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ILKsiRNA对高糖刺激的人肾小管上皮细胞GSK-313;及β-catenin表达的影响
目的:探讨高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中整合素连接激酶小干扰RNA(ILK siRNA)对糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化和β-连环蛋白(β-catenin)核内表达的影响及意义.方法:体外培养人近端肾小管上皮细胞系HKC,分为正常对照组(NG)、高糖组(HG)、高糖+阴性转染对照组 (HG+HK)和高糖+ILK siRNA组(HG+ILK siRNA).倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达.RT-PCR及Western blotting检测ILK mRNA及蛋白表达水平;免疫细胞化学检测磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和β-catenin表达.Western blotting检测总GSK-3β、p-GSK-3β、核β-catenin、总β-catenin、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平.结果:(1)倒置荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,证实构建的siRNA重组质粒成功转染HKC细胞;(2)与HG和 HG+HK组相比,HG+ILK siRNA组ILK mRNA及蛋白水平下降,但较NG组表达仍高;(3)HG+ILK siRNA组ILK基因沉默后,p-GSK-3β与核β-catenin蛋白表达较HG及HG+HK组均下降,但较NG组表达仍高.而总GSK-3β与总β-catenin 在各组表达无明显差异.结论:ILK、GSK-3β和β-catenin可能参与了高糖介导的肾小管上皮细胞转分化过程.ILK可能通过调节Wnt/β-catenin途径下游效应蛋白GSK-3β和β-catenin的表达而促使肾小管上皮细胞转分化.闰喆,姚芳,张丽萍,郝军,吴海江,段惠军 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
ILK siRNA对高糖刺激的人肾小管上皮细胞GSK-3β及β-catenin表达的影响
目的:探讨高糖诱导肾小管上皮细胞转分化中整合素连接激酶小干扰RNA(ILK siRNA)对糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)磷酸化和β-连环蛋白(β-catenin)核内表达的影响及意义.方法:体外培养人近端肾小管上皮细胞系HKC,分为正常对照组(NG)、高糖组(HG)、高糖+阴性转染对照组 (HG+HK)和高糖+ILK siRNA组(HG+ILK siRNA).倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达.RT-PCR及Western blotting检测ILK mRNA及蛋白表达水平;免疫细胞化学检测磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β)和β-catenin表达.Western blotting检测总GSK-3β、p-GSK-3β、核β-catenin、总β-catenin、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平.结果:(1)倒置荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达,证实构建的siRNA重组质粒成功转染HKC细胞;(2)与HG和 HG+HK组相比,HG+ILK siRNA组ILK mRNA及蛋白水平下降,但较NG组表达仍高;(3)HG+ILK siRNA组ILK基因沉默后,p-GSK-3β与核β-catenin蛋白表达较HG及HG+HK组均下降,但较NG组表达仍高.而总GSK-3β与总β-catenin 在各组表达无明显差异.结论:ILK、GSK-3β和β-catenin可能参与了高糖介导的肾小管上皮细胞转分化过程.ILK可能通过调节Wnt/β-catenin途径下游效应蛋白GSK-3β和β-catenin的表达而促使肾小管上皮细胞转分化.闫喆,姚芳,张丽萍,郝军,吴海江,段惠军 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
ACSL3在前列腺癌细胞系中的表达及其对前列腺癌转移的影响
目的:观察比较长链脂酰辅酶A合成酶3 (long-chain acyl-CoA synthetase 3,ACSL3)在前列腺正常上皮细胞和不同类型前列腺癌细胞系中的表达差异,通过构建ACSL3基因稳定表达的前列腺癌细胞株研究ACSL3对前列腺癌细胞侵袭能力的影响.方法:利用RT-PCR方法检测ACSL3 mRNA在前列腺正常上皮细胞、局限性及转移性前列腺癌细胞中的表达情况,分析其表达与前列腺癌发生、进展及转移的关系;以前列腺癌细胞基因组cDNA为模板,通过PCR扩增ACSL3基因,重组构建含有Flag标签的pCDNA3.1(+)-Flag-ACSL3质粒,包装慢病毒,转染前列腺癌细胞,通过荧光显微镜、RT-PCR和Western blotting等方法鉴定ACSL3在细胞内的表达情况;利用Tr-answell侵袭实验研究ACSL3对前列腺癌细胞侵袭能力的改变.结果:较前列腺正常上皮细胞,各种前列腺癌细胞中ACSL3 mRNA表达均明显下降.同时,局限性前列腺癌细胞中ACLS3 mRNA表达较转移性前列腺癌细胞明显升高;此外,雄激素非依赖性前列腺癌细胞比雄激素依赖性前列腺癌细胞中ACLS3 mRNA表达显著降低.进而,我们成功构建和包装了表达ACSL3基因的pCDNA3.1(+)-Flag-ACSL3重组质粒及慢病毒,并转染前列腺癌细胞,筛选出稳定表达株;并且,通过Transwell实验证实ACSL3表达与前列腺癌细胞的侵袭能力呈负相关.结论:前列腺正常上皮细胞及不同前列腺癌细胞系中ACSL3的表达存在明显差异,提示ACSL3可能在前列腺癌的发生发展中起重要作用;成功构建了ACSL3基因稳定表达的前列腺癌细胞株,并初步证实ACSL3过表达可以抑制前列腺癌细胞的侵袭力.李科,陈怡,董艳,叶志强 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
胃癌中葡萄糖神经酰胺合成酶和P-gp的表达及意义
目的 分析葡萄糖神经酰胺合成酶(glucosylceramide synthase,GCS)和P-糖蛋白(P glycoprotein,P-gp)在胃癌组织中的表达及相关性,及二者与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法检测132例胃癌组织及癌旁组织中GCS和P-gp蛋白的表达;应用实时荧光定量PCR技术检测胃癌组织中GCS和P-gp mRNA的表达.结果 (1)胃癌组织中GCS、P-gp阳性率均高于癌旁组织(P<0.01).(2)胃癌组织中GCS与P-gp表达呈正相关(P<0.001).(3)胃癌组织中GCS和P-gp mRNA表达呈正相关(P<0.01).(4)胃癌中GCS阳性率与肿瘤浸润深度、淋巴结转移以及TNM分期有关(P<0.05);P-gp阳性率与肿瘤大小、分化程度、浸润深度以及TNM分期有关(P<0.05).结论 胃癌组织中GCS不仅和P-gp与多药耐药有关,且可提示肿瘤的浸润、转移.胡萍萍,房栋,陈淼,陈谦,范钦和 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
酶促不对称催化手性合成系统研究进展
手性化合物由于具有特殊的立体结构,其对映体常表现出不同的物理化学特性和生理活性,近年来在新材料开发、新药设计、精细化学品合成等领域中发挥重要作用.手性化合物的传统制备方法是化学法,即利用手性配体或前体和催化剂(常为过渡金属)等来进行不对称合成.但由于这些方法存在试剂昂贵、反应条件苛刻(高温高压与强酸强碱)、光学纯度低等缺点,难于适应实际工业生产的要求[1].与传统化学合成法相比,生物酶法不对李伟翔,李春,刘桂艳,戴大章 - 分子催化文章来源： 万方数据 -
蓝斑核的线粒体氧化应激受活性一氧化氮合成酶的调控
去甲肾上腺素能(noradrenergic,NA)蓝斑核(locus coeruleus,LC)神经元支配大脑的大多数部位,保持大脑的醒觉状态,并在兴奋和紧张时期调节神经元的活动和可塑性.LC的缺失是老龄化相关的神经退行性疾病如帕金森病(Parkinson's disease,PD)和阿尔兹海默病(Alzheimer's disease,AD)的主要特征.为了探讨引起这类疾病的可能的生理因素,作者采用电生刘紫萍 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
不同低氧暴露时间对小鼠骨骼肌ERα/PDK4调节的影响
目的:研究不同低氧暴露时间对小鼠骨骼肌雌激素受体相关受体(estrogen receptor related receptors α,ERRα)与丙酮酸脱氢酶激酶4(PαK4)DNA结合活性及PDK4基因表达的影响,以探讨低氧条件下影响糖代谢及其信号分子之间的相互调节可能的机制.方法:野生小鼠随机分为常氧组、低氧组(氧浓度11.25%左右,模拟海拔高度4500m),而后又进一步分为0天、7天、14天、28天组,每组10只.低氧暴露时间为每天8h.同天数的小鼠常氧组与低氧组脱颈处死.染色质免疫共沉淀法(Chip)测定ERRα/PDK4结合活性,Real-TimePCR测定骨骼肌PDK4mRNA含量.结果:1)随着天数增加,低氧组ERRα/PDK4的结合活性有增加的趋势,但没有显著性差异;2)随着天数增加,低氧28天组PDK4mRNA相对表达量与0天组相比显著性升高(P〈0.05),且与28天常氧组相比也有显著性增加(P〈0.05).结论:低氧28天小鼠骨骼肌PDK4mRNA相对表达量显著增加,但其ERRα/PDK4的结合活性并没有显著性变化,推测低氧下蛾并不是促进PDK4mRNA表达的主要转录因子.何诗依,陈婷,孙海洋,张缨 - 体育科学文章来源： 万方数据 -
磷酸肌酸钠对小儿EB病毒感染后心肌的保护作用
目的:观察磷酸肌酸钠对小儿EB病毒感染后心肌的保护作用.方法:EB病毒感染后心肌磷酸肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肌钙蛋白T(c Tn T)异常患儿80例,随机分为对照组(40例)和治疗组(40例).对照组给予常规抗病毒及对症支持治疗,治疗组在对照组治疗基础上加用磷酸肌酸钠,比较两组患儿治疗前后心肌CK-MB、c Tn T及心电图的变化.结果:治疗前治疗组CK-MB为(50.48±16.43)μg/L、c Tn T为(0.070±0.026)ng/m L,对照组CK-MB为(49.96±17.09)μg/L、c Tn T为(0.068±0.031)ng/m L,治疗后治疗组CK-MB为(20.79±7.14)μg/L、c Tn T为(0.008±0.001)ng/m L,对照组CK-MB为(38.48±11.61)μg/L、c Tn T为(0.012±0.002)ng/m L,治疗组治疗后与治疗前比较及治疗后两组间比较差异均有统计学意义(P<0.01).治疗前治疗组心电图异常21例,对照组心电图异常19例,治疗后治疗组心电图异常5例,对照组异常12例,治疗组治疗后与治疗前比较(P<0.01)及治疗后两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:磷酸肌酸钠可使小儿EB病毒感染后血清CK-MB、c Tn T及心电图更好的得到恢复,使心肌细胞得到更好的保护.温晓滨,袁程远,何亚薇,李磊,冯斌 - 儿科药学杂志文章来源： 万方数据 -
赛前训练对中国式摔跤女运动员心肌损伤标记物影响及茶多糖干预研究
目的:探讨中国式摔跤女运动员赛前训练的心肌损伤特点及茶多糖干预效果和机制.方法:选取20名优秀中国式摔跤女运动员随机分为安慰剂训练组和茶多糖训练组,先进行4周大训练量运动,经1周调整训练后再进行一次高强度专项体能训练,整个训练期每晚睡前1h进行安慰剂和茶多糖补充,剂量均为10 mg/kg体重,分别测试大训练量运动开始前一天清晨8点、2周大训练量运动结束后次日清晨8点、4周大训练量运动结束后次日清晨8点,一次高强度专项体能训练前、训练后即刻、训练后4h和24 h血液cTnT、CK-MB、MDA、SOD、CAT、GSH-Px、BV、PV、HRD、RCA、VR和TK.结果:4周大训练量运动和一次高强度专项体能训练后,两组血液cTnT、CK-MB变化趋势一致:2周大训练量运动后明显升高,4周大训练量运动后处于恢复状态;运动后即刻升高,4h达高峰,24 h基本恢复;组间同时相比,茶多糖训练组cTnT、CK-MB值均较低,且血液MDA、SOD、CAT和GSH-Px及BV、PV、HRD、RCA、VR和TK有显著改善.结论:中国式摔跤女运动员4周大训练量运动过程中心肌细胞在损伤与修复的循环中逐渐产生适应,随运动周期延长对损伤抵抗力增强;一次高强度专项体能训练后的心肌损伤多为可逆性微小损伤.茶多糖可通过增强抗氧化能力,减轻心肌氧化应激损伤;改善血液流变性,提高心肌血液有效灌流,增强心肌细胞耐缺血、缺氧能力等机制降低中国式摔跤女运动员心肌损伤.孙红梅 - 体育科学文章来源： 万方数据 -
p21活化激酶6削弱非小细胞肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的分子机制水
目的:探讨调控p21活化激酶6(PAK6)的微小RNA(miRNA)与非小细胞肺癌侵袭及迁移的关系,并了解PAK6下游分子信号机制.方法:通过生物信息学数据库预测靶向PAK6的miRNA,转染miRNA模拟物及抑制剂,Westernblotting及实时定量荧光PCR(real-timePea)检测A549细胞中PAK6的表达量,萤光素报告酶实验检测预测miRNA对以肠的调控,并行体外迁移及侵袭实验,检测转染miRNA对PC-3细胞迁移及侵袭能力的影响.转染目标miRNA及siPAK6,Westernblotting检测A549细胞基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达量.结果:生物信息学预测miR-23a可能是调控烈跖的靶向miRNA.Westernblotting检测转染miR-23a组PAK6表达量下降69%,而转染miR-23a抑制剂组PAK6表达量上升52%,差异均有统计学意义.萤光素报告酶实验结果显示,转染miR-23a后野生型PAK6组萤光素酶活性下降52%,而突变组差异无统计学意义(P〉0.05).Real.timePCR检测3组PAK6mRNA的表达差异无统计学意义(P〉0.05).体外迁移及侵袭实验示,转染miR-23a组迁移细胞数减少73%,侵袭的细胞数减少59%.Westernblotting检测发现,转染siPAK6组MMP-9的表达下降85%(P〈0.01),转染miR-23a组MMP-9的表达下降76%(P〈0.01).结论:miR-23a通过PAK6.MMP-9信号途径引起非小细胞肺癌细胞迁移及侵袭能力的下降.蔡松旺,李冬霞,安军,张军航 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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