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活性氧在多能干细胞中的作用

多能干细胞是具有自我更新能力和能向体内多种细胞分化的一类细胞群体.活性氧(reactive oxy gen species,ROS)是反应活性极强的代谢分子.虽然过多的ROS会对干细胞产生毒性,引起干细胞的衰老和凋亡,但是ROS的调节在维持干细胞的干性和分化中起重要作用.ROS在不同的干细胞中发挥的作用也不尽相同.深入了解ROS如何调控干细胞的功能将有助于加强干细胞在转化医学方面的应用.本文将以胚胎干细胞和诱导性多能干细胞为主,对近年来ROS调节多能干细胞功能的研究进行简要综述.

徐洁,刘俊许,康雪玲,蒋丽,周忠伟,陈思锋,孟丹 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

小鼠胚胎干细胞钙敏感受体的表达和其对细胞增殖的影响

目的:观察钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)的功能性表达。方法:(1)采用Western blotting 技术及免疫荧光染色分析CaSR蛋白在129小鼠ES-D3细胞系的表达;采用激光共聚焦扫描技术检测不同处理因素(包括G蛋白-PLC-IP3通路)对细胞内钙离子浓度([ Ca2+] i )的影响;应用MTT法和流式细胞术分析CaSR活化对mESCs增殖的影响。结果:CaSR蛋白在mESCs有表达;增加细胞外钙或者给予CaSR激动剂新霉素均可引起[ Ca2+] i和CaSR表达增加;CaSR活化可增加mESCs 的存活率和磷酸化ERK2蛋白的表达。 NPS2390( CaSR抑制剂)则能减弱这种作用。结论: CaSR在mESCs有表达;CaSR的活化参与了mESCs的增殖。

孙健,于金凤,栾海荣,李爽,许晓义,何志鹏,魏韬,李丽,徐长庆 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

转化生长因子-β受体抑制剂复合物C促进人胚胎干细胞向视网膜色素上皮细胞定向诱导

目的观察转化生长因子-β(TGF-β)受体抑制剂复合物C对人胚胎干细胞(hESC)向视网膜色素上皮(RPE)细胞定向诱导效率的影响.方法将H1 hESC分为对照组和实验组.对照组在细胞过度融合后,以去除碱性成纤维细胞生长因子的血清替代物培养体系诱导RPE细胞定向分化.实验组于诱导分化前6d在培养体系中加入1μmol/L复合物C.诱导分化第1、3、5周,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组人类配对盒基因(PAX6)、小眼球相关转录因子(MITF)、细胞视黄醛结合蛋白(CRALBP)、RPE65 mRNA的表达.将hESC来源的RPE(hESC-RPE)细胞分离纯化,采用RT-PCR、蛋白免疫印迹法(Western blot)和细胞免疫荧光法对纯化的hESC-RPE细胞进行鉴定.结果诱导分化第4周,实验组肉眼可见色素团块,对照组无色素团块出现.将实验组的色素细胞分离纯化后,可见l00%的细胞表现为多角形色素化.RT-PCR检测结果显示,实验组PAX6 mRNA表达在诱导分化第1、3周显著高于对照组,差异有统计学意义(t=28.498、3.141,P<0.05);诱导分化第3、5周,实验组MITF(t=8.866、10.111)、CRALBP(t=5.293、5.394)和RPE65(t=9.263、9.504)的表达均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).hESC-RPE细胞PAX6、MITF、CRALBP、RPE65 mRNA表达均显著高于hESC(t=9.154、17.284、18.204、44.194)和ARPE-19(t=7.605、16.770、18.190、44.190)细胞,差异有统计学意义(P<0.05).Western blot检测结果显示,hESC-RPE细胞高水平表达RPE标志蛋白PAX6、RPE65.荧光显微镜观察发现,hESC-RPE细胞表达RPE细胞特异性标志蛋白PAX6、紧密连接蛋白-1.结论 TGF-β受体抑制剂复合物C能显著提高hESC向RPE定向诱导效率.

杨博宇,杨春波,于敏,李筱荣 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

脂肪干细胞辅助的自体脂肪移植隆乳术临床疗效分析

目的:评价脂肪干细胞(ADSCs)辅助的自体脂肪移植隆乳术的临床效果.方法:选取2008年11月-2009年12月于韩国首尔TIARA整形外科医院接受ADSCs辅助的自体脂肪移植隆乳术的患者100例,对其临床效果进行研究和分析.所有患者均自下腹或大腿部抽取脂肪组织,从其中100mL脂肪组织中提取SDSCs约5mL,与填充用脂肪组织均匀混合后注射于患者乳房内,每测乳房注射约200mL脂肪.术后测量患者直立位乳头根部至前胸壁平面的垂直距离即为乳房的隆起值.测量术后2周、1周个月、3个月和6个月患者乳房的隆起值,与术前隆起值之差即为隆起增加值,并以2周时的隆起值(或隆起增加值)作为基准,评价乳房隆起的保持效果.结果:100例患者乳腺整形手术均顺利完成,未出现严重的并发症.绝大多数患者对隆乳效果表示满意,尤其对自然的胸部曲线与触感非常满意.术后2周测量100例患者隆起的总值是1435mm,平均隆起14.35mm;术后1个月保持率为79.08%,术后3个月保持率为66.75%,术后6个月保持率为70.57%.术后1、3和6个月的隆起值与术后2周相比,差异均有统计学意义(P<0.001);术后1个月隆起值与术后3、6个月比较,差异有统计学意义(P<0.05);而术后3个月和6个月之间差异无统计学意义(P>0.05).不同年龄组的患者术后隆乳效果除术后2周的差异外(P<0.05),其他时间段的差异无统计学意义(P>0.05).结论:ADSCs辅助的自体脂肪移植隆乳术临床效果确切可靠.术后3个月乳房内保存的移植脂肪基本成功存活,之后乳房的隆想效果不再发生变化.不同年龄组的患者均可以通过ADSCs辅助的自体脂肪移植隆乳术获得满意的临床效果.

申东辰,陈月光,刘炎锋,徐静文,徐克森 - 中国现代普通外科进展

文章来源：万方数据

22例造血干细胞移植患者采用静脉剂型白消安预处理的血药浓度监测

目的:评价白消安(Bu)的血药浓度与造血干细胞移植临床效果的相关性.方法:22例移植患者预处理采用静脉剂型Bu,观察疗效及相关毒性.采用2007年文献报道的柱前衍生高效液相色谱法对Bu给药前和给药后不同时间的血药浓度进行监测,计算Bu药-时曲线下面积(AUC).结果:胃肠道反应、肝毒性、口腔黏膜炎和移植物抗宿主病与Bu的AUC值正相关.AUC0~6h在900~1400μmol.min.L-1之间时,移植患者的死亡风险下降,过高或过低的AUC值增加死亡风险.结论:根据Bu血药浓度监测及时调整药物剂量,有助于造血干细胞移植患者的临床预测和减少术后并发症.

张耀东,周学琴,段丽芳 - 中国药房

文章来源：万方数据

重视系统性淀粉样变性的诊断和治疗

系统性淀粉样变性是一类疾病的总称,临床上以免疫球蛋白轻链型淀粉样变性(AL型)最为常见,占淀粉样变性的80%以上.AL型淀粉样变性好发于老年人,中位诊断年龄约62岁,随着我国人口老龄化和环境致病因素的加剧,AL型淀粉样变性的发病率也呈现出逐年升高的趋势.笔者所在单位1979年~2002年的13 519例肾活检结果显示淀粉样变性占肾活检总数的0,5%,而近年来AL型淀粉样变性已占肾活检总数的2%左右.国外资料表

刘志红,黄湘华 - 肾脏病与透析肾移植杂志

文章来源：万方数据

移植BDNF和GDNF基因修饰的hMSCs对大鼠大脑中动脉阻塞的影响

目的:构建脑源性神经营养因子(BDNF)和胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因的非病毒表达载体,用脂质体法转染人骨髓间充质干细胞(hMSCs),观察其对大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型的影响,探索移植转基因修饰的hMSCs治疗脑血管疾病的可行性.方法:构建高效非病毒表达载体,用脂质体法转染获得高表达2种神经营养因子的hMSCs.建立大鼠MCAO模型,建模后24 h经股静脉进行转基因hMSCs移植,并以磷酸盐缓冲液(PBS)和hMSCs为对照.用脑梗死体积计算、体重变化、行为学评测等指标对大鼠脑损伤程度进行评估,通过大鼠脑组织观察和病理切片对脑组织损伤以及细胞的迁移分化情况进行分析.结果:经股静脉转基因hMSCs移植能够提高大鼠MCAO后的感觉运动功能,减小脑梗死体积,与PBS对照组相比有显著差异;与hMSCs治疗组相比,治疗效果较好且稳定.移植的细胞在脑损伤区域有少数存活但未见分化现象.结论:经静脉移植脂质体介导、GDNF和BDNF基因修饰的hMSCs,可促进缺血脑组织的损伤修复,效果较好,为非病毒载体在干细胞相关转基因治疗的应用提供了理论依据.本研究表明,MSCs的作用不依赖于细胞的分化和神经元的替换,而可能与其分泌细胞因子对抗脑损伤并促进神经修复有关,在MSCs中转入特定的外源性神经营养因子可加强这一作用.

钟慧霖,陈文明,李翠莹,王茜婷,张静远,兰丹,刘海霞,邹清雁 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

不同途径移植人脐带间充质干细胞对糖尿病大鼠视网膜病变的影响

目的观察人脐带间充质干细胞(hUCMSC)对糖尿病(DM)大鼠血糖的影响及对视网膜病变的治疗作用.方法健康雄性Sprague-Dawley大鼠45只,随机分为正常对照组(A组)、DM组,分别为10、35只大鼠.DM组经尾静脉注射链脲佐菌素诱导DM模型.10周时,A组、DM组分别随机选取2只大鼠行视网膜血管铺片.DM组剩余的33只大鼠随机分为糖尿病视网膜病变组(B组)、尾静脉注射hUCMSC组(C组)、玻璃体腔注射hUCMSC组(D组),各组均为11只大鼠.A、B组不进行干预.干预后2、4、6、8周为观察处理时间点.各处理时间点前,连续3d每次随机选取2只大鼠检测随机血糖.DM组大鼠血糖与同期A组大鼠血糖比较,差异均有统计学意义(t=-64.400、-60.601、-44.065、-43.872,P=0.000).8周时从B、C、D组随机选取2只大鼠行视网膜血管铺片.免疫组织化学法观察视网膜脑源性神经营养因子(BDNF)阳性染色情况;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测视网膜BDNFmRNA相对表达量.结果干预后,不同处理时间点A、B、C、D组大鼠血糖比较,差异均有统计学意义(F=400.017、404.410、422.043、344.109,P=0.000);C组大鼠血糖与B、D组大鼠血糖比较,差异有统计学意义(t=4.447、4.990、P<0.01).免疫组织化学染色结果显示,A组BDNF表达呈阳性,主要分布在神经节细胞层;B组BDNF表达呈弱阳性;C、D组BDNF表达增多.RT-PCR检测结果显示,4、6、8周时,B、C、D组间视网膜BDNF mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(F=29.372、188.492、421.537,P=0.000);C、D组视网膜BDNF mRNA相对表达量与B组比较,差异均有统计学意义(t=66.781、72.401、63.880、88.423、75.120、83.002,P<0.01);C组视网膜BDNF mRNA相对表达量与D组比较,仅8周时差异有统计学意义(t=127.321,P=0.005).结论尾静脉注射hUCMSC能够显著降低大鼠血糖水平;尾静脉或玻璃体腔注射hUCMSC均可增加BDNF的表达.

毕雪,陈松,林锦镛,王玉川 - 中华眼底病杂志

文章来源：万方数据

PCOS患者血清及卵泡液中SCF、TGF-βl水平与PCOS发病及IVF结局的关系

目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清及卵泡液中干细胞因子(SCF)、转化生长因子βl(TGF-βl)水平与PCOS发病及体外受精-胚胎移植(IVF)结局的相关性.方法选择在郑州大学第三附属医院生殖中心就诊的行IVF的不孕患者79例,PCOS长方案组31例,PCOS微刺激方案组23例,另非PCOS患者长方案25例作为对照组;采用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测79例患者HCG日血清及取卵日卵泡液内SCF、TGF-βl水平,用化学发光法测定PCOS患者口服避孕药前后月经第3天基础内分泌值,比较3组患者的年龄、不孕年限、基础内分泌、口服避孕药后基础内分泌的变化;比较PCOS组与对照组患者血清及卵泡液内SCF、TGF-βl水平的差异及上述患者妊娠组与未妊娠组血清及卵泡液内SCF、TGF-βl水平的差异.结果 1.PCOS组在应用口服避孕药后月经第3天血清LH、LH/FSH、T均明显降低,与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).2.PCOS组卵泡液及血清中的SCF、TGF-βl水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).3.PCOS患者血清和卵泡液内的SCF、TGF-βl水平妊娠组显著高于未妊娠组(P<0.05);对照组患者血清和卵泡液内的SCF、TGF-βl水平妊娠组也明显高于未妊娠组(P<0.05).结论 1.口服避孕药有利于改善PCOS患者内分泌环境.2.SCF及TGF-βl可能在PCOS的发生发展中起重要作用.3.IVF患者卵泡液内高水平的SCF及TGF-βl可能有利于卵母细胞的成熟、胚胎的发育及胚泡的着床.

孙丽君,孙慧霞,钱秋然,岳丽芳,王兴玲,管一春,李薇薇,娄华 - 中国优生与遗传杂志

文章来源：万方数据

人骨髓间充质干细胞体外不同分离与培养方法的比较

目的探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)理想的分离、培养方法.方法采用密度梯度离心法和全骨髓贴壁法分离培养人骨髓干细胞,并将其分别置于普通培养瓶、60Co培养瓶中培养,应用倒置显微镜和免疫组化法观察和鉴定骨髓间充质干细胞;流式细胞术检测细胞表面标志.结果人骨髓干细胞呈均一梭形、成纤维细胞样,形成集落样生长.60Co培养瓶细胞贴壁情况明显好于普通培养瓶,且费用低;免疫组化及流式细胞术显示CD34、CD45表达为阴性,CD29、CD44表达为阳性.60Co照射处理的培养瓶结合采用全骨髓贴壁法分离培养法获得的骨髓干细胞活性高,增殖力强,克隆形成早,传代时间短.结论全骨髓贴壁法和密度梯度离心法均可获得高纯度贴壁生长的骨髓干细胞,其中60Co照射处理的培养瓶结合采用全骨髓贴壁法分离培养简单易行,骨髓干细胞增殖快,活性好,传代力持久.可以收获大量、高纯度的MSCs;本实验为MSCs进一步的研究与临床应用提供了实验方法及依据.

刘贤华,仝青英,白晓东 - 武警医学

文章来源：万方数据