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5-脂氧合酶对缺氧诱导的视网膜新生血管形成的抑制作用
目的 观察5-脂氧合酶(5-LOX)对缺氧诱导的视网膜新生血管形成的抑制作用,探讨视网膜新生血管形成的可能机制.方法 鼠龄为7d的C57BL/6J幼鼠随机分为正常组、氧诱导视网膜病变(OIR)模型组、大剂量干预组、小剂量干预组、干预对照组.各组分别为12只.除正常组外,其余各组小鼠与哺乳母鼠共同置于氧浓度为(75±2)%的氧箱内饲养5d后转移至正常环境中饲养5d,建立OIR模型.12~17日龄时,大剂量干预组、小剂量干预组小鼠腹腔每天分别注射100、50 mg/kg 5-LOX抑制剂去甲二氢愈创木酸;干预对照组小鼠腹腔每天注射等体积1%二甲基亚砜;OIR模型组小鼠出氧箱后不作任何处理.石蜡切片苏木精-伊红染色并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核,CD34标记鼠新生血管内皮细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT PCR)检测视网膜中5-LOX、血管内皮生长因子(VEGF)-a、VEGF受体-2(VEGFR-2)的mRNA含量.蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测视网膜中5-LOX、VEGF-a、VEGFR-2、细胞外磷酸化信号调节蛋白激酶(P-ERK) 1/2的蛋白表达含量.结果 不同剂量干预组突破内界膜的视网膜新生血管内皮细胞核数较OIR模型组、干预对照组明显减少,差异有统计学意义(F=73.390,P<0.05).RT-PCR、Western blot检测结果显示,不同剂量干预组小鼠视网膜5-LOX、VEGF-a、VEGFR-2的mRNA和蛋白表达均较OIR模型组、干预对照组减少,差异有统计学意义(F=92.668,P<0.05);大剂量干预、小剂量干预组之间VEGFR-2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(F=2.118,P>0.05);5-LOX、VEGF-a、P-ERK 1/2相对蛋白表达比较,差异均有统计学意义(F=86.490、165.128、139.424,P<0.05).结论 缺氧可以诱导视网膜中5-LOX的高表达;5 LOX选择性抑制可以降低其表达并减少缺氧诱导的新生血管形成.贺涛,江黎,程谷萌,邢怡桥 - 中华眼底病杂志文章来源： 万方数据 -
MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡
目的:研究肌原纤维形成调节因子1 (MR-1)是否通过抑制蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/核因子E2相关因子2(Nrf2)途径减轻缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌细胞凋亡.方法:在原代培养的乳大鼠心肌细胞H/R模型上,采用Annexin V/PI双标法检测心肌细胞的凋亡率;以Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、磷酸化PERK、Nrf2、活化转录因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、Bcl-2和Bax的蛋白水平,研究过表达或敲低对于H/R致心肌细胞凋亡的影响及其与PERK/Nrf2途径活化的关系.结果:H/R引起心肌细胞凋亡;过表达MR-1减轻H/R引起的细胞凋亡(P<0.01),下调CHOP表达(P<0.05),引起Bcl-2/Bax值升高(P<0.01),并抑制H/R诱导的PERK磷酸化、Nrf2核转位和ATF4表达(P<0.01).敲低MR-1加重H/R引起的细胞凋亡(P<0.01)、CHOP表达上调(P<0.05)和Bcl-2/Bax值下降(P<0.01),并加重H/R诱导的PERK磷酸化(P<0.05)、Nrf2核转位和ATF4表达(P<0.01).结论:MR-1通过抑制PERK/Nrf2途径而减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡.陶天琪,王晓礽,徐菲菲,刘蜜,李玉珍,刘秀华 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
重症腹腔感染大鼠肠系膜淋巴液成分分析
目的 通过分析重症腹腔感染大鼠肠系膜淋巴液的成分,探讨重症腹腔感染时肠淋巴途径的作用.方法 将24只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为模型组与假手术组,每组12只.采用腹腔注射人工胃液联合大肠杆菌的方法制备重症腹腔感染模型.收集各组大鼠制模后4h的肠系膜淋巴液,进行白细胞计数及分类;检测肠淋巴液中内毒素、碱性磷酸酶(AKP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、谷氨酰胺转移酶(GST)、蛋白及各细胞因子的浓度.结果 重症腹腔感染大鼠肠淋巴液中中性粒细胞比例较假手术组明显升高(0.167±0.004比0.061±0.006,t=33.520,P<0.001),而巨噬细胞(0.009±0.001比0.020±0.004,t=-6.677,P<0.001)及淋巴细胞比例(0.824±0.005比0.921±0.004,t=-31.471,P<0.001)较假手术组明显降低.与假手术组比较,模型组大鼠肠淋巴液中内毒素水平(kEU/L:0.346±0.022比0.186±0.001,t=18.103,P<0.001)、AKP[U(金氏):13.97±5.55比3.76±0.18,t=4.503,P=0.006]、LDH(U/L:2 827.45±1 940.32比712.68±14.09,t=2.670,P=0.044)、CK(kU/L:2.19±1.21比0.70±0.01,t=3.035,P=0.029)、GST活性(kU/L:12.33±6.53比1.36±0.39,t=4.105,P=0.009)均明显升高,肠淋巴液中蛋白(g/L:4.40±0.48比2.84±0.16,t=6.882,P-0.001)、肿瘤坏死因子-α[TNF-α(ng/L):499.39±76.36比180.90±70.98,t=7.483,P<0.001]、白细胞介素-6[IL-6(μg/L):13.74±0.78比-0.07±0.07,t=52.972,P=0.001]、细胞间黏附分子-1[ICAM-1(ng/L):2 754.19±221.48比1 362.85±393.43,t=6.891,P<0.001]、单核细胞趋化蛋白-1[MCP-1(μg/L):28.23±1.77比24.87±1.15,t=3.561,P=0.007]及高迁移率族蛋白B1[HMGB1 (ng/L):1 392.78±572.42比564.17±21.32,t=3.543,P=0.016]水平均明显升高.结论 肠淋巴途径可能是重症腹腔感染导致远隔器官损伤的早期途径.张艳敏,崔乃强,张淑坤 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
原发皮肤外周T细胞淋巴瘤1例
患者男性,68岁.因左小腿瘤块半年入院.半年前发现左小腿长出一肿块,并逐渐增大,就诊时肿块直径已达6cm,肿块固定,无活动度.患者一般状况良好,左小腿肿块皮肤及其周围皮肤有瘙痒感,患者无发热,无浅表淋巴结肿大和肝脾肿大等其他特殊症状.追问病史,患者3年前发现胸壁多发不规则紫红色皮损,缓慢逐渐增大,现体检发现最大皮损大小5 cm*4 cm,皮损稍高出皮肤表面,皮肤无破溃.向春香,涂频,余波,何燕,夏春,石群立 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
TRPV1疼痛受体通过神经肽信号调节长寿与代谢
疼痛感觉与死亡率增加有关,但是痛觉是否直接影响老化尚未可知.美国科学家Riera等发现,TRPV1疼痛受体缺失的小鼠会变得长寿,在老年阶段呈现出年轻的代谢状态.TRPV1的缺失能阻止钙信号的级联反应,这种钙信号级联反应终止于脊髓痛觉神经元中由CREB调节的转录共激活因子CRTC1的核输出.在长寿的TRPV1基因敲除小鼠,CRTC1的核输出降低了神经肽降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP;来自支配胰岛的感觉神经末梢)的产量,随后促进胰岛素的郑媛媛 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
脓毒症患者外周血微小RNA-155和调节性T细胞表达的关系
目的 探讨微小RNA-155(miR-155)对脓毒症患者外周血CD4 +CD25+调节性T细胞(Treg)的调节作用,从而了解miR-155在脓毒症发病中的作用机制.方法 采用回顾性研究方法,选取江苏大学第四附属医院急诊科和重症监护病房(ICU)脓毒症患者60例(轻度20例、中度20例、重度20例)及20例健康对照者.于确诊后2h内取静脉血,采用流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+ Treg细胞表达;采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测miR-155、Foxp3mRNA表达;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)水平.结果 脓毒症患者外周血Treg表达率和miR-155、Foxp3mRNA表达以及IL-10水平均明显高于健康对照组[Treg:(2.89±1.13)%比(2.32±0.91)%,t=10.540,P=0.002; miR-155:1.19±0.48比0.80±0.33,t=8.605,P=0.006; Foxp3 mRNA:0.18±0.08比0.13±0.03,t=6.862,P=0.008; IL-10(ng/L):56.89±17.28比33.24±11.93,t=12.742,P=0.001];并且随着急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分增加而升高,重度组[Treg:(3.05±1.21)%,miR-155:1.36±0.79,Foxp3 mRNA:0.21±0.10,IL-10(ng/L):62.82±21.38]、中度组[Treg:(2.86±0.88)%,miR-155:1.25±0.56,Foxp3 mRNA:0.17±0.08,IL-10(ng/L):56.38±19.65]、轻度组[Treg:(2.61±0.87)%,miR-155:0.94±0.52,Foxp3 mRNA:0.15±0.05,IL-10(ng/L):45.43±14.40]之间两两比较差异均有统计学意义(均P<0.01).死亡组各指标明显高于存活组[Treg:(3.46±1.53)%比(2.85±1.03)%,t=14.250,P=0.005; miR-155:1.41±0.85比1.16±0.76,t=11.875,P=0.006;Foxp3mRNA:0.24±0.11比0.17±0.09,t=8.795,P=0.001; IL-10 (ng/L):65.47±23.58比51.70±16.86,t=16.313,P=0.001].miR-155表达与Treg和Foxp3mRNA表达水平均呈正相关(r1=0.635、P=0.007,r2=0.671、P2=0.005).结论 miR-155参与对Treg细胞增殖的调节,在脓毒症免疫失衡机制中发挥一定的作用.汪勤,赵春辉,蔡琴,朱华英 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
骨髓间充质干细胞体外诱导免疫调节机制的探讨
目的:观察骨髓间充质干细胞(BM MSCs)对体外活化T细胞的免疫调节作用.方法:提取Wistar大鼠BM MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养.实验分3组,3个时间点:分别为0、24、48 h脾淋巴细胞/BM MSCs+刀豆蛋白A(ConA)(实验组),脾淋巴细胞+ConA(对照组),单纯淋巴细胞组(空白组).MTT检测T淋巴细胞活性,ELISA检测细胞因子TNF-α、IL-10及TGF-β水平,流式检测Foxp3+调节性T细胞表达率.结果:(1)与对照组相比,实验组24、48 h在2个时间点T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05);(2)与对照组相比,实验组TNF-α在2个时间点有显著降低(P<0.05),实验组IL-10、TGF-β表达水平有显著升高(P<0.05);(3)实验组Foxp3+T调节细胞表达率高于对照组;(4)随着时间延长,空白组及对照组T淋巴细胞活性均显著降低(P<0.05),实验组T淋巴细胞活性随时间延长差异无统计学意义.结论:BM MSCs可以抑制T淋巴细胞活化,并通过减少炎症因子TNF-α的释放抑制免疫应答.另外,BM MSCs可通过自分泌及诱导T调节细胞产生并分泌免疫抑制因子IL-10、TGF-β下调免疫反应,产生免疫耐受.杜杰静,宋红丽,沈中阳,郭瑞雪,吴本娟,付楠楠 - 天津医科大学学报文章来源： 万方数据 -
Rock可能通过抑制PI3K/Akt通路促进缺氧诱导的心肌细胞凋亡
目的:通过建立体外心肌细胞缺氧模型,观察Rho相关的卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)在不同缺氧时点的表达,探讨其在心肌细胞凋亡中的作用.方法:(1)原代培养SD乳鼠心肌细胞,并用抗α-横纹肌肌动蛋白免疫组化法进行鉴定.(2)利用缺氧液和缺氧盒,建立心肌细胞缺氧模型,分别缺氧培养1 h、3 h、6 h、9 h,以正常氧培养的心肌细胞作为对照.(3)用流式细胞仪检测心肌细胞凋亡,MTT检测细胞存活率,Western blotting检测ROCK-1、ROCK-2、caspase-3活化片段、PI3K和p-PI3K的表达情况.结果:(1)缺氧1 h、3 h、6 h、9 h后,心肌细胞凋亡率分别为(8.76±1.51)%、(15.36±2.34)%、(26.50±3.43)%、(41.96±4.22)%,与对照组[2.60±0.34)%]比较均有显著差异(P<0.01);存活率分别为(93.20±4.12)%、(86.14±3.10)%、(75.53±7.25)%、(60.21±6.75)%,与对照组[(97.60±1.12)%]比较均有显著差异(P<0.05).(2)ROCK-1和ROCK-2缺氧1 h即开始升高,3~6 h表达达高峰,9 h开始回落,且均明显高于对照组(P<0.05).(3)Caspase-3在缺氧1 h开始逐渐活化,在随后观察的时点内持续处于活化状态,与对照组比较均有显著差异(P<0.01).(4)p-PI3K在缺氧1 h后开始升高,3 h达高峰,6 h开始回落,9 h表达基本消失,各时点比较差别有统计学意义(P<0.05).结论:ROCK-1和ROCK-2在缺氧后表达逐渐升高,与细胞凋亡的过程相一致.ROCK可能通过抑制p-PI3K信号途径,促进缺氧心肌细胞凋亡.董家龙,李菊香,孙国芳,洪葵 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
下调 p21活化蛋白激酶2表达对人乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响
目的:应用RNA干扰技术下调人乳腺癌MCF-7细胞中p21活化蛋白激酶2( PAK2)的表达,观察其对MCF-7细胞增殖和凋亡的影响。方法:构建针对PAK2基因的短发卡RNA(shRNA)慢病毒表达载体并包装病毒颗粒,感染MCF-7细胞,筛选获得稳定细胞株。 Western blotting检测细胞中PAK2蛋白表达水平的改变;CellTiter 96 AQueous法和软琼脂集落形成实验检测MCF-7细胞体外增殖能力的改变;流式细胞术检测十字孢碱诱导的MCF-7细胞凋亡的变化。结果:MCF-7细胞的PAK2基因被沉默后,PAK2蛋白表达量明显下降(P<0.01),与阴性对照组相比,sh-PAK2组细胞生长明显减缓(P<0.01),克隆形成的数目和大小明显下降(P<0.01),十字孢碱诱导的细胞凋亡率显著增加(P<0.01)。结论:通过RNA干扰技术下调PAK2的表达,可抑制MCF-7细胞的生长和增殖,并增强其对化疗药物诱导的细胞凋亡的敏感性。 PAK2可能是潜在的乳腺癌治疗的新靶点。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
乳腺原发癌和相应淋巴结转移癌干细胞Wnt、Notch信号通路相关分子的比较
目的:探讨乳腺原发癌和相应淋巴结转移癌干细胞Wnt、Notch信号通路分子β-catenin、Cyclin D1和Notch1 mRNA表达及意义。方法选取乳腺浸润性导管癌30例,且均伴有淋巴结转移,制备乳腺癌单细胞悬液,通过免疫磁珠分选技术分别提取乳腺原发癌和相应淋巴结转移癌干细胞,采用实时荧光定量PCR技术检测两种癌干细胞Wnt、Notch信号通路关键分子β-catenin、Cyclin D1和Notch1 mRNA的表达。结果乳腺原发癌干细胞和相应淋巴结转移癌干细胞中β-catenin mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);淋巴结转移癌干细胞中Cyclin D1和Notch1 mRNA的表达显著高于乳腺原发癌干细胞(P<0.01)。结论与乳腺原发癌干细胞相比,淋巴结转移癌干细胞中Cyclin D1和Notch1处于更高的活化状态,具有更高的侵袭和转移能力,有可能成为乳腺癌的新治疗靶点。曾令瑞,韩玉贞,马英路,李文星 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据
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