)、葡糖基转移酶催化区编码基因(gtfB-cat)及霍乱毒素B亚单位编码基因(ctxB)的嵌合表达质粒并表达目的蛋白.方法:将目的基因pacA、gtfB-cat、ctxB克隆至原核克隆载体pET32-a(+)构建嵌合质粒pET-pacA-cat-ctxB,将其转入表达宿主菌E.coliBL21(DE3),并测量其表达情况.结果:构建的重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,证实目的基因均正确插入到载体pET'32a(+)中,插入的相位正确,未改变目的基因的阅读框架,经诱导后表达目的蛋白,分子质量大小与预期-致.结论:成功构建了嵌合质粒pET-pa-cA-cat-ctxB,且它们均在原核细胞内获得正确表达.

• 关键词：

  链球菌 酿脓 糖基转移酶类 霍乱毒素 膜蛋白质类 质粒 嵌合状态 原核细胞 streptococcus pyogenes glycosyltransferases cholera toxin membrane proteins plasmids chime- rism prokaryotic cells

• 作者单位：

  遵义医学院附属口腔医院,563003%沈阳医学院 ,563003%重庆医科大学附属口腔医院,563003

• 基金项目：

  国家自然科学基金资助项目（项目编号：30160086）;贵州省科学技术基金项目（项目编号：黔科合j字[200612122号）;遵义医学院硕士启动基金项目（项目编号：遵医院发[2005]033号）

• 来源期刊：

  天津医药

• 年，卷(期)：

  201240006