-
Biochemical characterization of human peroxiredoxin 2, an antioxidative protein
Sheng Yan, Shaopei Chen, Zhendong Li, Haiying Wang, Tuxiong Huang, Xiaoning Wang, Jufang Wang - 生物化学与生物物理学报(英文版)文章来源： 万方数据 -
DP1/02株鸭源Ⅰ型副黏病毒F基因真核质粒构建及免疫试验
应用RT-PCR方法从鸭源Ⅰ型副黏病毒DP1/02株中扩增F基因并克隆入pMD18-T载体,经序列测定、分析,DP1/02株F基因与鸡新城疫病毒(NDV)国家标准强毒F48E9株的核苷酸、氨基酸序列同源性均达到99%.随后将F基因克隆入真核表达载体pCI-neo,构建真核表达质粒pCI-F,将阳性质粒体外转染Vero细胞,通过间接免疫荧光对真核质粒的表达进行鉴定,利用pCI-F质粒进行动物试验.结果表明构建的真核表达质粒pCI-F能够在Vero细胞中表达,雏鸭免疫14d后在体内可检测到特异性抗体,二次免疫雏鸭后,对NDV强毒的攻毒保护率为73%.本试验为利用F基因构建的核酸疫苗提供了重要的技术支持.张秀峰,王中华,刘佳旭,刘艳华,母连志,李国江,丁壮 - 中国兽医学报文章来源： 万方数据 -
精液处理前后精子的DNA损伤与活性氧之间的关系研究
目的 探讨精液处理前后精子DNA损伤程度的改变及与过氧化氢(H2O2)、过氧化氢酶(CTA)之间的关系.方法 接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕且进行常规IVF受精的夫妇75例,男性患者作为研究对象.在IVF当日精液采集后0.5h留取精液标本1ml,剩余精液以Pure Sperm梯度离心法进行精液处理,于处理后将精子浓度调整为10*106/ml,留取标本1ml.采用精子吖啶橙染色方法测定精子DNA损伤,H2O2及CTA含量测定采用分光光度比色测定法.结果 精液处理后的精子DNA损伤程度与处理前相比明显降低(P<0.05),H2O2浓度亦显著降低(P<0.05),CTA浓度变化不显著.精子DNA损伤率在精液处理前及处理后均与H2O2浓度呈正相关(r值在处理前后分别为0.684和0.753,P<0.05),精子DNA损伤率在精液处理前与CTA浓度呈负相关(r=-0.476,P<0.05),而处理后两者无相关性(r=-0.087,P>0.05).结论 高过氧化物水平可导致精子DNA损伤,精液优化处理可以使精子脱离高活性氧的环境,并且减少DNA损伤的精子.张娜,张耀恒,张轶,赵世彬,乜照燕,刘敬泽 - 中国男科学杂志文章来源： 万方数据 -
围生期营养不良对仔鼠学习记忆功能的影响
目的 研究围生期营养不良对仔鼠学习记忆的影响,探讨其可能的机制.方法 怀孕14 d的SD大鼠分为实验组(半量饮食组)与对照组(正常饮食组),至哺乳期结束(仔鼠出生21 d)后实验组和对照组的仔鼠均正常饮食.测量仔鼠出生时和成年时的体质量.采用Morris水迷宫测试仔鼠的学习、记忆功能.免疫组化检测DNA氧化损伤(8-OhdG)和Western blot检测DNA氧化损伤修复(OGG1)指标.结果 实验组仔鼠出生和成年后体质量均小于对照组[(4.66±0.28) g vs (6.59±0.16)g,(187.66 ±22.67)g vs(279.50±18.73)g,P<0.01];Morris水迷宫实验中,空间探索实验实验组较对照组潜伏时间长[(37.21 ±4.93) svs (16.41 ±5.21)s,P<0.05],穿越平台次数较少[(6.57 ±1.22)vs(13.12 ±2.34),P<0.05],跨越目标象限时间占整个游泳的时间百分率低[(32.75±4.58)%vs (60.31±6.74)%,P<0.01],Morris水迷宫实验表明实验组学习记忆功能均比对照组下降;8-OHdG的表达在幼年期(22 d)和成年期(90 d)实验组均比较高,与对照组相比具有统计学意义[(18.01±0.05)vs(5.77 ±0.03),(21.15±0.10)vs(10.81 ±0.08),P<0.05];OGG1的表达在幼年期(22 d)和成年期(90 d)实验组均比较低,与对照组相比差异具有统计学意义[(0.32±0.08)vs(0.81±0.06),(1.57 ±0.10) vs (2.78 ±0.53),P<0.05].结论 围生期营养不良对仔鼠成年期的学习记忆功能产生影响,其机制可能与DNA氧化损伤、修复调节的障碍有关.康卓君,王永红,罗强,王小林,董为伟 - 第三军医大学学报文章来源： 万方数据 -
蚜虫内共生菌基因组DNA提取方法的比较和优化
为探究蚜虫共生菌基因组DNA的提取方案,以桃蚜为试验材料,比较了目前较为常用的4种蚜虫基因组DNA提取方法,从DNA纯度、完整性、PCR扩增效率及稳定性等方面进行了比较和评价,并通过调整蛋白酶K用量和水浴温度及时间对STE法进行了优化.结果表明,4种方法提取的蚜虫共生菌基因组DNA均可用于共生菌的PCR扩增检测;CTAB法和SDS法提取的DNA纯度较高,条带较完整,稳定性相对较高,不易降解,而STE法和PCR缓冲液法操作简便,适于快速提取单头蚜虫共生菌的基因组DNA,但纯度相对较低;可根据试验条件和要求进行选择.STE法优化条件为:用30μL STE缓冲液将蚜虫匀浆,加入1.5μL 20 mg/m L蛋白酶K,于56℃水浴1.5 h;再加入0.1μL 10 mg/L RNA酶,于37℃培养1 h,95℃下处理5 min,5 000 r/min离心3 min,将提取到的DNA于-20℃保存或直接用于PCR扩增.优化后的STE法可作为提取蚜虫共生菌基因组DNA经济而快捷有效的方法.宋月,樊永亮,武丽娟,张战凤,刘艳红,刘同先 - 植物保护学报文章来源： 万方数据 -
DNA检测方法在鱼类物种鉴定中的应用
总结了近年来在鱼类物种鉴定中常用的DNA序列分析、DNA指纹技术、物种特异性聚合酶链式反应和实时荧光PCR技术等DNA检测方法,同时对各类方法的特点和局限性进行了分析.王嘉鹤,陈双雅,陈伟玲,徐敦明,周昱 - 海南大学学报(自然科学版)文章来源： 万方数据 -
线粒体DNA稳定性与疾病的关系
线粒体是真核细胞内进行氧化磷酸化和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)合成的细胞器,为细胞活动提供能量,有"细胞动力工厂"之称.此外,线粒体还是细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生的主要场所,并能启动和执行细胞的凋亡[1].线粒体由核基因和线粒体基因组共同编码,其DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)和(或)核DNA(nuclear DNA,nDNA)的遗传缺陷均可引起线粒体功能障碍而导致疾病发生.1线粒体DNA黄珊,高文祥,高钰琪 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
中心组合设计法优化载基因壳聚糖纳米粒的最佳转染制备区域
目的采用中心组合设计法优化载基因壳聚糖纳米粒的最佳转染制备区域.方法采用复凝聚法制备载质粒基因的壳聚糖纳米粒,选择壳聚糖浓度和质粒基因浓度作为实验考察因素,应用两因素五水平中心组合设计优化最佳转染制备区域,优化指标选择平均粒径和基因转染率.通过透射电镜观察纳米粒的形态;通过动态光散射和电泳光散射技术分别测量纳米粒的粒径和Zeta电位;通过凝胶电泳分析考察质粒在纳米粒制备过程中的稳定性;通过倒置荧光显微镜观察质粒基因在细胞内的表达;通过流式细胞技术测定纳米粒的转染效率.结果成功优化了载基因壳聚糖纳米粒的最佳转染制备区域.优选条件下制备的纳米粒大多呈球形,纳米粒平均粒径为217.6 nm,粒径多分散系数为0.241,表明粒径分布较窄.纳米粒zeta电位为+22.4 m V,表明纳米粒表面带有正电荷,可以增加纳米粒混悬液的稳定性.凝胶电泳分析结果表明质粒基因在纳米粒制备过程中没有遭到破坏.纳米粒的细胞转染效率比较高,能够高效地将绿色荧光蛋白质粒基因递送到细胞内,并且基因表达产生绿色荧光蛋白.结论本研究建立的数学模型具有良好的预测性.在优化的制备区域内制备的载基因壳聚糖纳米粒的转染性能比较理想.邵帅,崔光华,周旭,高钟镐,黄伟 - 药学实践杂志文章来源： 万方数据 -
系统中DNA编码及算法分析
在计算DNA的过程中,所面临的一大难点就是以表达和传递信息为主要目的编码问题,计算DNA的可靠性在一定程度上取决于编码设计的有效性.首先从遗传密码表、用户DNA配置以及文件DNA编码三方面对编码加以阐述,从DNA操作算子以及访问控制的自然计算过程两方面对算法加以介绍.蒋瀚洋,郑光勇,朱雅莉 - 煤炭技术文章来源： 万方数据 -
人类mtDNA D-Loop区位点变异对基因表达的影响
Case-Control研究表明,人线粒体基因(mtDNA) D-Loop区mt235、mt514-515、mt16183、mt16290和mt16319多态位点与有氧运动能力有关.拟从下游基因表达做进一步的研究,以探讨上述多态位点的分子调控机理.方法:采用全基因组合成法合成包含上述多态位点的DNA序列,分别连接到pGL3-promoter载体构建重组质粒,将重组质粒转染至293T细胞,观察携带5对mtDNA质粒对下游双荧光素酶报告基因的表达及荧光素酶mR-NA表达的影响.结果:携带mt235A、mt514-515CA、mt16183A和mt16319G的载体转染细胞的双荧光素酶基因表达量显著高于mt235G、mt514-515Del、mt16183C和mt16319A(P<0.01);携带mt16290两种基因型的质粒转染细胞报告基因表达没有明显差异.与pGL3-promoter载体相比,携带mt16319A的质粒转染细胞荧光素酶mRNA极显著下降(P<0.01),携带mt16290位点的两种质粒对报告基因mRNA的影响没有差异.结论:mt235、mt514-515、mt16183和mt16319多态位点影响荧光素酶基因表达,mt235A、mt514-515CA和mt16183A上调基因转录和翻译,mt16319A下调基因转录.这些基因表达上的差异可能是影响人有氧运动能力的重要调控因素.龚丽景,胡扬,李燕春,梅涛 - 体育科学文章来源： 万方数据
科创中国
