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TMEM16A钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞的表达及其电生理特性研究

目的:探讨跨膜蛋白16A(TMEM16A)钙激活氯离子通道在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞的表达及其电生理特性。方法:构建pUB6/V5-TMEM16A真核表达载体。脂质体方法转染TMEM16A至FRT细胞,同时优化脂质体和载体的量和比例,获得最佳转染效率和表达效果,杀稻瘟菌素( blasticidin )进行抗生素筛选,获取稳定表达TMEM16A的FRT细胞株。 RT-PCR和免疫荧光检测TMEM16A于FRT细胞的表达情况;倒置荧光显微镜下观察TMEM16A在FRT细胞中的表达和定位;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L检测TMEM16A钙激活氯离子通道的功能。结果:BamHⅠ和XbaⅠ双酶切的琼脂糖凝胶电泳和测序结果表明目的基因TMEM16A成功克隆到真核表达载体pUB6/V5中;RT-PCR和免疫荧光实验结果表明经杀稻瘟菌素筛选后的FRT细胞在mRNA和蛋白水平表达TMEM16A,倒置显微镜下观察结果表明TMEM16A在FRT细胞膜上有表达;应用全细胞膜片钳技术和卤族元素敏感的荧光蛋白YFP-H148Q/I152L证实稳定表达于FRT细胞的TMEM16A具有经典的钙激活氯离子通道特性。结论:FRT细胞可高效表达TMEM16A。 TMEM16A是钙激活氯离子通道的分子基础。

郝峰,白雪松,鞠晓红,方芳,藏雨轩,朱杭飞,向国艳,张雲乔,袁忠海 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

EBV-LMP2A和β-catenin蛋白在鼻咽癌中的表达关系及意义

目的探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白2A(latent membrane protein 2A,LMP2A)和β-连环素(β-catenin)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达关系及其临床意义.方法应用免疫组化SP法检测LMP2A和β-catenin蛋白在32例鼻咽黏膜慢性炎、56例NPC和18例NPC淋巴结转移灶中的表达,采用Western blot法和免疫荧光细胞化学染色法观察LMP2A和β-catenin蛋白在CNE2-LMP2A细胞及其对照组CNE2-Vector和CNE2细胞中的表达.结果 (1)LMP2A在NPC及其淋巴结转移灶中的阳性率分别为89.3%(50/56)和77.8%(14/18),均明显高于鼻咽黏膜慢性炎(37.5%,12/32)(P均<0.01);β-catenin在NPC及其淋巴结转移灶中的异常表达率分别为62.5%(35/56)和83.3%(15/18),均明显高于鼻咽黏膜慢性炎(3.1%,1/32)(P均<0.01);LMP2A与β-catenin正常表达呈负相关(rs=-0.391,P<0.01);LMP2A和β-catenin蛋白在鼻咽癌T分期、N分期和临床分期组间表达率的差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).(2)CNE2-LMP2A细胞中β-catenin蛋白表达水平明显高于CNE2-Vector和CNE2细胞;CNE2-LMP2A细胞中β-catenin胞质和胞核的表达水平明显高于CNE2-Vector和CNE2(P均<0.01).结论 LMP2A高表达和β-catenin异常表达与鼻咽癌临床生物学行为进展密切相关,其机制可能与LMP2A上调β-catenin蛋白水平并促进其核转位有关.

赵利容,饶洁,王艳,罗泊涛,陈小毅 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

Cdc25a在跨种属肝癌组织中的表达及其意义

目的:研究细胞周期通路中的细胞分裂周期蛋白25a (Cdc25a)在人、大鼠和树鼩不同种属的肝癌、癌旁及正常肝组织中的表达和意义,进一步验证跨种属筛选肝癌关键基因研究策略的可行性.方法:采用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测人、大鼠和树鼩的肝癌及其相应癌旁组织以及正常肝组织中Cdc25a mRNA和蛋白表达水平.结果:Cdc25a mRNA表达水平在人、大鼠和树鼩的肝癌组织中均高于正常肝组织(均P<0.05);在人和大鼠肝癌组织中的表达高于其对应的癌旁组织(P<0.05);其余各组织间mRNA表达水平的差别无统计学意义(均P>0.05).Cdc25a mRNA在人肝癌组织中的表达水平与病人的临床分期、门脉癌栓及肝外转移明显相关,而与术后复发、肿瘤直径、肿瘤个数、血清甲胎蛋白水平和肿瘤分化无明显关系.Western blotting检测结果显示Cdc25a在人、大鼠和树鼩肝癌组织中的蛋白表达水平均较癌旁和正常肝组织显著上调.结论:Cdc25a有可能是影响肝癌发生和发展的重要分子之一,跨种属筛选肿瘤关键基因策略可能有助于发现肝癌关键基因.

卢晓旭,曹骥,李瑗,孙雯,朱伶群,杨春,苏建家 - 中国病理生理杂志

文章来源：万方数据

中华硬蜱TROSPA的发现与鉴定

笔者从我国莱姆病媒介蜱种中华硬蜱中鉴定出莱姆病螺旋体外膜蛋白A受体TROSPA.中华硬蜱幼蜱体内的两个cDNA克隆I.sin-1 (258 bp)和I.sin-2 (462 bp)经序列比对和分析属于TROSPA.其中,I.sin-2的氨基酸序列同肩板硬蜱I.scapularis、篦子硬蜱I.ricinus和全沟硬蜱I.persulcatus的相似度分别为88.2%、88.5%和88.8%,而I.sin-1则分别存在46%、46.1%和45.6%的相似度.中华硬蜱TROSPA的发现为解释了中华硬蜱传播莱姆病的机制以及研究中华硬蜱与病原体的相互关系奠定了基础.

王欣,孙毅,曹务春,蒋宝贵,贾娜,倪雪冰,张圆 - 寄生虫与医学昆虫学报

文章来源：万方数据

参附注射液对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠大脑皮质分子伴侣介导的自噬激活的干预作用

目的:探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后大脑皮质分子伴侣介导的自噬(CMA)活性的变化及参附注射液的干预作用.方法:参照Rice法制备HIBD模型.将新生7日龄SD大鼠随机分为假手术组(S组)、生理盐水对照组(C组)、参附注射液治疗组(SF组),每组按照观察时间依次分为6 h、12 h、1 d、3 d、5 d、7 d六个亚组,每个亚组8只大鼠.采用免疫组化法和Western Blot法检测大鼠大脑皮质溶酶体相关膜蛋白-2A(LAMP-2A)的表达情况.结果:免疫组化法和Western Blot法显示LAMP-2A在S组各时间点表达水平差异无统计学意义(P>0.05);C组和SF组LAMP-2A的表达水平在各时间点较S组明显升高(P<0.05),且在3 d达到高峰,随后其表达水平下降;SF组LAMP-2A的表达水平在6 h、12 h、1 d较C组高(P<0.05),但其3 d时峰值表达水平较C组低(P<0.05).结论:HIBD时存在CMA现象,参附注射液在早期能促进LAMP-2A大量表达,后期则抑制其过度表达,从而对HIBD后的新生大鼠可能具有保护作用.

张芳芳,王军,刘芳,刘文强,杨倩倩 - 儿科药学杂志

文章来源：万方数据

外部研发机构联系能否提升企业创新?-跨界搜索的中介作用

外部研发机构联系能否提升企业创新?为了回答这一问题,本文结合社会网络理论和创新搜索理论,系统研究了外部研发机构联系、跨界搜索以及企业创新之间的关系.利用270家制造企业的研究样本进行了实证研究,结果表明制造企业与外部研发机构建立联系能够提升企业创新,技术知识和市场知识的跨界搜索在外部研发机构联系和企业创新之间起着完全中介作用.外部研发机构联系促进了技术知识和市场知识的跨界搜索,这两种知识的跨界搜索反过来增强了企业创新.研究还表明外部研发机构联系对技术知识跨界搜索的影响比对市场知识跨界搜索的影响更大.

张文红,赵亚普,陈爱玲 - 科学学研究

文章来源：万方数据

食癌鳞癌中LRP16基因的表达及临床意义

目的探讨白血病相关蛋白16(leukemia related protein 16,LRP16)基因在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及其与临床病理特征的关系.方法采用免疫组化SP法检测276例ESCC组织及60例癌旁正常食管黏膜组织中LRP16蛋白的表达.结果 ESCC中LRP16蛋白阳性率(63.0%,174/276)显著高于正常食管黏膜组织(30.0%,18/60),差异有统计学意义(P<0.05).ESCC中LRP16蛋白表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关(P<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分化程度及远处转移无关(P>0.05).结论 LRP16基因可能参与ESCC的发生、发展,在ECSS淋巴结转移中发挥重要作用.

王金胜,韩为东,马丽莉,杨建洲,文继舫 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

细胞块p16联合高危型HPV检测在ASCUS患者分流管理中的作用

目的探讨细胞块p16联合高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papillomavirus,HR-HPV)检测在未明确意义的非典型鳞状上皮(atypical squamous cell of undetermined significance,ASCUS)患者分流管理中的作用.方法选取108例子宫颈液基细胞学诊断为ASCUS的病例,同时行HR-HPV杂交捕获法Ⅱ(hybrid capture 2,HC2)检测及免疫组化p16染色,均行阴道镜下活检.结果 (1)p16表达率和HR-HPV检出率在炎症组、湿疣/CIN1、CIN2、CIN3组中分别为12.5% (6/48)和31.25%(15/48)、60.53% (23/38)和84.21% (21/38),84.62% (11/13)和92.31%(12/13)、100% (9/9)和100% (9/9),组间差异有统计学意义(P<0.001);湿疣/CIN1组与CIN2/3组间p16表达率分别为60.53% (23/38)、90.91% (20/22),差异有统计学意义(P<0.0125).(2)p16联合HR-HPV检测、单纯行p16和HR-HPV检测在ASCUS中分流子宫颈病变的敏感性和阴性预测值分别为98.33% (59/60)、71.67% (43/60)、88.33% (53/60),97.06% (33/34)、71.19% (42/59)、82.5% (33/40),差异均有统计学意义(P<0.05).p16 +/HC2+者高级别病变检出率(44.19%,19/43)与p16-/HC2+者(8%,2/25)比较差异有统计学意义(P <0.001).结论 p16蛋白可以作为一种辅助诊断CIN的免疫组化标志物.细胞块p16联合HR-HPV检测可以有效分流ASCUS中的子宫颈病变患者.

戈文舜,任丽芳,李美平,蔡红光,杨惠英,张鹏,鲁波,包磊 - 临床与实验病理学杂志

文章来源：万方数据

"物质跨膜运输的实例"(第一课时)的探究教学

本文总结了"物质跨膜运输的实例"的探究教学实践:引导学生观察分析"渗透现象"实验,归纳总结渗透作用的条件;利用类比推理法帮助学生构建动物细胞吸水和失水的原理;通过探究植物细胞吸水和失水的实验,培养学生的科学探究能力.

刘元风 - 生物学教学

文章来源：万方数据

趋化因子CXCL16在乳腺癌中的表达及其意义

目的:探讨趋化因子CXCL16在乳腺癌中的表达及其意义。方法收集2012年3月至2013年12月深圳市妇幼保健院94例浸润性乳腺癌、20例乳腺原位癌以及20例乳腺良性病变组织标本,应用免疫组织化学方法检测CXCL16的表达情况,并分析其表达与乳腺癌患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期及淋巴结转移等临床病理特征之间的关系。数据分析采用χ2检验及秩和检验。结果在乳腺浸润性癌、原位癌和良性病变组织3组之间, CXCL16蛋白表达的差异具有统计学意义(χ2=22.058,P=0.000)。浸润性乳腺癌中 CXCL16蛋白的表达均高于原位癌和良性病变组织( P=0.007、0.000)。并且,在不同肿瘤大小、不同TNM分期和有无区域淋巴结转移的浸润性乳腺癌之间, CXCL16蛋白表达的差异均有统计学意义(Z=-2.013、-2.166、-2.222,P=0.035、0.030、0.026),而在不同年龄及组织学分级者之间,其差异均无统计学意义(Z=-0.418,P=0.676;χ2=0.011,P=0.995)。结论 CXCL16在乳腺癌的发生、发展过程中可能起一定的作用。

汤红平,刘芳,陈国艳,卢翔宇,陈莹莹,黄犁 - 中华乳腺病杂志(电子版)

文章来源：万方数据