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乙型肝炎病毒X蛋白截短突变体的构建及其对Wnt/13-catenin信号通路转录活性的影响
目的:观察乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)截短突变体在细胞内的定位及其对Wnt/βcatenin信号通路转录活性的影响.方法:采用PCR克隆全长野生型HBx基因,在此基础上,分别构建融合增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因和缺失HBx基因C端49-154aft,、C端85-154aa、N端1-57aa+C端141~154aa、N端1-57aa或N端1-84aa截短突变体的表达载体;激光共聚焦显微镜下观察HBx截短突变体在HEK293细胞中的定位;采用萤光素酶报告系统检测HBx截短突变体对Wnt/[3-catenin信号通路转录活性的影响.结果:(1)成功构建了HBx截短突变体与EGFP基因融合的表达载体.(2)野生型HBx及截短突变体在HEK293细胞中具有不同的定位,其中N端缺失突变体主要定位于细胞核周胞质;c端缺失突变体在胞质胞核中呈均匀分布;N端+C端缺失突变体的定位类似于野生型HBx,主要定位于胞质,呈不均一的粗大颗粒,胞核中也有少量表达.(3)与野生型HBx相比,HBxc端49~154aa、C端85-154Off,、N端1-57aa+c端141~154aa、N端1-57aa和N端1-84aa缺失突变体在Huh7细胞中均使Wnt/β-catenin信号通路的转录活性明显下降,分别下降了78.7%、84.7%、75.7%、93.8%和95,5%.结论:HBx不同截短突变体的细胞定位及对Wnt/β-catenin信号通路转录活性不同,提示HBx的不同功能区对Wnt信号的转录激活发挥着不同的作用.谢青,陈林林,牵治,聂丹,段玉洁,权会琴,唐霓 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
Sp3对β-catenin基因转录调控作用初探
目的:观察转录因子Sp3对β-catenin启动子转录活性的影响,探讨Sp3与Wnt/β-catenin信号通路的关系.方法:采用脂质体法将Sp1和(或)Sp3转录因子表达质粒单独/共同与β-catenin启动子(-410/-1bp)报告基因质粒瞬时转染HEK293T细胞;通过双萤光素酶报告基因实验检测报告基因转录活性的变化.结果:(1)Sp1表达质粒在0.4μg剂量时能提高启动子的活性2.4倍,Sp3表达质粒在0.4μg剂量时能显著提高启动子的活性5.3倍.(2)0.4μg总量的Sp1与Sp3表达质粒共转染293T细胞,随着Sp3/Sp1比例的递增,β-catenin启动子转录活性无明显变化.(3)共同转染Sp1 0.3μg与Sp3 0.1μg时,启动子活性提高3.5倍,比单独转染的转录活性强.结论:Sp3能促进β-catenin基因启动子(-410/-1 bp)的转录,Sp1的转录激活作用则较弱;在转录过程中Sp1和Sp3可能存在协同作用;Sp3可能在转录水平调控β-catenin的表达从而影响Wnt/β-catenin信号通路.黄兰姗,黄子凌,冯振博,陈罡,危丹明 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
转录调节因子1α在乳腺癌中的表达及其作用机制
机体的生长发育离不开细胞内基因表达的调控.基因表达调控的关键是转录因子结合到特定的DNA序列,并随后调控基因的转录.有大量的转录因子使用一个保守的锌指结构域结合自己的目标DNA片段.三重基序蛋白(tripartite motif,TRIM)家族都具有相同的结构域,即N-末端的RING-Bbox-coiled-coil(RBCC)基因序列、bromo结构域、保守中心序列区以及C-末端的PHD指状结构域,此外该家族还都具有一个可变的C-末端,因此TRIM家族也称为RBCC家族.自从1991年肖传光,李良,丁宇,王猛,胡玮 - 中华乳腺病杂志(电子版)文章来源： 万方数据 -
朱砂根抑制α-葡萄糖苷酶与抗氧化活性研究
对朱砂根抑制α-葡萄糖苷酶与抗氧化活性进行研究.利用96微孔板法筛选α-葡萄糖苷酶抑制活性;采用DPPH、ABTS和FRAP方法分析抗氧化活性.结果表明,乙酸乙酯部位抑制α-葡萄糖苷酶的活性最高(IC50=39.27 μg/mL),石油醚部位次之(IC50 =56.11 μg/mL),正丁醇部位活性最弱(IC50=62.05μg/mL),但均远大于阳性对照Acarbose(IC50=1081.27 μg/mL);乙酸乙酯部位抗氧化能力最强,正丁醇部位次之.乙酸乙酯部位清除DPPH自由基(IC50=38.55 mg/L)的能力比BHT( IC50=18.71 mg/L)低1/2,清除ABTS自由基的能力(IC50=3.60 mg/L)比BHT(IC50=7.44 mg/L)强,但比BHA(IC50=1.74 mg/L)弱,还原Fe3+的能力(FRAP=512.99 ±6.80 μmoTE/g)为BHT(FRAP=1581.68±97.41μmol TE/g)的1/3.结果显示朱砂根乙酸乙酯部位抑制α-葡萄糖苷酶和抗氧化活性最好.李园园,李锟,王俊霞,康文艺 - 天然产物研究与开发文章来源： 万方数据 -
位于Hox基因簇的miRNA与亨廷顿病的发病机制有关
转录调节异常被认为是亨廷顿病(Huntington disease,HD)的发病原因,而微小RNA(miRNA)在基因的转录后调控中起重要作用.Hoss等对12名HD患者和9名对照者的大脑前额叶皮质(Brodmann 9区)样本进行二代miRNA测序,发现5个miRNAs(miR-10b-5p、miR-196a-5p、miR-196b-5p、miR-615-3p和miR-1247-5p)在HD患者中高表达,其中miR-196a-5p、miR-- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
转录因子 CDX2过表达对人胃癌 SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响
目的:探索CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖、生长和细胞周期的影响及其分子机制。方法:采用携带CDX2基因的重组慢病毒颗粒( LV-CDX2-GFP)感染SGC-7901细胞,作为实验组( LV-CDX2-GFP组);以对照慢病毒颗粒( LV-GFP)感染SGC-7901细胞,作为阴性对照组( LV-GFP组);空白对照组常规培养,不做任何处理。分别采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组细胞周期的分布,半定量逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)和Western blotting 技术检测细胞中CDX2、Bax、Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达。结果:与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-CDX2-GFP组细胞增殖活力明显降低(P<0.05),G0/G1期所占比例上升(P<0.05),Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒介导的CDX2过表达抑制胃癌细胞增殖和生长,使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能与CDX2过表达使胃癌细胞Bcl-2、cyclin D1、survivin表达下调和Bax表达上调有关。曹稳珑,韦尉元,张笑石,罗文,严林海,谢玉波,肖强 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
细菌sRNA功能、预测及鉴定方法的研究进展
生物体中除了mRNA、tRNA、rRNA三种我们熟知的RNA外,还存在大量的非编码RNA(non-coding RNA).它们隐藏于基因组内的信息层,有学者称之为基因组内暗物质,不可见却执行着新层次调控基因表达的功能[1].研究者在对非编码RNA的研究中发现了大量具有转录后调控功能的非编码小RNA,如MicroRNAs(miRNAs)、Small赵小凯,竹俊兰,严浩,王慧利 - 温州医学院学报文章来源： 万方数据 -
高交感活性诱导的大鼠心肌损伤模型中氧化应激的受体调控机制
目的:研究高交感活性诱发大鼠心肌损伤的氧化应激受体调控机制。方法:Sprague-Dawley ( SD)大鼠随机分为对照组、模型组、普萘洛尔(Pro)组、哌唑嗪(Praz)组、普萘洛尔+哌唑嗪(Pro+Praz)组、维生素E (VE)组及普萘洛尔+哌唑嗪+维生素E (Pro+Praz+VE)组,除对照组外其余各组均腹腔注射去甲肾上腺素( NE)复制高交感活性引起的心肌损伤模型,同时灌胃给予相应药物,连续给药16 d,期间监测各组动物体重的变化。16 d后进行心室重构指标(心指数和羟脯氨酸含量)、病理组织学检查、氧化/抗氧化指标( MDA、SOD、CAT、GSH-Px和T-AOC)和能量代谢指标( Na+-K+ATPase和Ca2+-Mg2+ATPase)分析。结果:从第9天开始,模型组动物体重与对照组的比较差异有统计学意义(P<0.05),心指数和左心室肥厚明显增加,氧化/抗氧化和能量代谢障碍;Pro、Praz、Pro+Praz和VE各组均出现不同程度的动物体重、心指数、左心室肥厚和氧化/抗氧化失衡的改善;Pro、Praz和Pro+Praz能明显升高左心室Na+-K+ATPase和Ca2+-Mg2+ATPase的活性,Pro+Praz作用最明显( P<0.05)。结论:肾上腺素受体依赖是高交感活性诱导心肌氧化应激损伤的重要途径。- 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
STAT5a在乳腺癌组织中的低表达与患者不良预后相关
目的:检测信号转导和转录活化蛋白5a(signal transducer and activator of transcription 5a,STAT5a)在浸润性乳腺癌组织中的表达情况,探索STAT5a在乳腺癌患者中潜在的临床意义.方法:采用免疫组织化学染色的方法检测100例浸润性乳腺癌组织及10例正常乳腺组织标本中STAT5a的表达情况;收集入组乳腺癌患者的临床病理资料,并对所有入组乳腺癌患者进行至少5年的随访;分析STAT5a表达情况与乳腺癌患者临床病理特征、预后的关系.结果:(1)100例浸润性乳腺癌中STAT5a的阳性表达率为46%,显著高于正常乳腺组织(P<0.05),乳腺癌中STAT5a的表达与肿瘤分级、激素受体状况显著相关(P<0.05).(2)生存分析显示,STAT5a阳性组乳腺癌患者5年生存率较STAT5a阴性组高,2组比较差异有统计学意义(P<0.05).(3)单因素分析发现临床分期、淋巴结转移情况、STAT5a与患者5年生存率之间存在关联,并有统计学意义(P<0.05).(4)Cox回归模型显示:STAT5a、淋巴结转移情况及临床分期是影响乳腺癌患者生存的独立预后因素.结论:高分化、激素受体阳性乳腺癌组织高表达STAT5a.STAT5a阴性表达的乳腺癌患者预后较差,STAT5a可作为判断乳腺癌患者预后的指标.刘威,龙梅珺,吴珏堃,李玺,邱万寿 - 中国病理生理杂志文章来源： 万方数据 -
大豆多肽的降压活性及其相对分子质量分布研究
采用以FAPGG为底物的酶活力检测法对由不同蛋白酶(碱性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶)水解制备的大豆多肽的降压活性进行了测定.结果表明,碱性蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶三酶联合水解制备的大豆多肽具有较好的降压活性,其ACE抑制率达62.78%.经超滤发现,5kDa膜滤过液中多肽含量最多,占总量的73.44%,降压活性最强,其ACE抑制率达84.44%.最后,采用SephadexG-25凝胶色谱进一步分离纯化,得到5个峰,其相对分子质量在1 200以下的组分约占75%,其中相对分子质量在250-600左右的组分占47.6%,降压活性最强,ACE抑制率达92.15%.孙强,黄纪念,芦鑫,宋国辉 - 中国食物与营养文章来源： 万方数据
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