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Ag85B慢病毒抑制人支气管上皮细胞TSLP及其受体的表达

目的:研究结核分枝杆菌抗原85B(Ag85B)慢病毒对正常人支气管上皮细胞(NHBEC)表达胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)和其受体TSLPR的影响,探究Ag85B抑制哮喘气道炎症的机制.方法:将Ag85B基因重组质粒转入293T细胞,构建携带Ag85B和EGFP报告基因的慢病毒载体p LVXIRES-Neo-EGFP-Ag85B(Ag85B慢病毒).用鉴定后的Ag85B慢病毒感染HEK293细胞,计算滴度并观察感染效率.利用Lipofectamine? 2000使Ag85B慢病毒感染体外培养NHBEC,设立空病毒感染和空白对照组.Real-time PCR和Western blotting检测Ag85B、TSLP和TSLPR mRNA和蛋白表达水平.结果:成功构建Ag85B慢病毒感染NHBEC体系,Ag85B慢病毒感染NHBEC 48 h后,荧光显微镜下可见强绿色荧光蛋白表达,细胞生长状态良好,病毒滴度为2*1011TU/L,感染效率达到90%以上.Real-time PCR和Western blotting结果显示Ag85B慢病毒成功感染NHBEC,可见相应Ag85B mRNA和蛋白表达.与空病毒感染和空白对照组比较,Ag85B慢病毒感染组TSLP mRNA表达有下降趋势,TSLPR mRNA与TSLP和TSLPR的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05).结论:Ag85B慢病毒感染NHBEC可以抑制NHBEC的TSLP和TSLPR的表达,提示Ag85B可能通过靶向阻滞TSLP-TSLPR途径抑制哮喘气道炎症.

房祥峰,钱江,孟锦绣,李东风,吴健 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

TLR2和 TLR4在牛型结核分枝杆菌诱导的肾小管上皮细胞损伤中的作用

目的:探讨Toll样受体(TLR)2和TLR4在牛型结核分枝杆菌卡介苗(BCG)诱导的人肾小管上皮细胞( HK-2细胞)损伤中的作用。方法:用BCG刺激HK-2细胞,通过荧光定量PCR和Western blotting 方法分别检测TLR2、TLR4、转化生长因子β1( TGF-β1)和趋化因子CX3CL1的表达。将TLR2抗体和TLR4拮抗剂CLI-90分别与BCG共刺激HK-2细胞,通过荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测TGF-β1和CX3CL1的表达水平。结果:BCG刺激HK-2细胞可诱导TLR2、TLR4、TGF-β1和CX3CL1表达上调,TLR2抗体和TLR4拮抗剂可部分抑制BCG引起的TGF-β1和CX3CL1表达上调。结论:BCG可通过激活TLR2和TLR4引起TGF-β1和CX3CL1表达上调,提示TLR2和TLR4介导的信号通路在结核分枝杆菌致肾小管上皮细胞损伤中发挥重要作用。

- 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

Smad锚着蛋白在高糖诱导人肾小管上皮细胞细胞外基质沉积中的作用

目的:阐明Smad锚着蛋白(Smad anchor for receptor activation,SARA)在高葡萄糖诱导的人近端肾小管上皮细胞系(HK-2细胞)细胞外基质(ECM)沉积中的作用及分子机制,探讨以SARA为靶点抑制高葡萄糖诱导的HK-2细胞ECM沉积的策略.方法:用高浓度葡萄糖(30 mmol/L D-葡萄糖)刺激HK-2细胞,通过Western Blot及实时定量PCR( Real-time PCR)检测纤维连接蛋白(FN)和I型胶原(Col I),进而检测转化生长因子β1( TGF-β1)、Smad2、Smad3、p-Smad2、p-Smad3的表达变化,通过细胞免疫荧光、Western Blot、Real-time PCR检测SARA的表达变化;分别转染全长SARA质粒[SARA(WT)]及敲除SBD结构域的SARA质粒[SARA(dSRD)],检测转染后高糖诱导HK-2细胞FN及Col I表达的变化.结果:Western Blot及Real-time PCR结果显示,30mmol/L D-葡萄糖刺激后,HK-2细胞Col I蛋白及mRNA表达呈时间依赖性升高.高糖可诱导TGF-β1、Smad3蛋白及其mRNA表达呈时间依赖性上调;Smad2 mRNA表达呈时间依赖性上调,而其蛋白表达呈时间依赖性下调;高糖可促进Smad2和Smad3磷酸化,但Smad3的活化时间更长.而SARA的蛋白及mRNA表达呈时间依赖性降低,细胞免疫荧光结果亦证实高糖刺激后SARA表达下降.与高糖组相比,转染SARA(WT)可使HK-2细胞FN和 Col I表达下调;转染SARA (dSBD)对高糖诱导的HK-2细胞FN和ColI表达无明显影响.结论:高糖诱导的HK-2细胞ECM沉积过程中,TGF-β1信号通路活化,SARA的表达下调;过表达SARA可能通过上调Smad2的蛋白表达,抑制TGF-β31信号传导,从而减少高糖诱导的HK-2细胞ECM分泌.

凌光辉,唐文彬,孙林,彭佑铭,段绍斌,刘虹,李瑛,刘映红,刘伏友 - 肾脏病与透析肾移植杂志

文章来源：万方数据

Claudins蛋白及其在急性肾损伤中的研究进展

紧密连接蛋白由多种跨膜蛋白共同构成,包括claudin、occludin和连接粘附分子(JAMs),以及相应的适应蛋白和粘连蛋白如ZO-1、ZO-2、ZO-3、菌环蛋白等外周胞浆蛋白组成[1].紧密连接不仅能调控离子从细胞一侧扩散到另一侧,还能阻止细胞膜顶端和基底侧面成分的相互混合,对保持细胞的极性有重要作用,而且参与细胞增殖、分化的调节.正常肾小管上皮细胞最重要的特性是具有极性和紧密连接,目前认为在急性肾损

张良,李志辉 - 儿科药学杂志

文章来源：万方数据

糖尿病大鼠肾脏组织中XBP-1 s和ADRP的表达

目的:探索糖尿病大鼠肾脏拼接型X盒子结合蛋白1(spliced X-box binding protein-1, XBP-1s)和脂肪分化相关蛋白( adipose differentiation related protein, ADRP)在糖尿病大鼠肾脏组织中的表达及二者表达的相关性。方法腹腔注射STZ成功构建糖尿病大鼠模型,正常喂养2个月后,采用免疫组化和Western blot技术检测大鼠肾脏组织中XBP-1s和ADRP的表达。结果 XBP-1s和ADRP表达均定位于肾小管上皮细胞,对照大鼠相比,糖尿病大鼠肾小管上皮细胞中XBP-1s和ADRP表达均显著增高,分别升高2.017倍和1.544倍,差异有统计学意义(t=2.648、2.741,P<0.05)。进一步行相关性分析显示:大鼠肾脏组织中XBP-1s表达增强往往伴随着ADRP的表达增强(相关系数为0.723,P<0.05)。结论 XBP-1s表达升高可能是导致糖尿病大鼠肾脏组织中ADRP上调的因素之一。

朱琳,郝军,赵松,赵雪,陈宁,郑书深,段惠军 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

原发性肝细胞癌中干细胞标志物的表达与上皮细胞-间质转化的关系

目的探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中肝干细胞标志物的表达及其与上皮细胞-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系.方法采用免疫组化法检测72例HCC中肝干细胞标志物CK19、EpCAM、CD133、CD90的表达及其与EMT相关蛋白E-cadherin、vimentin和Snail的关系.结果 HCC组织中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率分别为31.9%(23/72)、40.3% (29/72)、51.4% (37/72)、41.7%(30/72),有镜下癌栓和门静脉癌栓组中CK19、EpCAM、CD133、CD90阳性率均高于无镜下癌栓和无门静脉癌栓组,Ⅲ+Ⅳ期、肿瘤数目多发的HCC中EpCAM、CD133、CD90阳性率高于Ⅰ+Ⅱ期和单发的HCC;<46岁、组织学Ⅲ+Ⅳ级、血清AFP≥350 ng/ml的HCC中CK19阳性率高于其相应对照组.E-cadherin与其余两种EMT标志物均呈负相关(vimentin:r=-0.572,P=0.004;Snail:r=-0.597,P=0.003),CK19、Ep-CAM、CD90阳性HCC组中vimentin阳性强度均高于阴性组,CD133阳性HCC组中E-cadherin阳性强度低于CD133阴性组,vimentin、Snail阳性强度均高于CD133阴性组.结论与CK19、EpCAM、CD90相比,CD133阳性的肝癌干细胞与EMT的关系更加密切,CD133可作为同时针对HCC肝干细胞和EMT的治疗靶点.

徐军,胡勇,王健,王星星,程兰兰,余宏宇 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

1050例气管支气管异物临床诊治分析

目的:探讨气管支气管异物的临床特征,提高诊治率.方法:回顾性分析1 050例气管支气管异物患者的临床资料,分析患者的年龄、性别、病史、异物部位、种类及并发症等.1 050例患者中,确诊为气管支气管异物者949例,其中13例在术前将异物咳出,余936例均在全身麻醉下行硬质支气管镜探查及异物取出术.结果:手术936例,成功932例(99.6%),并发症1例(0.1%).结论:异物吸入史、胸部听诊、胸部透视纵隔摆动是诊断气管支气管异物的简便而有效的方法.气管支气管三维CT重建技术有助于疑难患者的甄别.异物取出术中气道管理、黏膜充分麻醉是手术成功的关键.

丁赞,李娜 - 临床耳鼻咽喉头颈外科杂志

文章来源：万方数据

小细胞肺癌合并异位促肾上腺皮质激素综合征1例

异位促肾上腺皮质激素综合征(ectopic adrenocorticotropic hormone syndrome,EAS)是库欣综合征的一种特殊类型,是一种典型的副癌综合征,它是由垂体以外的肿瘤组织分泌过量的有生物活性的促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH),刺激肾上腺皮质增

王旭,李薇,李恩喜,尹威民,马克威 - 临床荟萃

文章来源：万方数据

无痛苦经喉罩纤维支气管镜检查在ICU的临床应用

目的:探讨无痛苦经喉罩纤维支气管镜(纤支镜)检查在ICU危重患者的应用价值.方法:ICU危重患者68例,随机分为Ⅰ组(普通组)和Ⅱ组(喉罩组),Ⅰ组直接经鼻腔至气管行纤支镜检查,Ⅱ组经喉罩至气管行纤支镜检查.连续监测患者检查前、麻醉插入喉罩后、检查时、撤机前、撤机拔除喉罩后的ECG、BP、HR、SPO2以及检查前后患者动脉血气分析( PaO2、PCO2、pH ),同时记录检查时间.结果:两组共行68例纤支镜检查及镜下治疗,包括纤支镜引导下气管内吸痰、支气管灌洗等,Ⅰ组患者检查治疗时表情痛苦,体动反应强烈,检查治疗时间延长.Ⅱ组患者检查治疗时生命体征平稳,检查时间明显缩短,检查治疗充分,无明显并发症,患者乐于接受.结论:无痛苦经喉罩纤支镜在ICU患者的临床应用安全、有效.

揭红英,李云祥,叶纪录 - 陕西医学杂志

文章来源：万方数据

大鼠萎缩腮腺中肌上皮细胞增殖状态的观察

目的采用免疫组化双染技术观察大鼠腮腺主导管结扎后萎缩腺体内肌上皮细胞(myoepithelial cell, MEC)的增殖变化规律.方法采用Wistar大鼠建立腮腺主导管结扎动物模型,结扎大鼠右侧腮腺主导管诱导腺体萎缩,HE染色观察正常腮腺及主导管结扎后1、3、5、7、14、21、30、60、90、120、150、180天萎缩性腮腺的组织学变化,采用免疫组化双重染色法定量分析MEC在腮腺萎缩不同时间点的数量、增殖率及分布情况.结果 HE染色示:主导管结扎后,腮腺腺泡细胞出现凋亡消失,大量导管样结构形成,纤维组织增生并伴有炎性细胞浸润.免疫组化染色示:导管结扎后第3天,MEC发生快速增殖,5天时增殖率达到顶峰,随后MEC增殖率降低,30~150天时MEC增殖率均维持较低水平,180天时难以观察到增殖的MEC且MEC细胞总数显著减少.结论结扎腮腺导管诱导腺体萎缩的过程中,MEC在萎缩早期表现出较强的增殖能力,5天时达到顶峰,随后增殖活力下降,30~150天MEC增殖活性均处较低水平,180天时已观察不到增殖的MEC.

左金华,刘多文,朱玉红,王丽芳 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据