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脂多糖通过PI3彰Akt/mToR通路调控巨噬细胞自噬

目的:观察脂多糖对巨噬细胞自噬活化的影响及相关信号通路的探讨.方法:体外培养巨噬细胞株RAW264.7,分为对照组、饥饿状态激活自噬组、单纯脂多糖(LPS)刺激组、LPS+P13K抑制剂(hVps34)组和LPS+roTOR抑制剂(雷帕霉素)组.构建荧光真核表达载体pcDNA3.1.GFP-LC3,转染巨噬细胞,通过荧光显微镜观察各组细胞中自噬体形成情况.qRT.PCR方法检测各组中与细胞自噬相关的Atg5、Atg7、LC3一II和Bnip3mRNA表达水平的改变.利用Westernblotting检测LC3-II、P-Akt和p-roTOR蛋白在各组中的表达情况,以评价LPS激活巨噬细胞自噬的分子通路.结果:成功构建稳定表达GFP.LC3的巨噬细胞,在荧光显微镜下可以观察到自噬在饥饿状态组、LPS+hVps34组和U玛+雷帕霉素组均有明显增强;qRT-PCR检测到Atg5、LC3-II和Bnip3mRNA的表达在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组均有明显增强,而在LPS组中略微下降;Westernblotting检测发现p-Akt在饥饿状态组、LPS组和LPS+雷帕霉素组中表达明显升高;p-mTOR在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组表达明显下降;LC3-II的表达在饥饿状态组、LPS+hVps34组和LPS+雷帕霉素组中表达要高于对照组和LPS组.结论:LPS参与巨噬细胞自噬的调控,其可能的信号通路为P13K/Akt/mTOR通路,但仍存在其它有效的调控通路.

杜涛,黄海,陈欣,丁红,张睿,刘梅兰,陈慧 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

辣椒素对脂多糖诱导血管内皮细胞活化的影响及机制

目的:探讨辣椒素对脂多糖(LPS)刺激后小鼠主动脉内皮细胞活化的影响,并探讨其可能机制.方法:(1)体外分离培养小鼠主动脉内皮细胞,免疫荧光鉴定内皮细胞特异性标志.(2)以100μg/L LPS作用于血管内皮细胞后,以不同浓度的辣椒素(50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L)进行干预,分别于12、24和48 h收集主动脉血管内皮细胞及细胞上清液.采用ELISA法检测各组细胞上清液中的可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)、可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)和可溶性P-选择素(sP-selectin)水平,Western blotting法检测各组主动脉血管内皮细胞核内NF-κB p65水平和胞浆p-IκBα、IκBα水平.结果:与对照组相比,LPS组细胞上清液中sP-selectin、sICAM-1和sVCAM-1含量显著升高(P<0.05),LPS能够时间依赖性上调sICAM-1和sVCAM-1的含量.与同时点的LPS组相比,辣椒素能够剂量依赖性下调sP-selectin、sICAM-1和sVCAM-1水平.与对照组相比,LPS作用24 h后,细胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα蛋白水平显著升高(P<0.05),胞浆IκBα蛋白水平显著降低(P<0.05).与同时点LPS组相比,辣椒素能够剂量依赖性下调细胞核内NF-κB p65和胞浆p-IκBα蛋白的水平(P<0.05),剂量依赖性上调胞浆IκBα蛋白水平(P<0.05).结论:辣椒素能够显著抑制LPS作用后血管内皮细胞活化水平,该效应可能是通过下调IκBα降解和NF-κB p65胞核内转位而实现的.

卢阳,赵光举,洪广亮,邱俏檬,李冬,卢中秋 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

骨髓来源间充质干细胞培养上清液减轻脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤

目的:观察经尾静脉输注骨髓间充质干细胞培养上清液(MSCs CdM)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠急性肺损伤的治疗作用及其机制.方法:采用全骨髓培养法分离纯化骨髓间充质干细胞,传至第3代时观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志,并且收集上清液用超滤离心管进行离心.30只BALB/c小鼠随机分为对照组、LPS模型组和MSCs CdM治疗组.对照组腹腔内注射生理盐水(0.01 mL/g),LPS组和MSCs CdM治疗组腹腔内注射LPS(5 mg/kg,0.01 mL/g)制备急性肺损伤模型.造模1h后经尾静脉输注MSCs CdM(MSCs CdM治疗组)或生理盐水(LPS组或对照组)300 μL.6h后处死小鼠,留取标本检测肺组织病理形态学、肺组织湿干重比(W/D)、支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白含量、血清及BALF中细胞因子水平和肺组织中髓过氧化物酶(MPO)的活性.结果:与对照组比较,LPS处理后肺组织病理损伤严重,BALF中蛋白、血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)含量、肺组织中MPO活性及肺组织湿干重比均显著升高.与LPS组比较,MSCs CdM治疗组肺组织病理损伤程度减轻,BALF中蛋白、血清TNF-α和IL-6含量、肺组织中MPO活性及肺组织湿干重比均显著降低,而BALF中白细胞介素10 (IL-10)和角质细胞生长因子(KGF)水平显著高于LPS组和对照组.结论:骨髓间充质干细胞培养上清液可有效减轻LPS诱导的急性肺损伤,其作用机制可能与其调节肺部TNF-α、IL-6、IL-10和KGF的水平有关.

许欣婷,董明清,胡美,徐敦全,李志超,吴昌归 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

生物发酵糖类商业化

据"www.ptoline.com"报道,生物塑料在很大程度上依赖于植物糖类的发酵.企业希望改变从粮食作物如玉米中获得糖的方法,

严淑芬 - 现代塑料加工应用

文章来源：万方数据

人参二醇组皂苷具有与地塞米松类似的改善LPS处理小鼠肾功能的作用

目的:研究人参二醇组皂苷(PDS)和地塞米松(DEX)是否具有类似的减轻LPS诱导的小鼠急性肾损伤(AKI)的作用,并探讨它们的作用机制.方法:C57BL/6小鼠随机分为4组,除对照组腹腔注射生理盐水外,其余3组均经腹腔注射LPS 10 mg/kg,PDS组和DEX组小鼠在LPS注射前1h分别经腹腔注射PDS(25.0 mg/ks)或DEX(2.5 mg/kg).12 h后麻醉下取血和肾脏组织备生物化学与免疫印迹检测.结果:LPS组小鼠血尿素氮和肌酐含量显著高于对照组(P<0.01),而PDS组和DEX组则明显低于LPS组(P<0.05);PDS和DEX上调LPS处理的小鼠肾组织IκB蛋白的表达,抑制NF-κB信号通路的活化,进而减少TNF-α和IL-6的产生;PDS和DEX均能下调LPS处理的小鼠肾脏诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达,上调肾组织锰过氧化物歧化酶的表达,减轻肾脏的氧化应激损伤.此外,PDS和DEX均明显上调LPS处理的小鼠肾脏组织细胞核糖皮质激素受体蛋白的含量.结论:人参二醇组皂苷具有与DEX相类似的减轻LPS诱导的小鼠AKI的作用,而且,它们的作用机制相似,但PDS的药效学是否也通过糖皮质受体介导还需进一步研究.

陈燕,杜艳伟,王晓琴,付双,刘莲勤,于淇,方圆,高品,杨光 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

a7nAChR参与生理浓度糖皮质激素的抗炎作用

目的:探讨胡烟碱型乙酰胆碱受体(a7nAChR)在生理浓度糖皮质激素(GCs)抗炎过程中的作用.方法:MTT法检测不同浓度氢化可的松对小胶质细胞BV-2活性的影响;在建立LPS刺激的BV-2细胞炎症模型基础上,实验分组如下:(1)空白对照组;(2)LPS组;(3)GCs+LPS组;(4)a7nAChR阻断剂甲基牛扁亭碱(MLA)+GCs+LPS组,ELISA法测定细胞上清中TNF-a和IL-1B的含量.结果:2000和1000nmol/L氢化可的松可分别使细胞存活率降低至(76.9±5.5)%和(90.8±7.3)%,表现出超生理剂量GCs的细胞损伤作用.LPS明显刺激BV-2细胞释放TNF-a和IL-1B,并呈现时间和剂量依赖性.生理浓度(500和250nmol/L)的氢化可的松均可减少LPS诱导BV-2细胞释放TNF-a和IL-1B,10nmol/LMLA预处理BV-2细胞能拮抗GCs抑制炎症因子释放的作用.结论:ot7nAChR参与了生理浓度GCs的抗炎作用.

陈依雨,吕俊华,张梅 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

右美托咪定联合乌司他丁减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤

目的:研究右美托咪定(DEX)联合乌司他丁(UTI)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)的影响.方法:健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为5组:生理盐水对照组(NS组)、LPS模型组(L组)、右美托咪定治疗组(L+D组)、乌司他丁治疗组(L+U组)和右美托咪定+乌司他丁治疗组(L+D+U组).对照组股静脉给予5 mL/kg生理盐水(NS);模型组股静脉给予LPS(10 mg/kg);右美托咪定治疗组股静脉给予LPS (10 mg/kg),即刻持续输注右美托咪定(1μg·kg-1·h-1);乌司他丁治疗组股静脉给予LPS (10 mg/kg),即刻腹腔注射乌司他丁(50000 U/kg);右美托咪定联合乌司他丁治疗组股静脉给予LPS后立即持续输注右美托咪定(1μg·kg-1·h-1)及腹腔注射乌司他丁(50 000 U/kg).在注射LPS或NS后6h处死动物.血气分析检测动脉血氧分压(PaO2)、pH和碱剩余(BE);HE染色光镜下观察肺组织病理学变化并进行肺损伤评分;检测肺组织湿干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)、一氧化氮(NO)及前列腺素E2(PGE2)的含量;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白蛋白浓度;提取肺组织核蛋白,检测NF-κB p65的表达.结果:与NS组比较,L组动脉血PaO2、pH和BE降低,肺组织水肿、出血、炎症细胞浸润程度及肺损伤评分上升,肺组织TNF-α、IL-1β、MIP-2、MDA、NO、PGE2含量及W/D升高,MPO活性升高,肺组织NF-κB表达明显升高.与L组相比,联合治疗组动脉血PaO2 、pH和BE上升,肺组织水肿、出血、炎症细胞浸润程度及肺损伤评分降低,TNF-α、IL-1β、MIP-2、MDA、NO、PGE2含量及W/D降低,MPO活性降低,肺组织NF-κB表达降低;与L组相比,右美托咪定和乌司他丁单独治疗组上述指标没有明显变化.结论:右美托咪定联合乌司他丁能够减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤.

姜远旭,徐世元,张雪萍,赵伟,周树勤 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据