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血浆碱性成纤维细胞生长因子预测TACE治疗肝细胞癌的疗效
目的 探讨血浆碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在肝细胞癌(HCC)患者TACE术后的变化,评价这种趋势与疗效的关系.方法 对49例HCC行TACE,于术前及术后4周进行血浆bFGF、肝功能及CT检查.将术后4周血浆bFGF下降≥TACE术前bFGF的20%者纳入下降组,否则纳入未下降组.将TACE术后4周CT示肿瘤坏死区域面积≥肿瘤总面积的50%定义为肿瘤缓解.结果 术前肿瘤直径≥5 cm或合并乙型肝炎者bFGF较高.术后4周血浆bFGF下降组共16例,其肿瘤缓解率高于未下降组(P<0.05).结论 HCC患者的血浆bFGF可能是预测TACE疗效的指标之一.TACE术后血浆bFGF下降的HCC患者更易发生肿瘤缓解,且其生存期明显延长.禹娴怡,陆骊工,李勇,胡宝山,邵培坚 - 中国医学影像技术文章来源： 万方数据 -
胰岛素样细胞生长因子-1、碱性成纤维细胞生长因子及转化生长因子a对人表皮干细胞增殖的影响
目的表皮干细胞是组织工程化皮肤的"种子细胞".文中研究碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)、胰岛素样细胞生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)和转化生长因子仅(transforming growth factor a,TGFa)对人表皮干细胞增殖的影响.方法采用两步酶消化法和Ⅳ型胶原差速贴壁相结合的方法获得人原代表皮干细胞,将表皮干细胞分为A组(K-SFM)、B组(K-SFM+bFGF)、C组(K-SFM+IGF-1)及D组(K-SFM+TGFot)进行培养.比较不同组之间表皮干细胞的克隆形成率、生长增殖、生长曲线和细胞周期等指标.结果B组、C组及D组培养的表皮干细胞在细胞增殖、细胞克隆率方面检测结果均明显高于A组(P〈0.05);流式细胞仪检测B组、C组与A组及D组处于G0/G1细胞比例比较差异有统计学意义(P〈0.05).结论IGF-1、bFGF及TGF-a均对表皮干细胞的增殖有促进作用,IGF-1及bFGF对表皮干细胞表型的维持有较好的作用.陈建国,孟庆楠,赵德梅,谭谦 - 医学研究生学报文章来源： 万方数据 -
沙利度胺抑制TGF-B1诱导的HELF细胞中结缔组织生长因子基因启动子的激活
目的:探讨沙利度胺(thalidomide,THD)对转化生长因子Bl(transforminggrowthfactorp1,TGF-p1)诱导的人胚肺成纤维细胞(humanembryoniclungfibroblast,HELF)结缔组织生长因子(connectivetissuegrowthfac-tor,CTGF)基因启动子激活的影响.方法:构建含有人类CTGF基因启动子的报告基因载体pGL3-CTGFP,将其瞬时转染HELF细胞,通过检测萤光素酶的活性,观察TGF-B1和THD对CTGF基因启动子活性的影响.结果:TGF-B.能以剂量依赖方式和时间依赖方式显著增加HELF细胞中报告基因的活性(P〈0.05),最佳刺激浓度是5ug/L,萤光素酶相对活性为对照组的2.16倍,最佳刺激时间为12h,萤光素酶相对活性为对照组的2.52倍;THD对报告基因的基础活性无明显影响(P〉0.05),但以剂量依赖方式显著抑制TGF-B1上调报告基因活性的效应(P〈0.05).结论:TGF-B1能以剂量依赖方式和时间依赖方式上调HELF细胞中CTGF基因启动子的活性,而THD能以剂量依赖方式抑制此过程.王达安,林逸心,王峥,桑朝磊,陆大祥,王华东,胡巢凤,魏伟,蒋建伟,付咏梅,李红梅 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
伊马替尼减轻DOCA诱导的大鼠心肌纤维化与PDGFs/PDGFRs信号通路有关
目的:探讨血小板源性生长因子(PDGFs)/PDGF受体(PDGFRs)信号通路拮抗剂伊马替尼(IMA)减轻醋酸去氧皮质酮(DOCA)诱导的盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化的作用机制及PDGFs/PDGFRs信号通路在其中的作用.方法:60只雄性SD大鼠行右肾切除术,术后予以1%氯化钠和0.1%氯化钾饮水4周并随机分成3组:对照组、实验组(DOCA组)和治疗组(DOCA+IMA组).使用尾套法每2周测定1次大鼠动脉收缩压(SBP),苦味酸-天狼星红染色观察大鼠心肌间质纤维化程度和心肌血管周围胶原面积(PVCA)/血管腔面积(VA)比值,实时荧光定量PCR法检测心肌组织成纤维细胞特异蛋白1(FSP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、前胶原蛋白Ⅰ(procollagen Ⅰ)、前胶原蛋白Ⅲ(procollagen Ⅲ)、PDGFRα和PDGFRβ的mRNA含量,免疫组化法观察心肌组织波形蛋白(vimentin)、α-SMA、PDGFRα、PDGFRβ及磷酸化的PDGFRβ(p-PDGFRβ)的蛋白表达,免疫荧光法定位PDGFRα和PDGFRβ表达的细胞类型.结果:(1)干预第14天和第28天血压测定结果显示DOCA及DOCA+IMA组大鼠的SBP均明显高于对照组(P<0 01),而DOCA组与DOCA+IMA组的SBP无显著差异(P>0.05).干预第28天,DOCA组心肌间质纤维化程度和PVCA/VA比值明显高于对照组(P<0 01),DOCA+IMA组心肌间质纤维化程度和PVCA/VA比值虽高于对照组(P<0.05),但较DOCA组显著减小(P<0 01).(2)干预第14天,DOCA组的PDGFRα和PDGFRβ表达较对照组增加(P<0 01),DOCA+IMA组的PDGFRα和PDGFRβ 表达较DOCA组减少(P<0 01).干预第28天,与对照组相比,DOCA组的PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ和procollagen Ⅲ表达明显增加(P<0 01),而PDGFRα的表达未见明显增加,组内比较显示PDGFRβ 表达大于PDGFRα,DOCA+IMA组PDGFRβ、p-PDGFRβ、FSP-1、α-SMA、procollagenⅠ和procollagen Ⅲ 表达较DOCA组减少(P<0 01).(3) 干预第28天,对照组大鼠心脏间质主要是vimentin阳性的成纤维细胞,α-SMA表达很少,DOCA组大鼠α-SMA阳性的梭形细胞(肌成纤维细胞)数量明显增加(P<0 01),DOCA+IMA组较DOCA组肌成纤维细胞数量均减少(P<0.05).(4)在成纤维细胞和肌成纤维细胞中检测到的PDGFRα蛋白表达呈阳性,而在血管平滑肌细胞(VSMCs)中未检测到.PDGFRβ蛋白不仅在成纤维细胞和肌成纤维细胞中表达呈阳性,而且在VSMCs中也有表达.结论:在DOCA诱导的盐敏感性高血压大鼠心肌纤维化中,PDGFRα主要在心肌纤维化早期发挥作用,而PDGFRβ在心肌纤维化的全程均起作用.PDGFRα和PDGFRβ表达定位于心脏成纤维细胞和肌成纤维细胞,伊马替尼能够减少肌成纤维细胞的数量,表明伊马替尼很可能通过抑制PDGFs/PDGFRs信号通路,减少成纤维细胞的增殖和转化生成肌成纤维细胞,从而减轻心肌纤维化.范彬,马礼坤,李谦,汪麟,周俊岭,吴佳纬 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
慢性酒精摄入所致的肝细胞上皮一间充质转化参与小鼠肝纤维化形成
目的:探讨慢性酒精摄入对肝组织病理学改变的影响及上皮一间充质转化对肝纤维化形成的作用.方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为3组:对照组灌胃给予与酒精组等体积的蒸馏水,低剂量和高剂量酒精组分别灌胃给予2.0g·kg-1·d-1和4.0g·kg~·d.酒精5个月.肝组织病理学改变和纤维化分别用HE和Masson三染色观察;荧光标记的TUNEL法检测肝组织细胞凋亡;自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)的活性;肝组织成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(0[-SMA)和E.钙黏素表达采用免疫荧光观察;E-钙黏素、α-SMA、FSP-1、转化生长因子β,(TGF-β1)和缺氧诱导因子lα(HIF-1α)蛋白表达水平用Westernblotting检测.结果:与对照组相比,小鼠酒精灌胃5个月后,血清ALT和AST活性升高;肝组织细胞凋亡增加;低剂量酒精组呈现肝脂肪变性和轻度的肝纤维化,高剂量酒精组呈现出严重的肝纤维化;肝组织丙二醛(MDA)含量升高,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)下降;肝细胞E-钙黏素表达下降,俚.SMA表达增加;低剂量酒精组肝细胞内白蛋白和FSP-1共定位,而高剂量酒精组肝细胞内只表达FSP-1Westernblotting检测结果显示,E-钙黏素表达下降,而d-SMA、FSP-1、TGF-β1和HIF-lα蛋白表达水平升高,但是HIF.1a蛋白表达水平在高、低酒精组之间无差别.结论:慢性酒精摄人可诱导肝纤维化,部分成纤维细胞来源于肝细胞上皮一间充质转化,其机制可能与肝细胞氧化状态、TGF-β.及HIF-lα升高有关.孙玉生,林波,王思谦,刘悦,张优敬,郑乃芮,皇甫超申 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
MicroRNA-16对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞增殖、侵袭及细胞因子分泌的影响
目的:研究microRNA-16(miR-16)对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者滑膜成纤维细胞(rheumatoid arthritis synovial fibroblasts,RASFs)增殖、侵袭及细胞因子分泌的影响.方法:体外分离培养RASFs,脂质体转染化学合成的miR-16 mimic或miR-16抑制剂,分别采用MTT法、Transwell小室法和流式细胞术检测其对RASFs增殖、侵袭及凋亡的影响;RT-PCR和Western blotting检测miR-16对RASFs基质金属蛋白酶3/13(matrix metalloproteinase 3/13,MMP3/13)及白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)表达的影响.结果:增殖实验结果表明miR-16可显著抑制RASFs的增殖;细胞侵袭结果表明miR-16可显著抑制RASFs的侵袭;流式细胞术检测发现miR-16对RASFs凋亡无显著影响;miR-16可下调MMP3/13及IL-1β的表达水平.结论:miR-16在RA的发生中起着重要作用,它可能通过下调MMP3/13及IL-1β的表达抑制RASFs增殖和侵袭.这为进一步研究miR-16在RA中的作用机制奠定了基础.史栋梁,史桂荣 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
新生大鼠心肌成纤维细胞培养方法的比较
目的:建立并比较新生大鼠心肌成纤维细胞的培养方法.方法:分别通过胶原酶+胰酶消化法和胰酶消化法对新生大鼠心肌组织进行消化,利用贴壁时间差分离心肌细胞和心肌成纤维细胞,然后对收集的心肌成纤维细胞进行形态、纯度及对药物反应方面的检测.结果:在细胞形态和纯度方面,2种方法收集的心肌成纤维细胞没有明显差异,但用胶原酶+胰酶消化法可以获得更多数量的心肌细胞;在药物反应方面,采用胰酶消化法获得的心肌成纤维细胞比胶原酶+胰酶消化法具有更强的增殖能力.结论:采用胶原酶+胰酶消化法和胰酶消化法可以获得相同形态和纯度的心肌成纤维细胞,但是采用胰酶消化法获得的心肌成纤维细胞对药物具有更强的增殖反应能力.孙刚,薛睿聪,刘晨,董吁钢 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
肠肌成纤维细胞与IBD相关肠纤维化
肠纤维化是炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)的并发症,其主要病理表现为以胶原为主的细胞外间质(extracellular matrix,ECM)在肠组织的过度合成和异常沉积.其中,溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)以直肠和结肠的浅表性炎症病变为主,其肠纤维化一般只限于粘膜下层;而克罗恩病(Crohn disease,CD)则是以全肠道均可受累的透宋佳,张晓岚 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
扶肾降浊方含药血清对肾小管间质损害大鼠成纤维细胞TGF-β1/Smads信号转导通路的影响
目的:探讨扶肾降浊方对系膜增生性肾小球肾炎(Ms PGN)大鼠肾小管间质损害的疗效机制.方法:采用扶肾降浊方水溶液灌胃干预Wistar大鼠常规制备含药血清;在Ms PGN动物模型基础上,延长造模时间至20周,使其自然发展为肾小管间质损害模型,体外培养12、16和20周模型大鼠间质成纤维细胞;采用real-time PCR和Western blotting法检测扶肾降浊方含药血清对病理状态间质成纤维细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3和Smad7 mRNA及蛋白表达的影响.结果:Ms PGN大鼠间质成纤维细胞TGF-β1和Smad3 mRNA和蛋白表达上调,Smad7 mRNA和蛋白表达下调.扶肾降浊方含药血清随着给药周期的延长可部分逆转Ms PGN间质损害造成的上述mRNA和蛋白表达异常.结论:扶肾降浊方含药血清对Ms PGN大鼠间质成纤维细胞保护作用可能与调节TGF-β1/Smads信号转导通路有关.李春雨,苏玮莲,魏晓露,李国霞 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
真核表达载体pIRES2-ZsGreenl-opLA的构建及其在猪成纤维细胞的表达
α-乳清蛋白(α-lactalbumin,α-LA)是哺乳动物乳汁中一种重要的蛋白质,富含机体必需氨基酸和支链氨基酸,其极佳的氨基酸比例、易吸收性以及功能特异性,使得α-LA在婴幼儿个体正常生长中具有重要的意义.本实验旨在构建人α-乳清蛋白真核表达载体pIRES2-ZsGreenl-opLA,将其转染至猪(Sus scrofa)的成纤维细胞,获得稳定表达人仪一LA的细胞.根据猪基因密码子偏爱性优化并合成人α-乳清蛋白基因mRNA序列opLA,并将其定向克隆入pIRES2一ZsGreenl真核表达载体,双酶切及测序方法鉴定重组载体;脂质体介导的方法将载体转染入培养的猪成纤维细胞,荧光显微镜下观察转染效果,G418抗性筛选重组细胞;RT-PCR方法检测目的基因的表达.结果表明,通过酶切以及测序鉴定得到的重组载体pIRES2一ZsGreenl-opLA构建成功;荧光显微镜下观察,转染了plRES2-ZsGreenl-opLA和pIRES2一ZsGreenl空载体的细胞均发出绿色荧光,且荧光多集中于细胞核;筛选重组细胞的最小G418浓度为400ng/μL;RT-PCR法检测到与目的基因大小一致的片段,而未转染组和转染空载体组均未检测到.本实验成功构建真核表达载体pIRES2-ZsGreenl-opLA,并获得稳定表达目的基因的猪成纤维细胞,该细胞可作为进一步研究转基因克隆猪的供体细胞.李艳玲,王颖,党文庆,郝柱,徐宁迎,张金枝 - 农业生物技术学报文章来源： 万方数据
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