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模拟肺纤维化过程中Caveolin-1表达及其临床意义
目的 探讨TGF-β1对成纤维细胞小凹蛋白1(Caveolin-1,Cav-1)表达的影响,进一步探讨不同亚组成纤维细胞Cav-1基础表达的差异及肺纤维化模型不同时期Cav-1的表达.方法 Western blot法检测不同浓度TGF-β1对成纤维细胞作用不同时间后Cav-1表达的影响,流式细胞分选后用Western blot法检测不同亚组成纤维细胞中Cav-1表达的差异,免疫组化法检测博莱霉素(bleomycin)对大鼠肺纤维化模型中不同时期Cav-1的表达的影响.结果 Cav-1的表达呈时间和剂量依赖性降低,Thy-1+亚组Cav-1的基础表达高于Thy-1-亚组;随着纤维化的进展,Caw-1表达呈下降趋势.结论 Cav-1表达降低可能与肺纤维化有关,Thy-1-亚组对致纤维化刺激的高反应性可能与Cav-1低表达有关.旨在恢复或增加Cav-1生物活性的治疗措施可能有助于恢复上皮细胞的正常再生过程和延缓纤维化的进展.张明明,吕长俊,张晓荣,许玲,李洪波,王晓芝,赵洪文 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
低氧诱导的小窝蛋白-1上调参与人肺腺癌细胞A549迁移和侵袭
目的:探讨低氧诱导剂二氯化钴(CoCl2)对小窝蛋白-1(Cav-1)生成的调节作用及后者对人肺腺癌A549细胞迁移、侵袭的影响.方法:检测肺癌患者伴恶性胸水(MPE)和结核性胸膜炎患者胸水(TBPE)中Cav-1和缺氧诱导因子(HIF)-1α浓度,比较两者相关性;以CoCl2和(或)HIF-1α抑制剂YC-1作用于A549细胞ELISA法检测细胞上清Cav-1和HIF-1α浓度;分别采用细胞划痕实验及Transwell小室侵袭实验研究CoCl2刺激表达的Cav-1对A549细胞迁移和侵袭的影响.结果:MPE中Cav-1和HIF-1α浓度明显高于TBPE,两组患者胸水中Cav-1与HIF-1α均呈正相关.CoCl2浓度和时间依赖性诱导A549细胞Cav-1和HIF-1α生成,200μmol/L或24 h达到峰值;浓度>200μmol/L或作用时间超过24 h则呈现浓度或时间依赖性抑制.HIF-1α抑制剂YC-1浓度依赖性抑制HIF-1α和Cav-1生成.CoCl2浓度依赖性增强A549细胞迁移和侵袭,200μmol/L作用最强;YC-1对上述过程产生抑制效应.结论:肺癌患者胸腔积液中Cav-1浓度升高,低氧诱导Cav-1生成的变化可能参与了A549细胞迁移和侵袭,HIF-1α可能对Cav-1生成发挥影响.左蓓,刑敏,孙珍贵,汪向海,陈兴无 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
鼻咽癌复发的分子标志物Jab1和Akt1蛋白表达的差异
目的:通过筛查鼻咽癌病人复发组织与鼻咽癌初发组织分子标志物表达的差异,探讨差异表达的蛋白与鼻咽癌复发的关系,为干预鼻咽癌复发提供新的靶点.方法:免疫组织化学SABC法检测Jab1、p-STAT3、CHOP和Akt1在复发和初发病人鼻咽癌组织中的表达;Western blotting法检测鼻咽癌细胞CNE-1、CNE-2、CNE-2R和HONE1中Jab1和Akt1蛋白的表达.结果:复发病人鼻咽癌组织Jab1和Akt1核表达水平均高于初发鼻咽癌组织(P <0.05);Jab1和Akt1在CNE-1、CNE-2R和HONE1细胞中的表达高于在CNE-2细胞中的表达,电离辐射能促进CNE-1、CNE-2、CNE-2R和HONE1细胞中Jab1蛋白的表达.结论:复发病人鼻咽癌组织或辐射抗拒鼻咽癌细胞中Jab1和Akt1核表达均高于初发鼻咽癌组织或辐射相对敏感的鼻咽癌细胞;电离辐射促进鼻咽癌细胞中Jab1过表达.王春华,王苏美,徐韬,苏箔金,黄河澄,杨惠玲 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
晚期非小细胞肺癌ERCC1基因表达量的临界值研究及验证
目的 检测200例非小细胞肺癌FFPE样本中ERCC1的相对表达量,确定判别ERCC1表达量等级的临界值并对其进行回顾性验证.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测FFPE样本中ERCC1和内参基因的表达量,并通过2-ΔCt法计算ERCC1的相对表达量.以其中位值为判别ERCC1表达量等级的临界值,并通过患者应用铂类化疗药物的短期、长期疗效进行回顾性验证.结果 200例FFPE样本中,ERCC1和内参基因均可检出的检出率为89.0%.ERCC1相对表达量与患者年龄、性别、分型、分期及有无吸烟史等差异均无显著性(P>0.05).高表达、低表达ERCC1患者在应用药物后的客观有效率分别为22.0%、53.7% (P <0.05).采用COX模型进行多因素回归分析,发现ERCC1表达量是影响患者无进展生存、总体生存的独立因素(P<0.05).ERCC1高表达、低表达患者接受铂类化疗药物治疗的中位无进展生存时间分别为8个月、14个月,差异有显著性(P=0.018);ERCC1高表达、低表达患者中位总体生存时间分别为10个月、15个月,差异有显著性(P =0.028).结论 判定非小细胞肺癌ERCC1表达量等级的临界值适合进行后续验证,为相关检测标准的制定提供依据.王雷,李爱国,刘庆熠,贾金明,栾艳超,杜媛鲲 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
沉默NANOG表达对人肝癌细胞HepG2中cyclin D1表达及细胞增殖的影响
目的:探讨RNA干扰沉默NANOG表达后对肝癌细胞HepG2中细胞周期素D1 (cyclin D1)表达及细胞增殖的影响.方法:将以NANOG基因为靶点的NANOG-siRNA瞬时转染肝癌细胞HepG2,real-time PCR和Western boltting检测NANOG、cyclin D1 mRNA和蛋白的表达,CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期情况.结果:与mock组比较,转染NANOG-siRNA后,肝癌细胞HepG2中NANOG、cyclin D1mRNA和蛋白水平均下调(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05),进入G0/G1期的细胞比例增多(P<0.05).结论:沉默NANOG表达可引起肝癌细胞HepG2中cyclin D1的表达下降,导致细胞增殖能力下降.周嘉嘉,陈汝福,邓小耿,周雨,周泉波,张杰,伍耀豪,曾乐祥,邱荣林 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
GS环保试剂在HPV L1壳蛋白检测技术中的应用
原位杂交技术的广泛应用为各学科的研究带来突破性进展,其对组织标本的常规处理要求越来越高.在日常病理组织处理过程中,甲醛和二甲苯作为病理常规试剂被大量应用.但是传统试剂具有强烈的刺激性和一定的毒性,不利于环保和工作人员的健康.作者尝试应用环保型GS(green specimen)组织样本制备套液制作组织蜡块,并应用原位杂交技术检测HPV L1壳蛋白的表达,以探讨GS环保试剂对王莹,张睿,李杜娟,董新敏,王舒欢,杨瑞,孔令非 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
过表达磷脂转运蛋白对小鼠脂蛋白上鞘氨醇-1-磷酸含量的影响
目的:探讨血浆脂蛋白上鞘氨醇-1-磷酸(S1P)和磷脂转运蛋白(PLTP)的相互作用及机制。方法:检测雄性10周龄PLTP转基因(PLTP-Tg)及野生型(WT)小鼠血浆S1P和脂蛋白上S1P含量,转运实验检测PLTP对S1P的转运作用,免疫印迹检测S1P载体载脂蛋白M( apoM)含量。结果:PLTP-Tg小鼠血浆S1P含量较WT小鼠下降21.1%(P<0.01),高密度脂蛋白(HDL)组分上S1P含量下降约35.1%,而低密度脂蛋白(LDL)组分上S1P比例则增加了127.4%。转运实验表明,在37℃时D-Hanks 缓冲液中PLTP能够促进S1P从红细胞转运至重组脂质体。 PLTP-Tg小鼠血浆中apoM含量与WT小鼠比较无变化。结论:生理水平PLTP对保持HDL上S1P含量有重要意义,过表达PLTP可显著降低HDL上S1P,同时升高LDL上S1P,其机制可能与PLTP介导S1P转运有关。于杨,冯玉梅,郭守东,崔英杰,宋国华,冯蕾,罗甜,陈超,王义维,蒋宪成,秦树存 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
GRP78在胃癌生长中的作用
目的:探讨内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白78( GRP78)参与胃癌细胞生长的作用。方法:回顾性分析34例胃癌及34例癌旁组织,利用组织微阵列技术,构建组织阵列,采用免疫组织化学技术SP法检测该阵列中GRP78蛋白在胃癌及其癌旁组织中表达情况。利用Western blotting 检测人体胃癌组织、癌旁组织(肿瘤旁1 cm处)和正常组织(远离肿瘤≥10 cm 处)中GRP78蛋白的表达情况。利用Western blotting 检测人胃癌细胞SGC7901和过表达GRP78的SGC7901-H78细胞(稳定转染GRP78)中GRP78和生长相关蛋白cyclin D1的表达情况。结果:(1)免疫组织化学检测发现:人体胃癌组织中GRP78表达水平明显高于癌旁组织和正常组织,且与性别、分化程度相关(P<0.05);(2) Western blotting检测发现:胃癌组织中GRP78蛋白的表达明显高于癌旁组织和正常组织;(3) Western blotting检测发现:相对于SGC7901细胞,SGC7901-H78细胞中GRP78蛋白的表达明显升高,同时检测生长相关蛋白cyclin D1的表达发现,随着GRP78表达的上调,cyclin D1蛋白表达增加。结论:GRP78蛋白的高表达可能参与了胃癌细胞的生长。付政祺,镇鸿燕,刘丽江 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
阿尔茨海默病小鼠模型中骨髓间充质干细胞的神经分化
目的:探讨淀粉样前体蛋白(APP)转基因小鼠(阿尔茨海默病小鼠模型)骨髓间充质干细胞(MSCs)的神经分化及其与参与调节干细胞分化的Notch1信号通路的关系,观察分化的骨髓间充质干细胞中自噬的变化.方法:实验分为APP转基因小鼠组(APP组)和野生型小鼠组(WT组).采用β-巯基乙醇诱导小鼠MSCs分化为神经细胞;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测诱导后β淀粉样蛋白40(Aβ40)和42(Aβ42)的水平;采用免疫细胞化学染色法和Western blotting检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)和微管相关蛋白2(MAP-2)的表达变化;Western blotting检测Notch1、Notch胞内域(NICD)和Hes5的水平.结果:与野生型小鼠相比,APP转基因小鼠的骨髓间充质干细胞具有更强的神经分化能力、更高的Aβ表达及更强的Notch1信号抑制.但是,自噬作为神经细胞存活和神经功能必不可少的条件,在分化后的APP 转基因小鼠来源的MSCs中受损.结论:过表达APP可能通过抑制Notch-1信号通路增强小鼠骨髓间充质干细胞神经分化的能力,而分化后的APP转基因小鼠MSCs出现自噬通路异常.高慧丽,张广宇,段冉冉,李燕飞,王笑寒,彭涛,关文娟,贾延劼 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
siRNA对预分化骨髓间充质干细胞β2M表达的影响
目的:研究小干扰RNA(siRNA)对预分化骨髓间充质干细胞(BMSCs)β2-微球蛋白(β2M)基因表达的影响。方法:BMSCs成软骨诱导液预分化21 d后,将β2 M siRNA用Lipofectamine 2000转染BMSCs、分为转染组、空白对照组和阴性对照组,应用实时定量PCR、Western blotting、激光共聚焦显微观察等方法检测siRNA对预分化BMSCs的β2 M mRNA和蛋白的表达情况,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光检测预分化BMSC的蛋白聚糖多聚体和Ⅱ型胶原分泌情况。结果:实时定量PCR、Western blotting 和激光共聚焦显微观察结果显示siRNA成功抑制β2 M mRNA和蛋白的表达,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光结果显示siRNA不影响预分化BMSCs蛋白聚糖多聚体和Ⅱ型胶原蛋白的分泌。结论: RNAi 干扰β2 M 可降低BMSCs 中β2 M mRNA和蛋白的表达,但不影响预分化BMSCs的软骨细胞特性。戴兵,范时洋,陈龙,金海东,蔡建武,潘骏 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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