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1α,25-二羟维生素D3对早期角膜移植小鼠Th17细胞的免疫调控作用
目的:观察在同种异体角膜移植的小鼠模型中,1α,25-二羟维生素D3对Th17细胞及其相关细胞因子的影响。方法:C57BL/6小鼠作为受体,BALB/c小鼠作为供体,建立小鼠穿透性角膜移植术模型。术后隔日对角膜移植小鼠腹腔注射1.0μg 1α,25二羟维生素D3(维生素D3干预组),模型组和正常对照组腹腔注射等量大豆油。在裂隙灯活组织镜下观察角膜移植物的透明情况,评估排斥反应的发生情况,并取角膜移植物做病理学检测。采用实时荧光定量PCR检测脾脏中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平,Western blotting分析外周血中RORγt及IL-17的蛋白含量,流式细胞术检测外周血IL-17和IFN-γ细胞因子的表达情况。结果:1α,25-二羟维生素D3显著地抑制了同种异体角膜移植排斥反应,同时减少了角膜移植物的炎性渗出。应用1α,25-二羟维生素D3治疗后,小鼠脾脏中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平降低;外周血中IL-17、RORγt和IFN-γ的表达水平被下调。结论:1α,25-二羟维生素D3抑制小鼠同种异体角膜排斥反应的作用与IL-17及相关细胞因子RORγt细胞调节密切相关。吴静,张瑾,侯光辉,崔裕波,王超,陈剑 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
不同低氧暴露时间对小鼠骨骼肌ERα/PDK4调节的影响
目的:研究不同低氧暴露时间对小鼠骨骼肌雌激素受体相关受体(estrogen receptor related receptors α,ERRα)与丙酮酸脱氢酶激酶4(PαK4)DNA结合活性及PDK4基因表达的影响,以探讨低氧条件下影响糖代谢及其信号分子之间的相互调节可能的机制.方法:野生小鼠随机分为常氧组、低氧组(氧浓度11.25%左右,模拟海拔高度4500m),而后又进一步分为0天、7天、14天、28天组,每组10只.低氧暴露时间为每天8h.同天数的小鼠常氧组与低氧组脱颈处死.染色质免疫共沉淀法(Chip)测定ERRα/PDK4结合活性,Real-TimePCR测定骨骼肌PDK4mRNA含量.结果:1)随着天数增加,低氧组ERRα/PDK4的结合活性有增加的趋势,但没有显著性差异;2)随着天数增加,低氧28天组PDK4mRNA相对表达量与0天组相比显著性升高(P〈0.05),且与28天常氧组相比也有显著性增加(P〈0.05).结论:低氧28天小鼠骨骼肌PDK4mRNA相对表达量显著增加,但其ERRα/PDK4的结合活性并没有显著性变化,推测低氧下蛾并不是促进PDK4mRNA表达的主要转录因子.何诗依,陈婷,孙海洋,张缨 - 体育科学文章来源： 万方数据 -
全反式维甲酸在儿童急性早幼粒细胞白血病中的应用
急性早幼粒细胞白血病(Acute promyelocytic leukemia,APL)在FAB(French-American-British Cooperative Group)分型中是急性髓系白血病中的一个亚型,属于M3型,以骨髓细胞阻滞在早幼粒阶段而成为白血病细胞进而增殖和聚集为特征,在中国儿童急性髓细胞性白血病(Acute myelocytic leukemia,AML)中占10%左右[1,2].儿童和成人APL的临床和分子学特征很相似,但儿童APL更多的伴随较高的白细胞数量[3].不管是成人还是儿童APL,白细胞数量是一个重要的预后影响因素.与AML的其他亚型比较,APL患者的白细胞数量较低.有报道称白细胞增张萍,卢金淼,李智平 - 儿科药学杂志文章来源： 万方数据 -
微小RNA-146a调控肺泡巨噬细胞中白细胞介素-1受体相关激酶1和肿瘤坏死因子受体相关因子6的表达
目的 观察转染微小RNR-146a(miR-146a)对肺泡巨噬细胞中白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)表达的影响,为探讨miR-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控机制奠定基础.方法 将体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383分为miR-146a模拟物(mimic)组和阴性对照组,分别加入50 nmol/L Pre-miR miR-146a前体和Cy3标记的Pre-miR阴性对照进行转染,转染24 h后收集细胞,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-146a、IRAK-1 mRNA、TRAF-6mRNA的表达,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测细胞中IRAK-1和TRAF-6的蛋白表达.结果 miR-146amimic组miR-146a表达较阴性对照组上调了(24.55±6.14)倍(t=-6.643,P=0.003).细胞中IRAK-1和TRAF-6的mRNA表达分别为阴性对照组的(1.16±0.10)倍(t=2.701,P=0.054)和(1.19±0.16)倍(t=2.032,P=0.112).而IRAK-1和TRAF-6的蛋白表达分别为阴性对照组的73.0%(t=-9.353,P=0.001)和64.1%(t=-6.839,P=0.002).结论 miR-146a mimic能成功转染肺泡巨噬细胞NR8383; miR-146a过表达后,能有效下调肺泡巨噬细胞中IRAK-1和TRAF-6的表达,其机制可能是在蛋白翻译水平的抑制.黄萍,刘芬,曾振国,黄彩雪,邵强,夏亮,揭克敏,钱克俭 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
Foxp3/Treg与RORγt/Th17细胞失衡在慢性阻塞性肺疾病大鼠中的作用
目的:观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠叉头状/翅膀状螺旋转录因子p3(Foxp3)、调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞17特异性转录因子T孤独核受体(RORγt)的表达。方法将20只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和COPD模型组,每组10只。采用烟熏加脂多糖(LPS)气管滴入的方法建立COPD模型;正常对照组不予任何处理。28 d后测定两组大鼠肺功能;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素(IL-6、IL-10)水平;流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg表达;蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测肺组织Foxp3、RORγt、IL-17蛋白表达。结果光镜下观察模型大鼠肺泡腔及肺间质内大量炎性细胞浸润,病变区肺泡结构破坏,肺泡壁变薄、甚至断裂融合成大疱,部分肺泡腔内有不同程度的出血。与正常对照组比较,模型组用力肺活量(FVC)、0.3 s用力呼气容积(FEV0.3)、FEV0.3/FVC、用力呼气峰值流速(PEF)明显下降〔FVC(mL):8.04±2.03比9.97±2.14,FEV0.3(mL):6.16±2.23比8.84±2.12,FEV0.3/FVC:0.70±0.09比0.85±0.11,PEF(mL/s):33.56±4.76比40.14±5.64,P<0.05或P<0.01〕;血清IL-6明显升高(ng/L:93.17±20.96比76.28±13.24, P<0.05),IL-10明显降低(ng/L:78.62±15.17比104.34±19.46,P<0.01),CD4+CD25+Foxp3+Treg表达明显降低〔(2.75±0.83)%比(4.16±1.14)%,P<0.01〕;肺组织Foxp3蛋白表达明显降低(灰度值:0.38±0.15比0.63±0.11,P<0.01),RORγt、IL-17蛋白表达明显升高〔RORγt(灰度值):0.96±0.23比0.47±0.11,IL-17(灰度值):1.02±0.24比0.34±0.08,均P<0.01〕。相关性分析显示,肺功能参数FEV0.3与Foxp3呈正相关(r=0.585,P<0.05);FEV0.3/FVC与IL-6、RORγt呈负相关(r=-0.655、r=-0.607,均P<0.05);PEF与Treg呈正相关(r=0.573,P<0.05),与IL-17呈负相关(r=-0.198,P<0.05)。IL-6与Foxp3呈负相关(r=-0.603, P<0.05),与RORγt呈正相关(r=0.588,P<0.05);IL-10与Treg呈正相关(r=0.573,P<0.05);Treg与Foxp3呈正相关(r=0.607,P<0.05),与IL-17呈负相关(r=-0.569,P<0.05);Foxp3与RORγt呈负相关(r=-0.591,P<0.05);RORγt与IL-17呈正相关(r=0.578,P<0.05)。结论 COPD肺功能降低、炎症反应升高与Foxp3/Treg、RORγt/Th17表达失衡有关。王成阳,刘向国,彭青和,方莉,王传博,李泽庚 - 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
PD-L1阻断改善酵母多糖致伤小鼠脾脏耐受性 DC对T淋巴细胞活性的影响
目的:探讨酵母多糖致伤小鼠脓毒症病程发展过程中脾脏耐受性树突状细胞( dendritic cell, DC)的形成对脾脏T淋巴细胞免疫活性的影响,并通过程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-L1)抗体阻断PD-L1/PD-1途径改善耐受性DC对T淋巴细胞活性的抑制作用。方法采用酵母多糖腹腔注射的方法复制小鼠脓毒症模型。用磁珠法分离致伤小鼠脾脏DC和T淋巴细胞,测定脾脏组织中DC上PD-1、PD-L1、PIR-B的表达水平和分泌IL-12、IL-10的能力;检测脾脏T淋巴细胞增殖活性和IL-2的分泌水平。进一步将致伤组小鼠脾脏DC与正常小鼠脾脏T淋巴细胞混合培养,并加入PD-L1抗体,检测T淋巴细胞增殖活性及混合培养上清中IL-2、IL-12和IL-10含量。结果酵母多糖致伤后5天和12天组小鼠脾脏DC上PD-1、PD-L1及PIR-B的表达大幅上调,IL-12p70分泌减少,IL-12p40和IL-10分泌增加;脾脏T淋巴细胞增殖活性降低、IL-2分泌减少。在致伤组DC与正常T淋巴细胞混合培养体系中加入PD-L1抗体可减轻致伤组DC对T淋巴细胞增殖活性和分泌IL-2的抑制作用,并改善DC上IL-12p70、IL-12p40和IL-10的分泌能力。结论酵母多糖诱导小鼠脓毒症的病程晚期,脾脏耐受性DC的形成导致T淋巴细胞活性降低;PD-L1抗体通过干预PD-1/PD-L1途径改善T淋巴细胞和DC的免疫活性。吕艺,刘茜,赵敏,陆江阳 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
乳腺癌中肿瘤相关巨噬细胞与CXCR4表达的关系及意义
目的 探讨乳腺癌间质中肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)计数与癌细胞表达CXC家族趋化因子受体4(CXC chemokine receptor4,CXCR4)蛋白的相关性及临床意义.方法 标本均为手术切除后经常规石蜡包埋切片,采用免疫组化MaxVision法检测150例乳腺癌和50例乳腺良性病变组织中TAMs计数和CXCR4表达.结果 乳腺癌组织中TAMs平均浸润密度为105.0个/HPF,中位数为87.4个/HPF.CXCR4在乳腺癌组织中表达强度明显高于乳腺良性病变组织,两组差异有统计学意义(P<0.01),且TAMs计数和CXCR4表达呈正相关(r=0.152,P=0.045).结论 TAMs浸润和CXCR4表达与乳腺癌的发生、发展密切相关,提示TAMs浸润密度与CXCR4联合检测可作为乳腺癌临床诊断、辅助治疗的潜在靶点.朱敬凤,吴正升,聂静,吴强,王弦 - 临床与实验病理学杂志文章来源： 万方数据 -
免疫球蛋白单体白细胞介素-1受体相关分子损害肺炎链球菌引起的肺炎和脓毒症期间的宿主防御
近日,荷兰研究人员对免疫球蛋白单体白细胞介素-1受体相关分子(SIGIRR)的作用进行了研究.肺炎链球菌是一种可以引起肺炎和脓毒症的普通细菌,Toll样受体(TLRs)在宿主防御中发挥着重要作用.他们用肺炎链球菌野生型和SIGIRR基因缺失(sigirr-/-)小鼠进行鼻内和静脉内感染来诱导肺炎和早期脓毒症,然后分别在6、24、48h处死小鼠,并且进行生存分析.- 中华危重病急救医学文章来源： 万方数据 -
人子宫颈癌异常表达程序性死亡配体-1并促CD_4~+T和CD_8~+T细胞凋亡
目的:探讨程序性死亡配体-1 (Programmed death ligand-1,PD-L1)在人子宫颈癌的表达及其与肿瘤内CD4+T和CD8+T细胞浸润的相关性,体外实验观察重组人PD-L1蛋白对宫颈癌患者外周血T细胞凋亡的影响.方法:采用免疫组化SP法检测PD-L1在10例正常人宫颈组织和67例宫颈癌组织中的表达以及死亡受体-1(Programmed death receptor-1,PD-1)在宫颈癌内浸润淋巴细胞的表达;TUNEL法检测肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡;免疫荧光分析宫颈癌内浸润的CD4+T和CD8+T淋巴细胞数量;流式细胞术分析PD-L1促进宫颈癌患者外周血活化CD4+T和CD8+T细胞凋亡情况.结果:正常子宫颈上皮不表达PD-L1;宫颈癌PD-L1的表达率为70%(47/67).部分宫颈癌内浸润的淋巴细胞表达PD-1,且淋巴细胞存在凋亡现象.PD-L1阳性宫颈癌肿瘤内浸润的CD8+T细胞数量明显减少(P<0.05).体外实验发现PD-L1与健康人或宫颈癌患者外周血活化T细胞混合培养48 h后,T细胞凋亡率明显高于空白组,2组平均凋亡率分别为(32.8±1.4)%、(38.3±1.5)%(P<0.05)和(27.7±1.3)%、(30.9±1.9)%(P<0.05);抗PD-1抗体使PD-L1诱导的T细胞凋亡率下降,分别为(29.8±1.6)%和(31.6±1.4)%(P>0.05).PD-L1对人外周血活化CD4+T和CD8+T细胞均有促凋亡作用.结论:人子宫颈癌异常表达PD-L1与肿瘤内浸润的淋巴细胞凋亡及CD8+T细胞数量减少有关.PD-L1经PD-1促进活化的CD4+T和CD8+T细胞凋亡.陈瑜,徐曼,肖琳,耿卫朴,王婷婷,黄文炼 - 重庆医科大学学报文章来源： 万方数据 -
CTRP3下调炎症因子表达改善胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性
目的:观察脂肪因子C1q/TNF相关蛋白3(CTRP3)对胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的效应及机制.方法:通过软脂酸培养构建3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型,以不同浓度重组CTRP3蛋白(10、50、250、1 250μg/L)干预12 h,以及250μg/L CTRP3干预不同时间(2、6、12、24 h),以葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖消耗量,以2-脱氧-[3H]-葡萄糖摄入法检测葡萄糖转运率,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)的含量,以荧光实时定量PCR(real-time PCR)检测TNF-α、IL-6及葡萄糖转运子4(GLUT-4)的mRNA表达水平,以Western blotting检测GLUT-4蛋白表达水平.结果:与正常对照组(NC)相比,胰岛素抵抗组(IR)葡萄糖摄取率及葡萄糖消耗量分别降低了50.6%及57.9%(均P<0.01);与IR组相比,干预组随CTRP3浓度增加,葡萄糖消耗量分别增加22.1%、42.9%、76.6%及80.5%(均P<0.01),葡萄糖摄取率分别增加39.0%、68.0%、108.0%及111.0%(均P<0.01);250μg/L CTRP3干预时间增加,葡萄糖摄取率分别增加23.0%、79.0%、109.0%及114.0%(均P<0.01);250μg/L CTRP3干预12 h,上清中的TNF-α及IL-6浓度分别降低了17.4%及17.1%(均P<0.01),其mRNA相对表达量分别下降了26.0%及18.9%(均P<0.01),而GLUT-4mRNA及蛋白相对表达量分别增加了61.5%及55.6%(均P<0.01).结论:CTRP3具有改善胰岛素抵抗的3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的作用,其机制可能与下调炎症因子表达、改善胰岛素信号转导和增加葡萄糖转运子表达等有关.李新,姜黎,杨杪,吴玉文,孙苏欣,孙家忠 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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