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硫代磷酸化修饰的反义 TGF-β1寡核苷酸抑制血管损伤后内膜增殖
目的:探讨反义转化生长因子β1(TGF-β1)寡核苷酸对血管损伤后血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转变的影响及对内膜增殖的作用。方法:在跨过TGF-β1 cDNA序列的起始密码区ATG范围内,设计含15个碱基、无修饰或硫代磷酸化修饰的反义TGF-β1寡核苷酸( AS TGF-β1)及对照的正义(与反义寡核苷酸互补)寡核苷酸( S TGF-β1)。球囊导管损伤SD大鼠颈总动脉,术后7 d取出正常或损伤的血管进行VSMCs的培养, RT-PCR及蛋白印迹分别检测VSMCs生物学标志平滑肌22α蛋白( SM22α)、基质Gla蛋白和骨桥蛋白,以及TGF-β1和纤维连结蛋白(fibronectin,FN)mRNA和蛋白质的表达。采用ALZET 泵皮下注射硫代磷酸化修饰AS TGF-β1及S TGF-β1(90μg· kg-1· d-1),连续给药28 d后测定血管内膜与中膜的面积比(I/M)。结果:(1)AS TGF-β1对血管损伤后VSMCs TGF-β1 mRNA表达并无明显作用,但呈浓度依赖性抑制TGF-β1蛋白质的表达,而S TGF-β1不影响TGF-β1mRNA和蛋白质的表达。(2)AS TGF-β1呈浓度依赖性抑制血管损伤后VSMCs DNA的合成,而不管是AS TGF-β1还是S TGF-β1对正常VSMCs DNA的合成均无明显的量效作用;同时AS TGF-β1显著抑制了血管损伤后VSMCs FN的合成。(3)AS TGF-β1显著促进了VSMCs SM22αmRNA的表达,但抑制了基质Gla蛋白和骨桥蛋白mRNA的表达,这种相反的作用在0.01及0.1μmol/L的水平最为明显。(4)硫代磷酸化修饰的AS TGF-β1治疗28 d后,显著抑制了颈动脉损伤后新生内膜的增殖,I/M比对照组下降了68%。结论:AS TGF-β1特异性抑制了VSMCs TGF-β1蛋白的表达,抑制血管损伤后VSMCs增殖及合成、分泌FN,减轻血管损伤后新生内膜的增殖。上述作用可能与逆转血管损伤后VSMCs的表型转变有关。林志鸿,谢良地,吴可贵,李庚山,蔺佩鸿 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
m iR-155种子序列的反义寡核苷酸对抗多发性骨髓瘤的作用
目的:探讨针对miR-155种子序列的微小反义核酸(tinyantimiR-155,t-antimiR-155)对多发性骨髓瘤细胞的抑制效应。方法:化学合成t-anti miR-155,通过脂质体转染多发性骨髓瘤RPMI-8266细胞株;实验分为t-antimiR-155组、随机对照组( SCR)和空白对照组;通过MTT法检测细胞增殖抑制率;使用细胞集落形成实验观察集落形成情况;流式细胞术(Annexin V/PI双染法)检测细胞凋亡率。结果:(1)MTT筛选t-antimiR-155显著抑制RPMI-8266细胞生长的浓度,t-antimiR-155的最佳浓度是0.4μmol/L,最佳作用时间是转染后48 h。(2)细胞集落形成实验显示,相比于SCR组,t-antimiR-155组细胞形成集落的能力减弱,集落形成率显著降低。(3)相比于SCR组,t-antimiR-155组的细胞凋亡率明显增加,差异显著。结论:t-antimiR-155可能通过干扰miR-155表达有效抑制多发性骨髓瘤细胞的进展;miR-155可能作为多发性骨髓瘤基因治疗的潜在靶点。丰茂晓,朱容萱,骆小闯,古春明,曾雪,费嘉 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
老年性黄斑变性易感基因2单核苷酸多态性与息肉样脉络膜血管病变相关性的系统评价与meta分析
目的 探讨老年性黄斑变性易感基因2 (ARMS2) A69S基因单核苷酸多态性与息肉样脉络膜血管病变(PCV)的相关性,分析PCV与渗出型老年性黄斑变性(wAMD) ARMS2碱基分布是否有差异.方法 系统评价与meta分析.以PCV、AMD、ARMS2、LOC387715、A69S、rs10490924、老年性黄斑变性、年龄相关性黄斑变性、息肉样脉络膜血管病变、单核苷酸多态性等中英文检索词,在美国国立医学图书馆Pubmed、荷兰医学文献Embase、Web of Science、中国知网和万方数据资源系统中检索文献.纳入病例对照研究,排除综述、病理报告及系统评价.当同一课题组发表多次数据,只纳入最新文献.使用纽卡斯尔-渥太华量表评价纳入文献质量.采用Rev Man 5.1.4软件进行碱基频率、基因型频率与表型相关性的统计学分析.结果 共纳入14篇文献.其中,PCV患者2007例,wAMD患者1308例,无PCV、wAMD的对照组受试者共3286人.PCV患者中变异基因型TT者罹患PCV的风险是野生型GG者的5.20倍[95%可信区间(CI)为3.90~6.95];杂合基因型GT者罹患PCV的风险轻度升高,是野生型GG者的1.85倍(95% CI为1.42~2.40).T碱基频率在wAMD组高于PCV组,合并比值比为1.60(95%CI为1.31~1.96).结论 ARMS2 A69S是PCV的危险基因,基因型TT和GT均可使罹患PCV的风险增加,尤以纯合变异基因型TT风险更大.T碱基的存在使罹患wAMD的危险性略大于PCV.刘冉,杨宇,韦春宜,李梓敬,丁小燕 - 中华眼底病杂志文章来源： 万方数据 -
骨保护素基因单核苷酸多态性与类风湿关节炎发病的相关性研究
目的:探讨骨保护素(OPG)基因163A/G及245T/G单核苷酸多态性(SNPs)与我国汉族人群类风湿关节炎( RA)发病的相关性。方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性( PCR-RFLP)技术检测我国南方汉族正常人群及RA患者的OPG 163A/G和245T/G 2个SNP位点;进行Hardy-Weinberg平衡检验;计算基因型和等位基因频率,及这2个位点的连锁关系,并分析这2个SNP位点与RA的关系。结果:所研究基因分布符合Har-dy-Weinberg平衡,163A/G位点基因型AA、AG、GG分布频率在2组比较有显著差异( P<0.05);等位基因A、G分布比较在2组有显著差异(P<0.05),携带163GG基因型者发生RA的危险性是非携带者的1.219倍(OR=1.219,95%CI:1.066~2.339, P<0.05)。但245T/G位点各基因型及等位基因频率在2组中均未见差异(P>0.05)。结论:OPG基因163A/G SNP可能与我国汉族人群RA发病相关,携带G等位基因可能是发病的危险因素。蔡月明,龙霞,王庆文,王菁,吴志成,王伟光,曾慧萍,张璐 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
白介素18基因启动子区-607C/A多态性与颅内动脉瘤的发病和破裂的关系
目的 分析白介素18(IL-18)基因启动子区-607C/A单核苷酸多态性(SNP)与颅内动脉瘤(IAs)发病和破裂的关系.方法 采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)及DNA直接测序方法检测我院和唐山工人医院收治的98例IAs患者(动脉瘤组)和97例非脑血管病患者(对照组)的IL-18基因启动子区SNP位点-607 C/A(rs1946518)的基因型频率和等位基因频率,其中动脉瘤组患者分为破裂组和未破裂组,并分析IL-18基因多态性与IAs发病、破裂的相关关系.结果 -607C/A位点的基因型分布的测量值(171 bp、99 bp、72 bp)与预期值(171 bp)比较,差异无统计学意义(χ2=1.662,P>0.05),符合Hardy-Weinberg遗传平衡规律.动脉瘤组-607位点基因型及等位基因与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中基因型以CC型最多,其次为AA型和CA型;等位基因以C型多见,动脉瘤组C等位基因的频率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CC+CA基因型增加了IAs发生的风险性[χ2=10.662,P<0.05,OR=0.357,95%CI(0.191,0.669)].破裂组-607位点基因型及等位基因与未破裂组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中基因型以CC型多见,其次为AA和CA型;等位基因以C型多见,破裂组C等位基因的频率高于未破裂组,差异有统计学意义(P<0.05);CC+CA基因型增加了动脉瘤发生破裂的风险性[χ2=7.286,P<0.05,OR=0.024,95%CI(0.096,0.717)].结论 IL-18基因启动子区-607C/A多态性与IAs的发病和破裂显著相关.邱虹,李云超,陈广,于向东,邵德明,阚志生 - 中国全科医学文章来源： 万方数据 -
脑胶质瘤U87-EGFRvIII细胞反义寡核苷酸的188Re标记实验研究
研究放射性核素铼(188Re)标记脑胶质瘤U87-EGFRvIII(Epidermal Growth Factor Receptor Variant III)细胞反义寡核苷酸序列的制备方法,探讨其作为脑胶质瘤反义显像剂的可能性.采用细胞指数富集的配基系统进化技术(Cell-based Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,Cell-SELEX)筛选脑胶质瘤U87-EGFRvIII细胞,得到一段高亲和力的反义寡核苷酸序列U2,然后采用直接标记法进行188Re的放射性标记,按照正交实验设计进行188Re最佳标记条件的摸索,纸层析法测定标记率,通过体外稳定性实验评价188Re-U2的放化特性,测定标记物静脉注射后在大耳兔不同时相血液放射性清除曲线,应用SPECT显像观察标记物在兔体内的放射性动态分布变化.结果表明:在最佳标记条件下188Re-U2的标记率为70%±14%;经Sep-PaK C18反相柱分离纯化后,188Re-U2在生理盐水和血清中37 oC下放置24 h的放化纯度分别为70.6%和95.55%;188Re-U2在兔体内的血放射性清除迅速,主要通过肾脏排泄,其余脏器内放射性均较低.188Re直接法标记U87-EGFRvIII细胞反义寡核苷酸U2的方法简单,具有良好的标记率和体内外稳定性,并且体内分布动力学特性也比较理想.齐永帅,黄宝丹,杜丽,张辉,黄凯,李贵平 - 核技术文章来源： 万方数据 -
脑胶质瘤U87-EGFRvⅢ细胞反义寡核苷酸的188Re标记实验研究
研究放射性核素铼(188Re)标记脑胶质瘤U87-EGFRvⅢ(Epidermal Growth Factor Receptor Variant Ⅲ)细胞反义寡核苷酸序列的制备方法,探讨其作为脑胶质瘤反义显像剂的可能性.采用细胞指数富集的配基系统进化技术(Cell-based Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,Cell-SELEX)筛选脑胶质瘤U87-EGFRvⅢ细胞,得到一段高亲和力的反义寡核苷酸序列U2,然后采用直接标记法进行188Re的放射性标记,按照正交实验设计进行188Re最佳标记条件的摸索,纸层析法测定标记率,通过体外稳定性实验评价188Re-U2的放化特性,测定标记物静脉注射后在大耳兔不同时相血液放射性清除曲线,应用SPECT显像观察标记物在兔体内的放射性动态分布变化.结果表明:在最佳标记条件下188Re-U2的标记率为70%±14%;经Sep-PaK C18反相柱分离纯化后,188Re-U2在生理盐水和血清中37℃下放置24h的放化纯度分别为70.6%和95.55%;188Re-U2在兔体内的血放射性清除迅速,主要通过肾脏排泄,其余脏器内放射性均较低.188Re直接法标记U87-EGFRvⅢ细胞反义寡核苷酸U2的方法简单,具有良好的标记率和体内外稳定性,并且体内分布动力学特性也比较理想.齐永帅,黄宝丹,杜丽,张辉,黄凯,李贵平 - 核技术文章来源： 万方数据 -
FATIO基因在肝细胞癌中的表达和突变分析
目的:探讨FATIO基因在肝细胞癌中的表达和突变情况.方法:应用Westernblot检测60例肝癌患者癌和癌旁组织FATIO蛋白表达水平.采用DNA直接测序方法检测60例肝癌患者(癌和癌旁组织)和5种人肝癌细胞中FATIO基因编码区遗传变异情况.结果:在60例肝癌中,85%(51/60)的肝癌组织FATl0蛋白的表达明显高于癌旁组织.在60例肝癌患者和5种人肝癌细胞中检测到FATIO基因编码区存在7个单核苷酸多态性位点.未发现基因突变.结论:FAT10在肝癌中的异常表达并不依赖于该基因突变,可能存在其他机制.袁荣发,余新,刘天德,蒋成行,邵江华 - 天津医药文章来源： 万方数据 -
TCF7L2基因rs7903146T/C和rs7901695T/C单核苷酸多态性与内蒙古汉族人群2型糖尿病易感性的相关性研究
目的 研究内蒙古地区汉族人群中T2DM易感性与TCF7L2基因rs7903146T/C和rs7901695T/C位点单核苷酸多态性(SNPs)是否相关. 方法 收集T2DM患者和正常体检人群的抗凝血,采用等位基因特异性PCR (AS-PCR)进行SNPs分析;运用SHEsis软件对T2DM组和正常对照(NC)组的TCF7L2基因的SNPs位点进行连锁不平衡和单倍型分析. 结果 rs7903146 T/C和rs7901695 T/C位点的基因型分布在T2DM及NC组间的分布差异无统计学意义(P>0.05),但rs7903146T/C位点的T和C等位基因频率在两组间的分布差异有统计学意义(P<0.05).rs7903146T/C和rs7901695 T/C位点连锁平衡(D'=0.060),rs7901695T-rs7903146T单倍型在T2DM组的频率明显高于NC组(P<0.01,OR=1.803,95%CI:1.183~2.7487). 结论 在内蒙古地区汉族人群,rs7903146位点C→T多态性可能与T2DM关联,携带突变等位基因T可增加罹患T2DM的风险,rs7901695位点C→T多态性与T2DM易感性无明显相关性,但rs7901695T-rs7903146T单倍型与T2DM发病风险相关.冯秋萍,李晓晶,苏燕,闫朝丽,高丽君,秦文斌,顾丽,张君,李彩萍,李爱珍 - 中国糖尿病杂志文章来源： 万方数据 -
采用新一代测序技术分析头颈部鳞状细胞癌的分子异质性
依据与高危亚型人类乳头状瘤病毒(HPV16、18)的相关性,头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)被分为两种不同的临床亚型组.近年来,在某种程度上由于与HPV感染有关的HNSCC在逐渐增加,且其在预后和分子组织学方面的差异引起学者们的注意,然而,如何分类这些肿瘤,其潜在的作用机制和详尽的基因组织学仍然未被阐明.为了阐明伴和不伴HPV感染的HNSCC致癌途径,我们采用定向的新一代测魏建国(摘译),许春伟(审校),Baisre A - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据
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