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通过富集母血浆中胎儿游离DNA无创性产前诊断β地中海贫血
目的:评价富集母血浆中胎儿游离DNA的实验平台在母血浆中富集、鉴定胎儿游离DNA的适用范围.方法:(1)筛选与父源性β地中海贫血基因连锁的单核苷酸多态性(SNP)位点:利用Haploview软件对20例β地中海贫血患者(其中CD41-42型11例,IVS-II-654型9例)的β地中海贫血基因(HBB基因)进行SNP与单倍型自动化分析,检索出HBB基因内杂合度较高的SNP位点并检测与CD41-42位点及IVS-II-654位点连锁的SNP位点.(2)选取4例孕妇外周血标本,且夫妇双方为不同的β地中海贫血基因类型,利用快速耐受温度-低变性温度共扩增PCR技术(TT-FAST-COLD-PCR)检测父源性β地中海贫血基因类型为IVS-II-654型的孕妇外周血标本,若未直接检测到IVS-II-654位点,则检测仅与IVS-II-654位点连锁的SNP位点;同样的原理,利用完全耐受温度-低变性温度共扩增技术(TT-FULL-COLD-PCR)检测父源性β地中海贫血基因类型为CD41-42型的孕妇外周血标本;同时利用普通PCR技术对上述标本进行检测.结果:(1)检测出IVS-II654位点与rs7480526位点连锁9例;CD41-42位点与rs10768683位点连锁11例;(2)通过TT-FAST-COLD-PCR技术在孕妇外周血中检测出1例父源性致病突变基因(IVS-II-654位点),另外1例未直接检测到父源性致病突变基因,但检测到与其连锁的SNP位点(rs7480526位点),与羊水细胞培养检测结果一致,检出率为100%(2/2);通过TT-FULL-COLD-PCR技术在孕妇外周血中检测出2例父源性致病突变基因(CD41-42位点),与羊水细胞培养检测结果一致,检出率为100%(2/2);而普通PCR技术均未检测到上述父源性致病突变基因及与父源性等位基因连锁的SNP位点.结论:TT-COLD-PCR技术适用于富集母血浆中胎儿游离DNA突变,可用于无创性产前诊断单基因遗传病.王青青,张媛,章钧,郝秀兰,侯红瑛 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
胎儿纤连蛋白在预测足月分娩临产启动的观察研究
目的:探讨胎儿纤连蛋白在预测足月分娩临产启动的临床意义.方法:选取我科2010.1-2010.12月间入院足月待产初产孕妇182例,采用ELISA方法测定孕妇宫颈阴道分泌物中的fFN浓度,同时评测Bishop评分,对比两种测定方法对预测足月分娩临产启动的相关性.结果:41周内分娩的孕妇Bishop评分平均值明显高于41w后分娩的孕妇,组间对比P<0.01,但Bishop宫颈评分成熟者仍有相当一部分孕妇分娩启动延迟;FFN预测过期妊娠的特异性为78%,敏感性为91%,阳性预测值为86%,阴性预测值为85%.结论:FFN值预测过期妊娠的敏感性和阴性预测值均优于Bishop评分,特异性和阳性预测值二者一致,且不依赖于临床经验,因此认为fFN值在已达预产期孕妇的宫颈阴道分泌物中含量是分娩启动的有效预测指标.王爱宝 - 海南医学院学报文章来源： 万方数据 -
游离空肠移植阴道成形术1例并文献复习
目的 探讨游离空肠移植阴道成形术的方法及疗效.方法 对1例先天性无阴道患者采用游离空肠移植行阴道再造.结果 术后游离空肠存活,术区切口瘢痕不明显,无腹部并发症发生.随访6个月,阴道口无狭窄,阴道腔宽敞,壁红润.再造阴道分泌物不多,无需使用支架和润滑剂.结论 游离空肠移植阴道成形术具有操作简单、存活率高、费用少及再造阴道宽敞无狭窄等优点,不失为一种较为理想的方法.吴国强,陶凯,梁九龙,张雪峰,刘晓燕 - 临床军医杂志文章来源： 万方数据 -
精液处理前后精子的DNA损伤与活性氧之间的关系研究
目的 探讨精液处理前后精子DNA损伤程度的改变及与过氧化氢(H2O2)、过氧化氢酶(CTA)之间的关系.方法 接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕且进行常规IVF受精的夫妇75例,男性患者作为研究对象.在IVF当日精液采集后0.5h留取精液标本1ml,剩余精液以Pure Sperm梯度离心法进行精液处理,于处理后将精子浓度调整为10*106/ml,留取标本1ml.采用精子吖啶橙染色方法测定精子DNA损伤,H2O2及CTA含量测定采用分光光度比色测定法.结果 精液处理后的精子DNA损伤程度与处理前相比明显降低(P<0.05),H2O2浓度亦显著降低(P<0.05),CTA浓度变化不显著.精子DNA损伤率在精液处理前及处理后均与H2O2浓度呈正相关(r值在处理前后分别为0.684和0.753,P<0.05),精子DNA损伤率在精液处理前与CTA浓度呈负相关(r=-0.476,P<0.05),而处理后两者无相关性(r=-0.087,P>0.05).结论 高过氧化物水平可导致精子DNA损伤,精液优化处理可以使精子脱离高活性氧的环境,并且减少DNA损伤的精子.张娜,张耀恒,张轶,赵世彬,乜照燕,刘敬泽 - 中国男科学杂志文章来源： 万方数据 -
彩色多普勒超声诊断胎儿隔离肺
目的 探讨彩色多普勒超声诊断胎儿隔离肺的临床意义.方法 利用彩色多普勒超声仪,对胎儿进行二维图像的扫查、测量胎儿的生理指标、细致观察内脏结构及彩色多普勒血流情况,对诊断胎儿隔离肺的病例进行追踪随访.结果 2001年以来共超声诊断胎儿隔离肺13例,其中,右侧胸腔3例,左侧胸腔9例,左侧膈下型1例.肿块直径1.2cm-4.2cm,平均直径2.8cm.12例检出到肿块内血供来自主动脉.6例伴有同侧胸腔少量积液.结论 超声检查是一种无创伤性检查方法,是诊断胎儿隔离肺的重要手段,具有重要的临床意义.施卫平 - 中国优生与遗传杂志文章来源： 万方数据 -
围生期营养不良对仔鼠学习记忆功能的影响
目的 研究围生期营养不良对仔鼠学习记忆的影响,探讨其可能的机制.方法 怀孕14 d的SD大鼠分为实验组(半量饮食组)与对照组(正常饮食组),至哺乳期结束(仔鼠出生21 d)后实验组和对照组的仔鼠均正常饮食.测量仔鼠出生时和成年时的体质量.采用Morris水迷宫测试仔鼠的学习、记忆功能.免疫组化检测DNA氧化损伤(8-OhdG)和Western blot检测DNA氧化损伤修复(OGG1)指标.结果 实验组仔鼠出生和成年后体质量均小于对照组[(4.66±0.28) g vs (6.59±0.16)g,(187.66 ±22.67)g vs(279.50±18.73)g,P<0.01];Morris水迷宫实验中,空间探索实验实验组较对照组潜伏时间长[(37.21 ±4.93) svs (16.41 ±5.21)s,P<0.05],穿越平台次数较少[(6.57 ±1.22)vs(13.12 ±2.34),P<0.05],跨越目标象限时间占整个游泳的时间百分率低[(32.75±4.58)%vs (60.31±6.74)%,P<0.01],Morris水迷宫实验表明实验组学习记忆功能均比对照组下降;8-OHdG的表达在幼年期(22 d)和成年期(90 d)实验组均比较高,与对照组相比具有统计学意义[(18.01±0.05)vs(5.77 ±0.03),(21.15±0.10)vs(10.81 ±0.08),P<0.05];OGG1的表达在幼年期(22 d)和成年期(90 d)实验组均比较低,与对照组相比差异具有统计学意义[(0.32±0.08)vs(0.81±0.06),(1.57 ±0.10) vs (2.78 ±0.53),P<0.05].结论 围生期营养不良对仔鼠成年期的学习记忆功能产生影响,其机制可能与DNA氧化损伤、修复调节的障碍有关.康卓君,王永红,罗强,王小林,董为伟 - 第三军医大学学报文章来源： 万方数据 -
蚜虫内共生菌基因组DNA提取方法的比较和优化
为探究蚜虫共生菌基因组DNA的提取方案,以桃蚜为试验材料,比较了目前较为常用的4种蚜虫基因组DNA提取方法,从DNA纯度、完整性、PCR扩增效率及稳定性等方面进行了比较和评价,并通过调整蛋白酶K用量和水浴温度及时间对STE法进行了优化.结果表明,4种方法提取的蚜虫共生菌基因组DNA均可用于共生菌的PCR扩增检测;CTAB法和SDS法提取的DNA纯度较高,条带较完整,稳定性相对较高,不易降解,而STE法和PCR缓冲液法操作简便,适于快速提取单头蚜虫共生菌的基因组DNA,但纯度相对较低;可根据试验条件和要求进行选择.STE法优化条件为:用30μL STE缓冲液将蚜虫匀浆,加入1.5μL 20 mg/m L蛋白酶K,于56℃水浴1.5 h;再加入0.1μL 10 mg/L RNA酶,于37℃培养1 h,95℃下处理5 min,5 000 r/min离心3 min,将提取到的DNA于-20℃保存或直接用于PCR扩增.优化后的STE法可作为提取蚜虫共生菌基因组DNA经济而快捷有效的方法.宋月,樊永亮,武丽娟,张战凤,刘艳红,刘同先 - 植物保护学报文章来源： 万方数据 -
DNA检测方法在鱼类物种鉴定中的应用
总结了近年来在鱼类物种鉴定中常用的DNA序列分析、DNA指纹技术、物种特异性聚合酶链式反应和实时荧光PCR技术等DNA检测方法,同时对各类方法的特点和局限性进行了分析.王嘉鹤,陈双雅,陈伟玲,徐敦明,周昱 - 海南大学学报(自然科学版)文章来源： 万方数据 -
母体肢体缺血预处理对宫内窘迫胎鼠复氧后海马神经元凋亡的影响
目的:观察母体的肢体缺血预处理(LIP)对宫内窘迫胎鼠复氧后海马神经元凋亡的影响。方法:采用微动脉夹阻断母鼠通向子宫和卵巢的动静脉15 min后开放以制备胎鼠宫内窘迫模型。孕19 d SD大鼠12只,随机分为4组:空白对照( S)组、LIP组、胎儿窘迫( FD)组和LIP+FD组。各组母鼠再灌注2 d时剖宫取活胎鼠12只断头取脑。 TUNEL法测定胎鼠海马CA1区神经元凋亡情况,计算细胞凋亡指数;免疫组化法和Western blotting法测定Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果:与S组比较,FD组和LIP+FD组胎鼠海马CA1区神经元凋亡指数增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达增加,Bax蛋白表达增加,Bcl-2/Bax比值降低;与S组比较,LIP组胎鼠海马CA1的Bcl-2、Bax蛋白表达及Bcl-2/Bax蛋白表达的比值无明显改变( P>0.05);与FD组比较,LIP+FD组细胞凋亡指数降低(P<0.05),Bcl-2/Bax比值增加。结论:母体肢体缺血预处理减轻了宫内窘迫胎鼠复氧后海马神经元的凋亡,其机制可能与Bcl-2蛋白表达的上调相关。吴希珠,郑晓春,陈小琳,陈江湖,李荣钢,郑官林,卢欢 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
线粒体DNA稳定性与疾病的关系
线粒体是真核细胞内进行氧化磷酸化和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)合成的细胞器,为细胞活动提供能量,有"细胞动力工厂"之称.此外,线粒体还是细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生的主要场所,并能启动和执行细胞的凋亡[1].线粒体由核基因和线粒体基因组共同编码,其DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)和(或)核DNA(nuclear DNA,nDNA)的遗传缺陷均可引起线粒体功能障碍而导致疾病发生.1线粒体DNA黄珊,高文祥,高钰琪 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据
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