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绵羊肺炎支原体标准株Y98外膜蛋白MOP30基因真核表达载体的构建及其在烟草中的瞬时表达
以绵羊肺炎支原体(Mycoplasma oumvipneoniae,MO)标准株Y98基因组为模板,设计1对特异引物,PCR扩增得到798bp的P30目的基因(MOP30),将其定向克隆到pMD19-T Simple载体中进行测序分析.重组质粒进行XbaⅠ/BamHⅠ双酶切并回收目的片段,将目的基因亚克隆入黄色荧光蛋白(yellow fluorescent protein,YFP)表达载体pCAMBIA1300-YFP中构建重组融合表达质粒pCAMBIA1300-MOP30-YFP.双酶切验证后的融合表达质粒转化农杆菌(Agrobacterium)感受态细胞,侵染烟草(tobacco)叶片.通过激光共聚焦成像显微镜(cofocal imagingmicroscope)观察到融合表达的黄色荧光蛋白,Western-blotting试验得到57 000的特异条带,RT-PCR检测到MOP30基因在烟草叶片中转录.MOP30-YFP融合蛋白在烟草中的成功表达,为转基因植物疫苗防治绵羊支原体肺炎奠定了基础.张亚宁,赵利峰,张乐祎,赵宝华 - 中国兽医学报文章来源： 万方数据 -
全桥逆变器双Buck型调制的研究
提出了对全桥逆变器进行双Buck型调制的方法.该调制模式不增加拓扑结构复杂程度,保留了双降压半桥逆变器(DBHBI)无桥臂直通的优点,克服了直流电压利用率低等缺点.采用电流瞬时值反馈SPWM控制策略,给出了该双Buck型调制工作的原理,分析了其实现方法,通过仿真和实验验证了系统的正确性.李庆振,吴卫民,卢兴军 - 电力电子技术文章来源： 万方数据 -
基于时频图像处理提取瞬时频率的雷达信号识别
时频图像可以刻画雷达信号的脉内调制方式,但是直接利用时频图像识别信号存在特征维数高,受噪声影响大等缺点.针对雷达信号识别问题,提出了一种利用Choi-Williams时频图像处理提取信号瞬时频率特征的识别方法.该方法从信号的时频分布出发,将信号的时频分布看成灰度图像,利用一系列形态学图像处理方法对图像进行降噪,提取时频图像中行索引信息作为信号的瞬时频率特征用于信号识别.仿真结果表明,通过图像处理方法提取的特征在低信噪比下具有很好的稳定性,在信噪比大于0dB时对7种典型的雷达信号识别率均超过90%,与现有方法相比,在低信噪比下就有更好的识别效果.朱健东,张玉灵,赵拥军 - 系统仿真学报文章来源： 万方数据 -
论工会利益整合-表达及其特点
以现代社会使用的利益整合和利益表达概念对工会利益整合-表达及其特点进行了界定和分析.工会是维护工人利益的组织,对工人的利益进行整合和表达是工会的重要职能,也是工会存在及其发展的基础.作为工会维护工人利益的必要过程和手段,利益整合与利益表达不仅具有主体的同一性,还具有过程的同一性.作为一种组织行为,工会利益整合-表达具有组织化程度高、组织成员数量多、与政党联系紧密等特点.刘勇 - 西北大学学报(哲学社会科学版)文章来源： 万方数据 -
Fibroscan在慢性乙型肝炎肝纤维化诊断中的作用及影响因素
目的探讨肝脏瞬时弹性超声成像(Fibroscan,FS)在评估慢性乙型肝炎肝纤维化中的作用及影响因素.方法选择上海瑞金医院感染科2009年1月至2011年12月慢性乙型肝炎(CHB)患者410例,运用FS检测肝脏硬度值(Stiffness值).所有患者同期行经皮肝穿刺活组织检查,同时检测肝功能、血小板、凝血等指标.以肝活检结果为标准绘制FS工作特征曲线,计算受试者工作特征曲线下面积(AUROC),Stiffness值与Ishak评分比对,运用统计学方法进行分析.结果无肝纤维化(S0期)、轻度肝纤维化(S1~S2期)、中度肝纤维化(S3~S4期)和重度肝纤维化及肝硬化(S5期~S6期)患者Stiffness值(kPa)分别为5.45±1.44、7.01±2.42、9.23±3.00、16.87±6.77,对Stiffness值进行组间比较,差异有统计学意义(P刘柯慧,吴海清,阮隽,赖荣陶,桂红莲,周惠娟,余敏杰,林兰意,谢青,王晖 - 肝脏文章来源： 万方数据 -
基于三基线干涉仪的二维瞬时测向系统
针对电子战中敌方雷达的快速定位,设计了一种基于三基线干涉仪的二维瞬时测向系统,解决了在宽频带范围内保证测向视角和精度的难题.给出了系统的工作原理、电路结构以及软件算法,并重点介绍了信号处理组件的设计等关键技术.试验结果表明,该测向系统在X波段全频带内的测向视角达到了±60°,测角精度优于1°.丁勇,谢兴军,曾耿华 - 电子技术应用文章来源： 万方数据 -
IPO8基因启动子区rs35100176位点变异对基因表达的影响
目的:研究人importin 8( IPO8)基因启动子区rs35100176多态性位点CCT插入/缺失对基因表达的影响。方法:PCR扩增IPO8基因启动子区包含rs35100176多态位点的342 bp序列,通过测序获得了49例DNA样本的基因多态性分布。以CCT/CCT插入纯合子或-/-缺失纯合子DNA样本为模板,扩增含有不同插入/缺失序列的IPO8基因启动子片段,插入萤光素酶报告质粒pGL3-Basic,构建pGL3-3N Insertion和pGL3-3N Deletion重组表达载体。重组质粒经Fugene 6.0转染入细胞,采用双萤光素酶报告系统,检测携带不同多态性序列的重组质粒中报告基因的表达活性;real-time PCR 检测各不同基因型细胞中 IPO8 mRNA 表达。结果:通过测序发现rs35100176多态位点存在 CCT/CCT、CCT/-和-/-3种表型,其基因分布频率分别为18.37%、55.10%和26.53%。成功构建pGL3-3N Insertion和pGL3-3N Deletion重组表达载体。双萤光素酶报告基因活性检测结果显示,pGL3-3N Insertion启动下游报告基因表达的相对活性与pGL3-3N Deletion 相比显著减弱,两者存在显著差异(P<0.05);real-time PCR结果显示,CCT纯合插入的HEK293细胞中IPO8 mRNA的表达显著低于CCT纯合缺失的Saos-2细胞。结论:IPO8基因启动子区rs35100176位点的CCT碱基插入变异能显著抑制启动子活性,从而影响IPO8基因的转录。熊建军,江和,许晓源,周小鸥,王庭,李卫东 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
从经典影像到多元视角-当代建筑摄影中的控制与表达
通过对建筑学中经典建筑案例拍摄过程的回顾,探讨了建筑师与建筑摄影师的合作方式,结合对当代建筑摄影多元视角及其特征的归纳,揭示出建筑影像背后所隐含的各种意图和具体控制,以此阐述建筑摄影对当代建筑学演进的特殊意义.耿涛 - 建筑学报文章来源： 万方数据 -
重组结核分枝杆菌CFP10的克隆与表达
目的:克隆和表达结核分枝杆菌CFP10,并分析其免疫学活性.方法:自结核分枝杆菌标准株H37Rv提取基因组DNA,PCR扩增cfp10基因,克隆至T载体pMD18T,转化入大肠杆菌JM109,菌落PCR鉴定阳性克隆并测序分析.将测序正确的pMD18-cfp10的cfp10基因亚克隆至表达载体PQE30,构建重组质粒PQE30-cfp10,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,PCR和双酶切鉴定阳性重组体,IPTG诱导CFP10表达,亲和层析纯化,western-blot分析其免疫活性.结果:成功构建PQE30-cfp10重组表达质粒,表达、纯化获得分子量约10kDa的CFP10,并能被结核病人血清识别.结论:克隆表达获得具有免疫活性的重组结核分枝杆菌CFP10.杨双,袁仕善,谭云洪,邓志高,孙文霞,李民 - 湖南师范大学学报(医学版)文章来源： 万方数据 -
肿瘤中DNA甲基化对miRNA调控作用的研究进展
miRNA的异常表达与肿瘤的发生、发展密切相关,但miRNA的表达调控机制目前尚不清楚。有研究提示,在肿瘤细胞中DNA 甲基化异常会引起 miRNA 的表达改变,即DNA甲基化程度的改变将促进或抑制miRNA的表达,从而抑制或促进肿瘤的发生、发展。因此,DNA甲基化对miRNA的调控作用已成为肿瘤相关研究领域中的“新大陆”。该文就DNA甲基化调控miRNA的表达并参与人类肿瘤发生、发展的有关研究进展作一综述。顾页,林洁 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据
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