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禾谷缢管蚜水通道蛋白基因RpAQP1的克隆、分子特性和表达分析
为探究禾谷缢管蚜Rhopalosiphum padi(Linnaeus)水通道蛋白基因Rp AQP1的序列特征及其在不同龄期的表达,利用RT-PCR和RACE技术克隆了Rp AQP1基因的c DNA全序列,采用生物信息学软件分析了Rp AQP1编码蛋白的特性,利用qRT-PCR分析了Rp AQP1在不同龄期的表达量.结果显示:禾谷缢管蚜水通道蛋白基因Rp AQP1的c DNA全长为1 216 bp,其750 bp的开放阅读框编码250个氨基酸,蛋白分子量为27.36 k D.Rp AQP1属于水通道蛋白亚家族DRIP(果蝇内嵌蛋白Drosophila integral protein)的一员,具有6个跨膜区,2个保守的NPA结构单元和1个压缩区域Ar/R;qRT-PCR结果显示,Rp AQP1在整个发育历期均有表达,其在2龄若蚜中表达水平最高,是成蚜表达量的1.432倍;在4龄若蚜中表达量最低,为成蚜表达量的0.444倍,显著低于其它龄期,而其余各龄期Rp AQP1表达量无显著差异.左亚运,李晓叶,李玉婷,王康,乔宪凤,陈茂华 - 植物保护学报文章来源: 万方数据 -
血清水通道蛋白4抗体测定对视神经脊髓炎的诊断及预后判断价值
目的:探讨血清水通道蛋白4(AQP4)抗体检测对视神经脊髓炎(NMO)诊断及预后判断的临床价值.方法:收集2010年1月至2013年12月在温州医科大学附属第一医院神经内科住院或门诊就诊的48例NMO、33例脊髓炎(TM)[包括26例长节段脊髓炎(LETM)和7例复发性脊髓炎(r LETM)]、30例视神经炎(ON)[包括25例双眼视神经炎(BON)和5例复发性视神经炎(RION)]、52例多发性硬化(MS)及16例其它神经系统疾病(OND)的患者血清及相关临床资料.采用细胞免疫荧光法检测血清AQP4抗体.分析各组患者血清AQP4抗体的阳性率及抗体滴度,比较AQP4抗体阳性NMO患者与AQP4抗体阴性患者的临床特征.通过绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),评价AQP4对NMO诊断的敏感性和特异性.应用Kaplan-Meier曲线分析血清AQP4抗体阳性患者进展为NMO的累计概率.结果:NMO组AQP4抗体阳性率最高(87.50%),其后依次为r LETM组(85.71%)、RION组(80.00%)、LETM组(30.70%)、BON组(8.00%)和MS组(3.85%),OND组抗体检测为阴性.NMO组中血清AQP4抗体阳性患者在性别构成比、确诊为NMO时间及伴有严重神经炎的比例等方面,与抗体阴性患者相比差异有统计学意义(P<0.05).ROC曲线提示血清AQP4抗体对诊断NMO的敏感性为87.5%,特异性为85.4%.KaplanMeier曲线提示AQP4抗体阳性患者进展为NMO的累积概率明显高于抗体阴性的患者(P<0.05).结论:血清AQP4抗体检测对诊断NMO具有较高的敏感性及特异性,且有助于NMO预后和转归的判断.厉向,童巧文,柯建明,叶莉萍,戚飞腾,万真,夏君慧 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
水通道蛋白4在大鼠淋巴性脑水肿中的作用
目的:研究水通道蛋白4(AQP4)在淋巴性脑水肿(LBE)形成和消散过程中的作用.方法:将大鼠随机分为假手术组和LBE组.采用结扎双侧颈部淋巴管并摘除淋巴结的方法,制作LBE模型.干湿重法检测大鼠大脑皮质含水量,应用免疫荧光组织化学方法及免疫印迹检测在颈淋巴引流阻滞后不同时点AQP4表达的变化情况,并对AQP4表达与脑含水量作相关分析.结果:与假手术组相比,LBE组大鼠脑含水量、AQP4免疫荧光表达阳性细胞数、强度及AQP4蛋白表达在术后3d均见升高(P<0.05),7d升至高峰(P<0.01),后逐渐降低,且AQP4蛋白表达与脑含水量呈正相关关系(r=0.8024,P<0.05).结论:AQP4在大鼠LBE的形成和消散过程中起到了重要的作用.郑延红,杨娜娜,夏作理 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
Kv1.5对大鼠低氧高二氧化碳性 PASMCs 增殖、凋亡的影响及与 MAPK 通路的关系
目的:探讨电压依赖性钾离子通道Kv1.5对大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉平滑肌细胞( PASMCs)增殖、凋亡的影响及其与丝裂原激活蛋白激酶( MAPK)信号通路的关系。方法:体外培养大鼠PASMCs,复制低氧高二氧化碳模型,随机分组如下:常氧组( N组);低氧高二氧化碳组( HH组);低氧高二氧化碳+溶剂DMSO对照组( HD组);低氧高二氧化碳+ERK1/2通路抑制剂U0126组( HU组);低氧高二氧化碳+p38 MAPK通路抑制剂SB203580组( HS组);低氧高二氧化碳+MAPK通路激动剂茴香霉素( anisomycin )组( HA组)。采用CCK-8法检测细胞活性,蛋白免疫印迹法检测Kv1.5、增殖细胞核抗原( PCNA)及Bax蛋白的表达水平。结果:与N组相比,HH组和HD组细胞活性增加(P<0.01),PCNA蛋白表达上调,Kv1.5及Bax蛋白表达均明显降低(P<0.01), HH组和HD组间各指标变化均无显著差异(均P>0.05);较之HD组,HU组、HS组及HA组细胞活性降低( P<0.05或P<0.01),PCNA蛋白表达下调,Kv1.5及Bax蛋白表达均明显增加,差异均显著(P<0.01),其中以HA组各指标变化最明显。结论:钾离子通道Kv1.5对低氧高二氧化碳性大鼠PASMCs增殖、凋亡的调节可能与MAPK通路的激活有关。马迎春,郑梦晓,黄林静,王园园,应磊,王万铁 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究
目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效率和表达效果,杀稻瘟菌素( blasticidin )进行抗生素筛选,获取稳定表达TMEM16A的FRT细胞株。 RT-PCR和免疫荧光检测TMEM16A于FRT细胞的表达情况;倒置荧光显微镜下观察TMEM16A在FRT细胞中的表达和定位;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L检测TMEM16A钙激活氯离子通道的功能。结果:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切的琼脂糖凝胶电泳和测序结果表明目的基因TMEM16A成功克隆到真核表达载体pUB6/V5中;RT-PCR和免疫荧光实验结果表明经杀稻瘟菌素筛选后的FRT细胞在mRNA和蛋白水平表达TMEM16A,倒置显微镜下观察结果表明TMEM16A在FRT细胞膜上有表达;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L证实稳定表达于FRT细胞的TMEM16A具有经典的钙激活氯离子通道特性。结论:FRT细胞可高效表达TMEM16A。 TMEM16A是钙激活氯离子通道的分子基础。郝峰,白雪松,鞠晓红,方芳,藏雨轩,朱杭飞,向国艳,张雲乔,袁忠海 - 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
自然种群淡色库蚊钠通道基因全长的克隆及序列分析
本研究采用反转录多聚酶链式反应( RT-PCR)的方法对野外采集的河北种群淡色库蚊的钠离子通道基因进行了克隆和序列分析。得到的克隆序列与GenBank中公布的序列能够吻合,说明成功克隆出淡色库蚊的钠通道基因全长,为抗性突变的研究奠定了基础。本研究在淡色库蚊钠通道基因上发现了多处氨基酸突变(A32T、 T336A、 S342P、 K535E、 L1035F、 N1595S和F1982L)和7处可变剪接。其中,包括经典的抗性突变L1014F ( L1035F)。但这些突变和可变剪接与蚊虫抗性的关系有待进一步研究。赵明惠,冉鑫,董言德,郭晓霞,张映梅,邢丹,吴治明,李春晓,赵彤言 - 寄生虫与医学昆虫学报文章来源: 万方数据 -
顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞氯电流为非钙激活氯电流
目的:探讨顺铂激活的低分化鼻咽癌细胞( CNE-2Z)氯通道电流是否为钙激活的氯电流。方法:采用膜片钳全细胞记录技术记录细胞内/外无Ca2+及钙通道阻断剂对顺铂激活氯电流的影响,并用高渗灌流液观察顺铂激活氯电流的容积敏感性。结果:去除细胞外液的Ca2+后,5μmol/L顺铂能诱发氯电流,且电流大小与细胞外有Ca2+时无明显差异,但潜伏期与达峰时间延长。细胞内外均无Ca2+对顺铂激活氯电流未产生影响。钙通道阻断剂nifedipine未能抑制顺铂诱发的氯电流。但细胞外灌流高渗液几乎可完全抑制顺铂激活的氯电流。结论:顺铂激活的氯通道开放不依赖于细胞内/外的Ca 2+,该通道不是钙激活氯通道而很可能是容积敏感性氯通道。- 中国病理生理杂志文章来源: 万方数据 -
凝汽器水室外加电流阴极保护的数值模拟
采用基于边界元技术的数值模拟方法,对核电站凝汽器水室外加电流阴极保护方案进行优化设计.研究了辅助阳极布置方式、阳极组中单支阳极失效和阳极屏蔽层等因素对冷凝器水室阴极保护电位分布的影响,为水室阴极保护效果预测和阳极的布置方式的选择提供了依据.闫永贵,张海兵,邢少华 - 腐蚀与防护文章来源: 万方数据 -
基于多智能体的新型电子沙盘交互系统设计
新型电子沙盘指融合了多点触摸、体感交互、虚拟现实、增强现实等技术的电子沙盘.新型电子沙盘交互系统中多人、多设备、多通道的交互特点展现出了复杂性,基于多Agent方法构建了以新型电子沙盘为平台的多通道交互系统,从输入识别、信息处理和输出生成三方面分别阐述了系统中的各智能体.对系统进行了可用性测试.燕厚仪,凌云翔,张国华 - 系统仿真学报文章来源: 万方数据

