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Evn-50对人乳腺癌MCF-7耐三苯氧胺细胞株生长和凋亡的影响
目的:通过研究黄荆子的乙酸乙酯提取物Evn-50在体外对人乳腺癌MCF-7和耐三苯氧胺细胞株(MCF-7/TAM-R)的生长和凋亡的影响,探索Evn-50在逆转乳腺癌耐药中的作用及其可能机制.方法:构建MCF-7/TAM-R细胞系,分别用DMSO、5μmol/L TAM、5μmol/L TAM+50μg/ml Evn-50和50 μg/ml Evn-50处理细胞.然后,采用MTT法测定细胞存活率,PI单染流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布情况,免疫蛋白印记法观察Evn-50和TAM单独或联合作用时的机制.结果:Evn-50单药或与TAM联合均可以降低人乳腺癌MCF-7和三苯氧胺耐药细胞株MCF-7/TAM-R的存活率,两药联合作用更为明显,同单用TAM组相比差异有统计学意义(P<0.01).Evn-50单药或与TAM联合应用对两株细胞的凋亡均有明显影响,且随着作用时间的延长细胞凋亡逐渐增多,其中以72 h时细胞凋亡率和G2期细胞比例最为明显(P<0.01).TAM和Evn-50联合处理无论是对MCF-7细胞还是对三苯氧胺耐药细胞MCF-7/TAM-R,均能明显下调p-AKT( Ser473)和p-MAPK44/42( Thr202/Tyr204)蛋白水平.结论:Evn-50能够抑制MCF-7和MCF-7/TAM-R细胞株的生长并诱导细胞凋亡,尤其在Evn-50与TAM联合处理时更为明显.其作用机制可能与AKT和MAPK信号通路的下调相关,但需要进一步研究证实.胡会永,周俊,万芳,董力枫,张峰,王一刻,陈芳芳,陈益定 - 浙江大学学报(医学版)文章来源： 万方数据 -
热休克蛋白27致敏对大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响
目的 观察热休克蛋白27(HSP27)致敏对大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的影响.方法 35只雌性Wistar大鼠分为HSP27致敏组、硼酸盐缓冲液(BBS)对照组、正常组,分别为15、15、5只大鼠.给予HSP27致敏组大鼠后肢皮下注射100μg的HSP27和完全弗式佐剂,腹腔注射1μg百日咳毒素.BBS对照组大鼠于相同部位注射等量BBS.正常组大鼠不作任何处理.注射前3d及注射后3d,1、2、4、6、8周,检测大鼠双眼眼压.注射后4、6、8周行视网膜冰冻切片,采用原位末端标记法检测RGC的凋亡情况,计算细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清和脑脊液中HSP27抗体的含量.结果 HSP27致敏组、BBS对照组、正常组大鼠注射前后眼压均无明显波动,差异均无统计学意义(P>0.05).HSP27致敏组于注射后4周即可见RGC凋亡,注射后6周凋亡的RGC明显增多.BBS对照组及正常组均未见RGC凋亡.HSP27致敏组大鼠血清、脑脊液中HSP27抗体含量分别于注射后4、6周出现高峰,然后随着注射时间延长而递减.注射后4、6、8周,HSP27致敏组RGC凋亡率、血清中HSP27抗体含量、脑脊液中HSP27抗体含量分别与BBS对照组、正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);BBS对照组RGC凋亡率、血清中HSP27抗体含量、脑脊液中HSP27抗体含量与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 HSP27致敏可促进大鼠RGC的凋亡.脑脊液中HSP27抗体含量与RGC凋亡趋势一致.赵薇,戴乐,唐志屏,曾勇,李燕 - 中华眼底病杂志文章来源： 万方数据 -
Aurora激酶抑制剂ENMD-2076对人急性髓系白血病细胞的杀伤作用
目的:观察Aurora激酶抑制剂ENMD-2076对人急性髓系白血病(AML)细胞株的杀伤作用.方法:将不同浓度的ENMD-2076分别作用于对数生长期的AML细胞24 h、48 h,采用MTT比色法检测药物对细胞的生长抑制作用;应用Hoechst荧光染色法检测细胞凋亡率,Western blot法检测药物处理后Caspase途径和凋亡相关蛋白的改变.结果:ENMD-2076能显著抑制AML细胞株THP-1和Kasumi-1的生长(P <0.001),24 h时对THP-1和Kasumi-1的半数抑制浓度分别是9.32μmol/L和7.23 μmol/L.Hoechst荧光染色证实ENMD-2076能使THP-1细胞发生染色质浓缩等凋亡改变.Western blot检测证实,ENMD-2076能激活Caspase-3、Caspase-9、Caspase-8和PARP,上调促凋亡蛋白Bak、Bax、Bad和Bim,下调抗凋亡蛋白Mcl-1的表达.结论:Aurora激酶抑制剂ENMD-2076能显著抑制人AML细胞株THP-1和Kasumi-1的增殖并促进其凋亡,对凋亡相关蛋白的调控是其作用机制之一.曹慧,李敏,钱文斌 - 浙江大学学报(医学版)文章来源： 万方数据 -
银杏叶提取物对视网膜Muller细胞血管内皮生长因子表达的影响
研究显示,糖尿病视网膜病变(DR)与血管内皮生长因子(VEGF)基因启动区的多态性有关.眼部VEGF主要由视网膜Muller细胞分泌,视网膜Muller细胞VEGF的生成和调节机制、阻止和逆转DR的发生发展一直是DR研究的热点.楼继先,胡昕倩,张志勇,李韧,王美钗 - 中华眼底病杂志文章来源： 万方数据 -
积雪草免疫抑制活性成分的分离纯化及效应研究
目的:对积雪草的免疫抑制活性成分进行分离、纯化及鉴定,并观察其对小鼠脾淋巴细胞增殖和凋亡的影响,探讨其免疫调节机制。方法:利用半制备型液相色谱对积雪草提取物进一步分离和纯化。运用流式细胞术观察积雪草活性成分对脾淋巴细胞凋亡和线粒体膜电位的影响。利用紫外光谱、电喷雾电离负离子模式质谱、[1 H ]核磁共振( NMR)、[13 C] NMR等数据鉴定所得活性成分结构。结果:(1)所得积雪草活性成分化合物Ⅰ、Ⅱ的分子量分别为302和286。(2)积雪草中化合物Ⅰ、Ⅱ能显著抑制小鼠脾淋巴细胞增殖。(3)积雪草中化合物Ⅰ、Ⅱ能促进小鼠脾淋巴细胞凋亡,降低线粒体膜电位。(4)[1H] NMR和[13C] NMR鉴定化合物Ⅰ、Ⅱ分别为槲皮素和山奈酚。结论:从积雪草中提取获得的黄酮化合物Ⅰ、Ⅱ分别为槲皮素及山奈酚,具有抑制小鼠脾淋巴细胞增殖的效应,其作用途径可能是促进脾淋巴细胞凋亡并降低线粒体膜电位。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
膜联蛋白A2对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和凋亡的影响
目的:研究膜联蛋白A2(annexin A2,ANXA2)对人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和凋亡能力的影响.方法:以HeLa细胞为研究对象,构建过表达载体以及ANXA2-siRNA,转染入细胞.将细胞分为正常对照组、scrambled组、ANXA2过表达组及ANXA2-siRNA组.应用real-time PCR法检测ANXA2 mRNA表达水平及Western blotting检测ANXA2蛋白表达水平.分别采用MTT法、Boyden小室法和流式细胞术观察ANXA2对HeLa细胞增殖、迁移及凋亡能力的影响.结果:ANXA2过表达组可以显著促进HeLa细胞的增殖和迁移;ANXA2-siRNA组明显抑制HeLa细胞的增殖和迁移;ANXA2对HeLa细胞凋亡几乎无影响.结论:沉默ANXA2对人宫颈癌细胞的凋亡无显著影响,但可显著抑制其增殖能力和迁移能力.ANXA2可能在宫颈癌的发生发展中具有十分重要的作用,提示它有可能成为宫颈癌治疗的分子靶点.魏建勋,马文君,李红梅 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
组蛋白去乙酰化抑制剂SBHA对急性髓细胞白血病细胞的杀伤作用
目的:观察组蛋白去乙酰化抑制剂suberic bishydroxamate( SBHA)对人急性髓系白血病(AML)细胞株的杀伤作用.方法:将不同浓度的SBHA分别作用于对数生长期的AML细胞24 h,MTT比色法检测药物对细胞的生长抑制作用;应用流式细胞术(FACS)检测细胞凋亡率,Westernblot法检测药物处理后Caspase途径和凋亡相关蛋白的改变.结果:SBHA能显著抑制AML细胞株U937ˉ、KG-1及Kasumi-1细胞的生长.AnnexinV-PI双标记法及FACS分析结果证实,SBHA能显著诱导白血病细胞的凋亡,激活Caspase-3、Caspase-9、Caspase-8,下调抗凋亡蛋白Bcl-2及Bcl-xl的表达,下调Survivin、XIAP及cIAP的表达.结论:组蛋白去乙酰化抑制剂SBHA能显著抑制人AML细胞株的增殖、促进其凋亡,对凋亡相关蛋白的调控是其作用机制之一.徐燕华,杨春梅,钱文斌 - 浙江大学学报(医学版)文章来源： 万方数据 -
白藜芦醇对视网膜色素上皮细胞增殖的影响
目的:探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对视网膜色素上皮细胞增殖的影响,并初步探讨其作用机制.方法:用0、50、100、150、200和300μmol/L Res作用于ARPE-19细胞24、48和72 h后,CCK-8法检测Res对ARPE-19细胞增殖的影响,0、100、150和200μmol/L Res作用ARPE-19细胞48 h,PI单染流式细胞术检测细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,免疫荧光化学法检测PCNA蛋白表达,实时荧光定量PCR(real-time PCR)法检测PCNA、P21和P27的mRNA表达水平.结果:CCK-8结果显示,Res抑制ARPE-19细胞增殖,呈时间和剂量依赖性;流式细胞术显示,Res使S期细胞百分比显著上升且各组凋亡率没有区别;免疫荧光显示,Res抑制PCNA蛋白表达,荧光减弱;real-time PCR显示,Res浓度依赖性地抑制PCNA的mRNA表达,而诱导表达P21和P27的mRNA.结论:Res能抑制ARPE-19细胞的增殖,使细胞阻滞在S期,其机制可能与白藜芦醇诱导P21与P27的mRNA表达、抑制PCNA的mRNA表达有关.王雯婕,陈剑,刘小勇,曲艺欣,周清,袁晟辰,郝晓宁 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
小鼠胚胎干细胞钙敏感受体的表达和其对细胞增殖的影响
目的:观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)的功能性表达。方法:(1)采用Western blotting 技术及免疫荧光染色分析CaSR蛋白在129小鼠ES-D3细胞系的表达;采用激光共聚焦扫描技术检测不同处理因素(包括G蛋白-PLC-IP3通路)对细胞内钙离子浓度([ Ca2+] i )的影响;应用MTT法和流式细胞术分析CaSR活化对mESCs增殖的影响。结果:CaSR蛋白在mESCs有表达;增加细胞外钙或者给予CaSR激动剂新霉素均可引起[ Ca2+] i和CaSR表达增加;CaSR活化可增加mESCs 的存活率和磷酸化ERK2蛋白的表达。 NPS2390( CaSR抑制剂)则能减弱这种作用。结论: CaSR在mESCs有表达;CaSR的活化参与了mESCs的增殖。孙健,于金凤,栾海荣,李爽,许晓义,何志鹏,魏韬,李丽,徐长庆 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
siArid2重组腺病毒载体的构建及其对肝癌细胞增殖的影响
目的:通过RNA干扰技术沉默内源性抑癌基因Arid2(si Arid2)的表达,观察其对肝癌细胞生长及细胞周期的影响.方法:设计3对特异性沉默Arid2基因的shRNA序列,分别克隆到腺病毒骨架载体上形成重组腺病毒质粒.将质粒转染到HEK293细胞中,包装和扩增形成完整高滴度的重组腺病毒Adsi Arid2-1~3.用构建好的腺病毒感染人肝癌SMMC-7721细胞,Western blotting方法检测Arid2蛋白的表达,筛选干扰效果最佳的重组腺病毒.MTS技术和流式细胞术观察干扰Arid2基因后肝癌细胞增殖和细胞周期的变化.结果:成功构建了高滴度的重组腺病毒Adsi Arid2-1~3.经Western blotting鉴定,Adsi Arid2-3为抑制效果最佳的重组腺病毒.MTS结果显示,Adsi Arid2组细胞在72 h、96 h的吸光度值与空细胞组和Adsicontrol组相比增高,细胞增殖速率明显加快.流式细胞术检测结果显示,Adsi Arid2组处于G1期、S期的细胞百分比与空细胞组和Adsicontrol组相比,G1期细胞百分比明显减少,S期细胞百分比明显增多.结论:成功构建干扰Arid2的重组质粒及重组腺病毒.沉默Arid2可以促进肝癌细胞的增殖,促进其由G1期向S期的转换.段玉洁,聂丽珠,田玲,李治,陈震,唐霓 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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